线粒体转铁蛋白mitoferrin的生理功能分析

《线粒体转铁蛋白mitoferrin的生理功能分析》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在行业资料-天天文库。

1、J■，、一、Y，lq温州医学院硕士学位论文器官发育和程序性细胞死亡的几个关键因素，并证明相应的调节基因在高等动物和人体中也存在，对医学研究有着重要的意义。随着科技的发展，更多的研究手段被用在线虫上，例如RNAi技术等。大大促进了生命科学学科的进步【23-24】O秀丽隐杆线虫体长约1．2衄，身体透明。秀丽隐杆线虫的主要是雌雄同体，也有较少的雄虫。大概为1／500。但在实验室里可以用热激的办法来产生雄性个体用于遗传交配。这样的性别区分非常有利于对线虫的遗传操作，我们既可以使线虫以雌雄同体的形式自交传代以保持某种基因型，也可以让不同基因型的雌雄同体和雄虫进行杂交以改变线虫

2、的基因型。其性别分化是由染色体决定的，线虫有5对常染色体(AA)和l对性染色体(X)，雄虫细胞核型为(5AA+X0)，双性体为(5AA+殛)。双性体可以自体交配繁殖，也可以与雄性交配繁殖。自体交配所产后代多为双性体，而与雄性交配的后代，50％为雄性，50％为双性体【25】。一条野生型雌雄同体线虫可以产后代300个左右。线虫的繁殖周期在20度约为3．5天，寿命为2．3周。线虫的发育经过卵，L1，L2，L3，IA四个幼虫期及成虫期。线虫在发育过程中共生成1090个细胞，但是其中131个会凋亡嗣。雌雄同体的成虫共有959个体细胞，雄虫有1031个体细胞组成。秀丽线虫是第一

3、个完成全基因组测序的动物，它的基因组序列大约编码2．3万个基因，其中至少40％的基因与人同源。．，●'^’、-‘q温州医学院硕士学位论文图A．22度时线虫的生命周期图线虫以大肠杆菌为食，在实验室中主要在铺有OP50或者HTll5的NGM板上，放于15℃，20℃度、或者25"C恒温培养箱中进行培养。一般实验室培养用20℃，根据情况也可放于15℃或者25℃，一般情况下线虫的生长周期为3天，生命周期为2周多127J。如图A所示。O分钟为受精时间，箭头和蓝色数字表明经过一个阶段所需的时间。受精后约40分钟，受精卵发生第一次细胞分裂；150分钟后卵被排到体外并形成原肠胚。以雌

4、雄同体为例简单介绍线虫的解剖结构(图B)，成虫长约1．2ram，主要有上皮系统，神经系统，外分泌系统，肌肉组织，腔胞，消化系统(包括咽部，肠部，直肠和肛门)，生殖系统等【2酊。—锑删蟹嗍图B线虫解剖图线虫因为基因型、表型、行为学特征等方面的不同，分为不同的种系，我们使用的野生型种系是BristolN2，它最早于20世纪50年代在英国一家蘑菇农场中分离出来，现在研究秀丽线虫所用的线虫种系几乎都是由这个种系派生出来的。线虫是一种优秀的模式生物(1)线虫的培养简单便宜，且身体半透明，使我们能够在活体状况下，通过8温州医学院硕士学位论文显微镜直接观察体内器官的形态和荧光标记

5、，高分辨率的显微镜甚至可以直接定位活体的细胞和亚细胞结构。(2)线虫身体结构简单，其细胞谱系已经被完全描述清楚。(3)具有大量和高等哺乳动物同源的基因，对线虫中基因的功能研究有利于快速揭示基因在高等动物特别是人类中的新的作用。用线虫可以更易于揭示生命过程的分子机制。(4)生长周期短，从一个受精卵发育成可以产卵的成虫只需3天，且一只雌雄同体线虫可以产生约300个受精卵，如果在一个培养皿上放几只线虫，几天就可以得到大量子代。(5)线虫的两种性别特征非常有利于对其的遗传操作，我们即可以使线虫以雌雄同体的形式自交传代以保持某种基因型，也可以让不同基因型的雌雄同体和雄虫进行杂

6、交以改变线虫的基因型。(6)线虫还可以像大肠杆菌和细胞一样在一80"C冰箱或液氮中长期储存，这就为大量保存各种遗传背景的线虫种系提供了极大的便利，这个特征是目前其它模式生物所不具备的。线虫研究的常用资源：(1)wormbase(http：／／www．wormbase．org)是最重要的线虫生物信息学网络资源，包含有基因组学、遗传学、解剖学等非常有用的信息，还列出了研究机构和重要研究人员、相关文献资料的名字和简介。我们可以查到基因及该基因的序列名，基因的功能简述，在染色体组上的位置，基因的表达模式，通过基因沉默得到的该基因导致的表型，还能查到该基因的突变基因以及CGC

7、现有的带有该基因的线虫种系。(2)C．elegansgeneticcenter(C02)，线虫种系是由线虫遗传学的资源中心(Caenothabditisoenetieseenter，简称cc,c)提供的，包括各种敲除及转基因线虫。(3)C．elegansknock-outconsortium提供线虫基因敲除服务。从这里可以获得特异的基因敲除的线虫种系。类似的资源还有日本的日本国家生物资源项目(NBP—Japan)。(4)WormAtlas(www．wormatlas．org)提供了线虫解剖学的各种详细信息。线虫身体的各个部位都可以在这里查询到相关介绍的图片信息，