葛根素对er-α募集作用的调控以及对异位子宫内膜基质细胞增殖的影响

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1、第二军医大学硕士学位论文葛根素对ER--α募集作用的调控以及对异位子宫内膜基质细胞增殖的影响姓名：吉梅申请学位级别：硕士专业：妇产科学指导教师：刘玉环201205葛根素对ER—c【募集作用的调控以及对异位子宫内膜基质细胞增殖的影响}葡要研究背景与目的：子宫内膜异位症(锄dom硎osis，EM)是子宫内膜腺体和基质种植于宫腔被覆粘膜以外的雌激素依赖性疾病，在育龄期妇女的发病率为5—10％，目前尚无理想的治疗方法。雌激素通过雌激素受体．a(ES仃ogeIlRec印tor-a，ER．a)和雌激素受体．B(ER

2、．B)来调节其转录过程，而且，ER．a的活性可以通过一些共调节子包括共激活子和共抑制子来调节。目前认为，拮抗剂对甾体激素受体的抑制作用不仅是竞争性结合受体的被动过程，还包括对共激活子和共抑制子的主动募集作用。葛根是一种常用中药，葛根素是从中药葛根中提取出的一种植物性雌激素。作为一种植物雌激素，它具有植物雌激素类雌激素和抗雌激素的双重作用。在我们早期的临床实践中发现在原来治疗的基础上(俞氏内异方组)加入葛根能显著改善患者的症状和体征。我们前期的实验也证实，葛根素能抑制EM大鼠模型异位灶的生长，并抑制雌激素

3、引起的异位组织的侵袭和血管生成作用。因此我们认为葛根素可能是治疗EM的有效药物。本课题主要研究葛根素是否能通过ER-a对共调节子不同程度的募集来抑制EM异位子宫内膜基质细胞(eIldometriotics仃omalcells，ESCs)的增殖。研究方法：首先，我们通过Ⅳ型胶原酶消化、筛网过滤分离法成功分离、培养了EM异位子宫内膜基质细胞，并利用细胞免疫荧光技术对所获得的细胞进行了纯度鉴定，然后我们通过流式细胞分析和CCK一8测定法(CellCo眦ting飚t．8觞say)检测了葛根素对ESCs细胞周期和

4、细胞增殖的影响。接着，我们通过免疫共沉淀技术检测到葛根素通过ER．a对共调节子的募集来调节ER．a调控基因(蛋白)CyclinDl和Cdc25A的表达，从而抑制ESCs的增殖。实验结果t根据异位内膜基质细胞特异表达波形蛋白的特点，利用细胞免疫荧光技术检测显示，分离的子宫内膜异位基质细胞纯度在95％以上。我们的实验结果显示葛根素处理后，CyclinDl和cdc25AmI喇A和蛋白水平的表达均有所下调，同时伴随着细胞周期G1期的阻滞和细胞增殖的抑制。我们的研究还发现雌激素能增强ER-a对共激活子(SRCl，

5、SRC3)的募集，抑制ER．a对共抑制子(SMI玎，N．CoR)的募集，而葛根素则能逆转雌激素作用下的这两种募集作用。结论l本研究表明一定浓度范围的葛根素(10‘7M，10母M，lO‘11M)对ESCs表现出抗雌激素效应，而当葛根素浓度为lO母M时这种拮抗作用最强。提示葛根素可能成为治疗子宫内膜异位症的一种新型药物。关键词t子宫内膜异位症，葛根素，雌激素受体-a，共激活子，共抑制子第二军医大学硕士学位论文AbstractBackg阳undandobjec6Ve：Endometriosisisadebil

6、itatingdise嬲eCharactIerizedbythepreSenceoff．unctional锄d咖etrialglandularepitheliumaIlds仃Dmaoutsidetheut丽nec撕ty，whichgrows锄dregress髓inanestrogen—d印锄dentm籼er．Ita伍；ctsupt05一lO％ofwomenofr印roductiveage．TheaVailable仃ea咖eIlt0ptionsofendom硎osisarelimited．Thee仃ect

7、sofcS仃ogeIlaremcdiatcdViaes仃og饥receptor-a(ER_a)锄dER—B，锄dsubscquentlyalt丽ng仃蛆scription．Furdl锄ore，ER—aaCtiVi哆c趾beregulatcd也rou曲interactionwitllamultitudeofCorcgulato巧factors，t锄edc0-a甜Vators锄dC0一r印ressors．Itisnowmou曲ttllatiIlllibitionofsteroidrec印tor缸1嘶onwi

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