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1、通塞脉片对实验性糖尿病足模型大鼠作用探究［摘要］目的：观察通塞脉片(TSM)对糖尿病足(DF)模型大鼠足部创伤的治疗作用，并探讨其可能的作用机制。方法：清洁级雄性SD大鼠，除10只作空白对照组外，其他大鼠成功复制糖尿病足溃疡模型，随机分为模型组，二甲双肌组，TSM高、中、低剂量组(12.44,6.22,3.11g•kg-l)0分别于给药第1,4,8,13,18天对大鼠进行溃疡创面拍照观察伤口愈合情况，治疗18d后对足溃疡组织进行病理组织学检查，務胺法和TBA法检测血清中超氧化物歧化酶(SOD)和丙二醛(MDA)含量，放射免疫法检测血清白介素6(
2、IL-6)和肿瘤坏死因子a(TNF-a)含量，免疫组织化学法观察大鼠创面组织中VEGF的表达和毛细血管数。结果：TSM可以改善糖尿病足大鼠的病理形态学改变，加速4,8,13,18d各时相点伤口愈合，降低第18天(修复后期)大鼠血清中MDA,IL-6,TNF-a的含量，升高SOD含量，其中TSM高剂量组与模型组比较差异具有显著性(P2.3创面组织学观察每天观察创面愈合情况，以完全上皮覆盖作为创面愈合的依据，给药第1,4,8,13,18天分别对大鼠进行溃疡创面拍照；18d后取足部溃疡区样本置于10%甲醛溶液中固定，石蜡包埋，切片4um,HE染色，光
3、学显微镜下观察、拍照。根据病变轻重程度，依次半定量为1级轻度“+”，2级中度“”，3级重度“”，0级无病变组织标记为“-”o2.4血清中SOD,MDA检测给药结束后(第18天)，大鼠禁食12h,颈总动脉插管取血,3000r•min-1离心10min,留取血清，按照试剂盒说明书分别采用軽胺法和TBA法检测,用酶标仪分别在550,532nm测定吸光度并计算SOD,MDA浓度。2.5血清中促炎因子检测取血清，用放射免疫分析方法检测血清中IL-6,TNF-a的浓度，由北京华英生物技术研究所检测。2.6创面中VEGF的表达和毛细血管数的测定取足部溃疡区样
4、本置于10%甲醛溶液中固定，石蜡包埋，切片4urn,作免疫组化染色，检测创面中VEGF的表达和毛细血管数目。VEGF检测以胞浆出现棕黄色或棕褐色颗粒者判定为阳性细胞，采用图像分析软件(Image-Proplus6.0,IPP)进行分析，测定图像中阳性区域的面积和阳性比率以及吸光度值，计算VEGF的表达水平；毛细血管计数以血管内皮浆呈棕黄色为阳性，单个血管内皮细胞或细胞簇染色阳性判定为1个微血管，计算毛细血管数目。2.7统计学分析实验数据以土s表示，应用SPSS13.0软件包进行统计分析，组间比较采用单因素方差分析和q检验，P血液学指标检测了DF
5、大鼠的血清SOD,MDA浓度和IL-6,TNF-a的含量，模型组大鼠的MDA,IL-6,TNF-a较对照组大鼠显著升高，SOD较对照组显著降低，表明高脂高糖会导致自由基在体内的大量堆积，过量的自由基与生物膜中的不饱和脂肪酸发生脂质过氧化反应，产生大量的氧化中间产物，这些中间产物如IL-6,TNF-a等都是促炎介质,在伤口修复的后期(第18天)，持续的炎症反应会损伤组织的修复。实验结果表明TSM高剂量组大鼠的血清SOD含量明显高于模型组(PGUOJing,MENGQing-hai,YINQiu-yi,LINChao,MAZhi,XUBin,QIA
6、NXing,BAODong-qiao,ZHANGYa-yun,ZHANGQi~chun,BIANHui-min,HUXiao-ying(NanjingUniversityofChineseMedicine,Nanjing210023,China)[Abstract]Objective：ToobservetheeffectofTongsaimai(TSM)tabletsintreatingfoottraumaofdiabeticfoot(DF)modelrats,anddiscussitspotentialmechanism.Method:Mal
7、eSDratswereselectedtoduplicatethediabeticfootulcermodelandrandomlydividedintotheblankcontrolgroup,themodelgroup,themetfomintreatmentgroup,andTSM12.44,6.22,3.11g•kg-1groups(n=10)・Thehealingofulcerwoundswereobservedonday1,4,8,13and18.After18days,ahistopathologicexaminationwasc
8、onductedforulcertissues.Thecontentsofsuperoxidedismutase(SOD)andmalondialde
