甲磺酸去铁胺对大鼠肝脏冷缺血再灌注损伤保护作用的实验研究

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1、中图分类号：R657.3；R365硕士学位论文甲磺酸去铁胺对大鼠肝脏冷缺血再灌注损伤保护作用的实验研究院（系）、所临床医学院研究生姓名宋建生学科、专业外科学导师姓名夏先明教授二Ο一二年四月目录1甲磺酸去铁胺对大鼠肝脏冷缺血再灌注损伤保护作用的实验研究…………………………………………………………….11.1中文摘要………………………………………………………11.2英文摘要………………………………………………………51.3前言……………………………………………………………101.4材料与方法……………………………………………………131.5结果……………………………………………

2、………………281.6讨论……………………………………………………………441.7结论……………………………………………………………541.8参考文献………………………………………………………551.9英汉缩略词对照表……………………………………………612致谢……………………………………………………………623肝脏缺血再灌注损伤机制的研究进展(综述)………………63甲磺酸去铁胺对大鼠肝脏冷缺血再灌注损伤保护作用的实验研究摘要目的：通过大鼠肝脏离体非循环再灌注模型（AcyclicIsolatedReperfusedRatliverModel，AIPRL）模拟肝移植过程中肝脏

3、的冷缺血保存及再灌注过程，在动物体外实验中探讨铁离子螯合剂-甲磺酸去铁胺（Desferrioxaminemesylate，DFO）对大鼠肝脏冷缺血再灌注损伤的保护作用及其机制，为进一步改善肝移植过程中供肝的保存条件，改良移植器官保存液提供理论支持。方法：成年雄性SD大鼠120只，体重250±30g,按冷保存所使用的保存液不同随机分为DFO干预组和对照组。DFO干预组分为高（DH组)、中(DM组)、低(DL组)三个浓度组，其HTK保存液中加入DFO浓度分别为100μmol/L、50μmol/L、25μmol/L，对照组(C组）HTK保存液中不加入DFO。通过AIPRL模型模拟

4、人体肝移植过程中肝脏的冷缺血保存及再灌注过程。观察大鼠肝脏冷缺血12h及再灌注2h后的病理形态改变；末端转移酶标记法（TUNEL法）测定冷缺血12h后大鼠肝组织细胞凋亡水平；测定冷缺血12h和再灌注2h后大鼠肝脏灌注流出液的乳酸脱氢酶（LactateDehydrogenase,LDH）、谷丙转氨酶(AlanineTransaminase,ALT)及谷草转氨酶(AspartateAminotransferase,AST)含量；测定冷缺血12h和再灌注2h后大鼠肝组织丙二醛(MDA)含量；测定再灌注2h内大鼠肝脏胆汁分泌量；原子吸收光谱法检测3+冷缺血12h后大鼠肝组织的Fe浓

5、度；酶联免疫吸附测定法(Enzyme-LinkedImmunoSorbentAssay,ELISA)分析大鼠肝脏再灌注2h后1肝组织内肿瘤坏死因子(TumorNecrosisFactor-alpha,TNF-α)和白介素-6（Interleukin-6,IL-6）的表达水平；大鼠肝脏冷保存12h后0.4%台盼蓝溶液门静脉灌注，通过大鼠肝脏左外叶达到均匀蓝染所需的时间判定各组_大鼠肝脏冷保存后微循环损伤情况。实验的统计数据以（x±s）表达,IBMSPSSStatistics19统计软件作统计学分析，P＜0.05表示结果有统计学差异。结果：1.病理评分显示：冷保存12h后DH组

6、、DM组大鼠肝组织病理评分分别为0.90±0.66、1.10±0.57均低于C组2.05±0.55及DL组1.75±0.59（P<0.05）；再灌注2h后DH组、DM组分别为2.05±0.55、2.50±0.67明显低于C组3.70±0.59及DL组3.40±0.46（P<0.01）。2.TUNEL法检测结果显示：冷保存12h后各组大鼠肝脏均存在凋亡现象，C组及DL组凋亡细胞密度分别为：(33.9±3.9）cellnumber／mm2、(30.2±4.9）cellnumber／mm2明显高于DM组(25.7±5.1)cellnumber／mm22及DH组(23.8±4.9)

7、cellnumber／mm(p<0.05)。3.酶学指标检测结果显示：冷保存12h后DH组、DM组、DL组、C组大鼠肝脏灌注流出液中LDH含量分别为：（229.53±41.03）U/L、（256.01±42.52）U/L、（310.94±41.58）U/L、（341.42±56.18）U/L，ALT含量分别为：（80.46±12.61)U/L、（91.28±12.99)U/L、(118.84±13.56)U/L、(130.16±14.40)U/L，AST含量分别为：（111.89±15.60）U/L、（124.72