鸡体内caps及其代谢物残留检测方法与代谢规律的研究

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1、安徽农业大学硕士学位论文鸡体内CAPs及其代谢物残留检测方法与代谢规律的研究姓名：张伟玮申请学位级别：硕士专业：基础兽医学指导教师：曾明华201206摘要舢㈣删』舢帅帅帅0Ⅲ㈣Y2150004氯霉素类(Chlommphenicols，CAPs)药物作为常见的广谱抗菌药，曾广泛应用于畜禽疾病的控制及治疗。但其存在毒副作用，逐渐被欧盟、美国、中国等国禁止使用(氯霉素，Chlor啪phenicol，CAP)或限制使用(甲砜霉素，Thiamphenicol，TAP：氟苯尼考，Florfenicol，FF)。因此，为了保障消费者的健康和安全，有必要建立CAPs多残留检测方法并对其代谢规律进

2、行研究。本文研究了鸡组织(血浆、肌肉)中CAPs及其代谢物(氟苯尼考胺，F10rfenicolAmine，FFA)残留同时检测的液相色谱．串联质谱(LC．MS／MS)分析方法，并进一步探讨了鸡内服CAPs(剂量均为30mg·k一)后，不同时间(O．5、1、2、4、6、8、12、24、36、48、72h)血浆、肌肉组织中CAPs及其代谢物残留量的变化与代谢规律。血浆样品用氨化乙酸乙酯提取后，浓缩过膜；肌肉样品在碱性条件下用乙酸乙酯提取后，正己烷去脂，MCX小柱净化，洗脱液浓缩过膜，用高效液相色谱．串联质谱测定。采用电喷雾电离正负离子切换，多反应监测(MRM)模式测定。CAP、TAP

3、、FF和FFA分别以州z321．1、354．O、355．8和248．0为母离子；以产物离子州z152．1木和257．2，州z184．9和289．7幸，耐z184．9和335．7枣及州z130．0和230．2木作质谱检测的确证和定量离子(木为定量离子)。三种药物及代谢物在2～100ng．mL一的系列浓度范围内均呈良好线性关系，相关系数r均大于o．990。样品中氯霉素的检测限为o．1“g·k一，定量限为o．3pg·k一；氟苯尼考的检测限为0．2¨g·k一，定量限为0．5¨g。kg_1．甲砜霉素和氟苯尼考胺的检测限为1．o¨g·k∥，定量限为3．o“g·kg～。三种药物及代谢物在o．2

4、～2．0ug·kg。1的添加浓度范围内，平均回收率范围在79．3％～97．3％之间，相对标准偏差(RSD)均小于10．5％。用上述建立的检测方法进行了鸡体内CAPs及FFA残留检测，根据检测结果进行代谢规律分析。分别在O．5、1、2、4、6、8、12、24、36、48、72h取鸡血浆和肌肉样品，并测定这些组织中CAPs和FFA残留量。CAPs在各组织中的消除曲线方程分别为：Cm浆(cAP)=42．01e—o755熨，C肌肉(cAP)=2．1437e—o559‘，CJf『L浆(TAP)=159．98e。o230m，C删TAP)-1．8817e‘o202吼，C删FF)=309．99e

5、—02嗍，C删FF)-1．9228e‘o236吼。关键词：鸡、氯霉素类药物、氟苯尼考胺、液相色谱．串联质谱法、残留、代谢AbstractChloramphenicols(CAPs)wereusedtocontrolandtreatdiseaSeoflivestockandpoult巧widelyascommonbroad-spectrumantimicrobialdmgs．Becauseoftheirtoxicandsideef传cts，theyhadbeenbannedorpennittedforusebytheEuropeanUnion(EU)，USA，Chinaandoth

6、ercountries．Therefore，itwasnecessarytodevelopamethodforthesimultaneousdeterminationofCAPsresiduesandstudvtheirMetabolismmleinordertoensurehealthandsafetyofconsumer．Aliquidchromatography—tandemmassspectrometry(LC—MS／MS)methodhasbeendeVelopedforthesimultaneousdeterminationofCAPsandmetaboliteinc

7、hickentissues．ARersingle-doseadministrationwith30mg。kg～，samplesofdifrerenttime(O．5、l、2、4、6、8、12、24、36、48、72h)werestudiedwiththeresiduesandmetabolismruleinplasmaandmuscleofCAPs．Samplesofchickenplasmawereextractedbyethylacetateinbasicconditions