蛇足石杉内生真菌清除dpph·和抑制乙酰胆碱酯酶活性探究

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1、蛇足石杉内生真菌清除DPPH•和抑制乙酰胆碱酯酶活性探究111摘要:为了从蛇足石杉[Huperziaserrata(Thunb.)Trev.]中分离出能产生清除DPPH•和抑制乙酰胆碱酯酶活性物质的内生真菌,采用平板分离蛇足石杉内生真菌,摇瓶发酵并测定其发酵液和菌丝体提取物清除DPPH自由基、抑制乙酰胆碱酯酶活性的能力,形态学和ITS-rDNA序列分析法鉴定获得的部分内生真菌。结果表明,共分离得到94株内生真菌,有31株内生真菌发酵产物显示出乙酰胆碱酯酶抑制活性,其中18株具有显著的抑制活性,关键词:蛇足石杉[Huperziaserrata(Thunb.)Trev.];DPP

2、H・;乙酰胆碱酯酶;内生真菌中图分类号:S567文献标识码:A文章编号:0439-8114(2014)04-0888-06EffectsofEndophyticFungiIsolatedfromHuperziaserrataonScaveningDPPH•andAchEInhibitoryDONGLi-huil,FANSan-wei1,LINGQing-zhil,QIANHai-fengl,WEIZhao-jun2(1.ZhejiangPharmaceuticalCollege,Ningbo315100,Zhejiang,China;2.SchoolofBiotechnolo

3、gyandFoodEngineering,HefeiUniversuityofTechnology,Hefei230009,China)Abstract:TheendophyticfungiisolatedfromHuperziaserratebyplatewerefermentedandidentifiedbymorphologicalcharactersandITS-rDNAsequence.TheeffectsoftheextractsfromfermentedbrothandmyceliumonDPPH•scavengingratioandinhibitionrati

4、oforAchEwereinvestigated.TheresuItsshowedthat94endophyticfungiswereisolatedfromHuperziaserrate31strainsofthemexhibitedinhibitionactivitytoAChE,while18strainsisolatedfromstem(9),leave(8)androot(1)hadsignificaninhibitionraterangedfrom50.3%to82.78%.Thefermentationof5strainssuchasS22,S29,L44,S7

5、9andS94hadbothactivityofAchE-inhibitoryandantioxidant・ThroughITS-rDNAsequenceanalysisthefivestrainswereidentifiedasArthriniumsp.,Podosporasp,Trichodermasp.,Colletotrichumsp.andColletotrichumsp・,respectively.ItisindicatedthatthereareendophyticfungiwithantioxidantandAchEinhibitoryactivityinHu

6、perziaserrate.Keywords:Huperziaserrate;DPPH•;AChE;endophyticfungi蛇足石杉[Huperziaserrata(Thunb.)Trev.]属于石杉科(Huperiaceae)石杉属(HuperziaBernh.)的蕨类植物,近年的研究[1-5]表明,蛇足石杉的主要药效成分石杉碱甲(HuperzineA)是一种强效的乙酰胆碱酯酶(Actylcholinesterase,AchE)抑制剂,用于治疗重症肌无力,能改善老年性记忆功能减退,与其他同类产品相比,副作用小[6],是目前临床上用于治疗老年性痴呆症(Alzheimer

7、sdisease,AD)的最有效的药物。研究表明,石杉碱甲能够保护神经元细胞对抗B-淀粉样蛋白产生的毒性,并提高超氧化物歧化酶(SOD)的产生[7,8]。据研究报道,石杉碱甲能通过刺激超氧化物歧化酶(SOD)的产生而加快氧自由基的清除,减少自由基损伤,保护细胞免受损伤,从而起到治疗老年性痴呆的作用[9]。因乙酰胆碱酯酶抑制剂和抗氧化剂均有治疗老年性痴呆症的作用,所以筛选过程中可以将具有抑制乙酰胆碱酯酶活性和抗氧化功能作为筛选的依据。由于野生的蛇足石杉生长非常缓慢,其资源稀少,并且全草中的石杉碱甲含量仅在

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