姜黄素和硒对甲醛毒性的拮抗作用研究

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1、武汉科技大学硕士学位论文姜黄素和硒对甲醛毒性的拮抗作用研究姓名：陈鑫申请学位级别：硕士专业：劳动卫生与环境卫生学指导教师：常薇；张本延20120525武汉科技大学硕士学位论文第1页摘要目的甲醛是确认的人类致癌物，是一种无色的刺激性气体，其应用广、毒性大、污染时问长，是室内空气中的主要污染物，对人体的危害极大。为了降低甲醛对人体的危害，寻找拮抗甲醛毒性的物质并研究其拮抗机理，是广大科学工作者所面临的重要课题。姜黄素(curcl_uIline)是从中草药姜黄(curiaammatica)中提取的一种天

2、然食用色素。可溶于甲醇、乙醇、碱、醋酸、丙酮和氯仿等有机溶剂，具有抗炎、抗氧化、调脂、抗病毒、抗感染、抗肿瘤、抗凝、抗肝纤维化、抗动脉粥样硬化等广泛药理活性。硒是人体的一种必需的微量元素，现有研究表明硒可用于癌症的化学预防，并且具有抗氧化和抗突变等作用。此外，硒对许多重金属的中毒亦有缓解作用，并与某些元素有拮抗关系。本课题主要通过实验方法来探讨姜黄素和硒对甲醛毒性的拈抗作用及其机理，对全面和系统的了解姜黄素和硒和对甲醛毒性的拮抗作用具有十分重要的意义，为抑制或削弱甲醛对人体的危害提供新方法。方法以

3、培养A549细胞(人类肺肿瘤细胞)作为实验材料，MTT比色法测定姜黄素和硒对A549细胞生长状态的影响，分别于细胞培养12h、24h、48h，测定其吸光度值。按公式计算细胞生长存活率。取对数生长期状态良好的细胞用于实验。实验共分为：正常对照组，0．1mmol／L甲醛染毒组，不同浓度姜黄素拮抗甲醛组(甲醛O．1mmol／L+姜黄素组：设姜黄素浓度分别为2．5m∥L，5．0mg／L，10m∥L，20m∥L，以下分别简称为姜黄素拮抗甲醛组1、2、3、4)；硒：正常对照组，0．1mmol／L甲醛染毒组，不

4、同浓度硒拮抗甲醛组(甲醛O．1mmol／L+硒组：设硒浓度分别为1．25m∥L，2．5mg／L，5．0m∥L，10m∥L，以下分别简称为硒拮抗甲醛组1、2、3、4)。测定各组A549细胞中总超氧化物歧化酶(SOD)活力、总一氧化氮合成酶(NOS)活力、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH—PX)活力、丙二醛(MDA)含量，DNA-蛋白质交联(DNA_proteincross—liIll(s，DPC)率，激活蛋白一1(AP．1)、核转录因子一心(NF．1cB)的表达情况，比较各组间这些指标是否有统计学差异。结

5、果：1．姜黄素对甲醛毒性的拮抗作用1．1姜黄素对甲醛致A549细胞氧化损伤的拮抗作用与对照组比较，甲醛可以使A549细胞的总SOD活性、总NOS活性和GSH．Px第1I页武汉科技大学硕士学位论文的活性下降(均P<0．05)，可使MDA的释放量升高俨<0．05)。与甲醛染毒组相比，2．5：mg／L'--'20mg／L姜黄素组使GSH—Px活性上升俨<0．05)，2．5mg／L,--一40mg／L姜黄素组MI)A含量下降(均P<0．05)，且40mg／L姜黄素拮抗组与对照组间差异已经无统计学意义(P>

6、0．05)。1．2，姜黄素对甲醛致A549细胞DNA一蛋白质交联损伤的拮抗作用O．1mmol／L的甲醛可以产生明显的DPC率增加效应(P<0．05)，各姜黄素拮抗组与0．1mmol／L甲醛染毒组相比，DPC率下降，差异有统计学意义俨

7、使A549细胞NF。rJ3被激活(P<0．05)，各姜黄素拮抗组与0．1mmol／L甲醛染毒组相比NF．rJ3活性下降(P<0．05)，但2．5mg／L、5．0mg／L姜黄素组的NF．rJ3活性仍高于对照组(均P<0．05)，而10mg／L、20mg／L姜黄素组与对照组相比，差异无统计学意义(尸>O．05)甲醛能够增加AP一1的活性(P

8、统计学意义(胗O．05)。2．硒对甲醛毒性的拮抗作用2．1硒对甲醛致A549细胞氧化损伤的拮抗作用与对照组比较，甲醛可以使A549细胞的总SOD活性、总NOS活性和GSH．Px的活性下降(均P<0．05)，可使MDA的释放量升高(尸0．05)。2．2，硒对甲醛致A549细胞DNA．