青果总黄酮的提取分离及药效学研究

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1、中图分类号:R284.2；R284.5硕士学位论文青果总黄酮的提取分离及药效学研究院（系）、所中药学研究生姓名杨桂林学科、专业中药学导师姓名袁叶飞副教授二0一二年三月目录中文摘要………………………………………………………………..1ABSTRACT……………………………………………………………3前言……………………………………………………………............6第一章青果总黄酮的提取与分离纯化工艺研究………………......91材料与实验…………………………………………………..............92试验方法

2、………………………………………………….................103结果与分析…………………………………………………..............134结论与讨论…………………………………………………..............16第二章青果总黄酮的鉴定及含量测定…………………………….171实验材料与仪器………………………………………………….....172试验方法………………………………………………….................173结果与分析……………………………………………….............

3、....224结论与讨论…………………………………………………............27第三章青果总黄酮的急性毒性及镇痛作用研究…………………281仪器与材料……………………………………………………........282实验方法……………………………………………………............293结果与分析……………………………………………………........304结论与讨论……………………………………………………........33第四章青果总黄酮体外抗氧化作用研究…………………………351仪器与材料……………………

4、………………………………........352实验方法……………………………………………………............363结果与分析…………………………………………………….....374结论与讨论…………………………………………………….....39第五章青果总黄酮的抗炎作用研究…………………………….401仪器与材料…………………………………………………….....402实验方法…………………………………………………….........403结果与分析…………………………………………………….....424结论与讨论

5、…………………………………………………….....44参考文献…………………………………………………………….46致谢………………………………………………………………...50综述………………………………………………………………...52英汉缩略词对照表………………………………………………....59青果总黄酮的提取分离及药效学研究中文摘要目的以新鲜青果为研究对象，在前人的研究基础上，首先对青果总黄酮有效成分的提取和纯化方法及条件进行筛选，及其含量测定；同时根据青果的药理作用，对纯化后的青果总黄酮，以小鼠为研究对象进行急性

6、毒性、抗炎及镇痛实验研究；及其体外抗氧化实验研究，旨在青果总黄酮的进一步分离及制备单体的研究提供物质基础和科学依据。方法在前期的研究基础上，首先采用最佳的提取方法从青果中提取总黄酮类物质；并对其黄酮类物质粗提物进行纯化研究，筛选最佳分离条件；根据理化鉴别和紫外光谱检测其纯化物中具有黄酮类物质的理化特征和光谱特征，可确定青果纯化物可能是黄酮类。其次采用紫外-可见分光光度法对粗提取物和纯化后的青果总黄酮进行含量测定。最后，把得到的青果总黄酮进行毒理学研究，青果总黄酮以最大浓度及最大给药体积的药液对实验组小鼠灌胃给药,对照组给予

7、等体积的溶媒,连续观察7d；通过小鼠醋酸扭体法和小鼠热板法,观察青果总黄酮对小鼠的镇痛作用；并采用蛋清致小鼠足跖肿胀、二甲苯致小鼠耳廓肿胀、醋酸致小鼠毛细血管通透性增加三种模型研究青果总黄酮的抗2+炎作用；及采用邻二氮菲-Fe氧化法、邻苯三酚自氧化法、普鲁士兰法三种方法分别测定青果中总黄酮对羟自由基、超氧阴离子的清除能力及总还原能力。结果青果总黄酮的最佳提取工艺是取青果粗粉，按照固液比1:10加入70%乙醇在70℃水浴中回流加热3小时，滤渣重复提取3次，合并滤液，过滤回收溶剂。最佳纯化艺是将提取物上聚酰胺柱，1用水洗至无色

8、，再用10%，30%，70%，以3BV/h速度洗脱，收集溶液，回收溶剂，加压干燥即可。青果总黄酮未见任何急性-1毒性反应,小鼠灌胃青果总黄酮的最大耐受量为11.46g·kg，约相当于成人临床日用量的115倍；青果总黄酮能减少醋酸致小鼠的扭体次数，提高小鼠热板致痛阈值。青果总黄酮对二甲苯致小鼠耳廓肿胀、蛋