肺癌胸腔积液til细胞tcrvβ亚家族表达及体外活性研究

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1、硕士研究生学位论文肺癌胸腔积液TIL细胞TCRVβ亚家族表达及体外活性研究姓名：陈敬生学号：2110943032院系：临床医学院专业：内科学导师姓名及职称：肖兰凤教授二○一二年五月广东药学院硕士研究生学位论文分类号：___________密级:__________UDC:___________肺癌胸腔积液TIL细胞TCRVβ亚家族表达及体外活性研究ThestudyoftumourinfiltratinglymphocytesonmalignantpleuraleffusionoflungcanceraboutTCRVβsubfamilyexpressionandcytotoxicityin

2、vitro姓名：陈敬生学号：2110943032院系：临床医学院专业：内科学研究方向：肿瘤生物治疗导师姓名：肖兰凤教授论文提交日期：2012-4论文答辩日期：2012-5学位授予单位：广东药学院二○一二年五月广东药学院硕士研究生学位论文广东药学院学位论文原创性声明本人郑重声明：本人所呈交的学位论文，系我个人在导师的指导下进行研究工作所取得的成果。除文中已特别加以标注和致谢的地方外，不包含其它个人或机构已经发表或撰写过的研究成果。对本研究做出贡献的其它个人和集体，均已在文中明确说明和致谢。本人充分意识到本声明的法律结果完全由本人承担。学位论文作者签名：＿＿＿＿日期：年月日学位论文使用授权的声

3、明本人完全了解广东药学院有关保留和使用学位论文的规定，学校有权保留和向有关部门或机构送交本论文的复印件和电子版，允许论文被查阅和借阅。学校可以将本学位论文的全部或部分内容编入有关数据库，可以采用影印、缩印或其它复印手段保存和汇编本学位论文。保密论文在解密后适用本声明。论文作者签名：＿＿＿＿＿论文导师签名：＿＿＿＿日期：年月日广东药学院硕士研究生学位论文肺癌胸腔积液TIL细胞TCRVβ亚家族表达及体外活性研究专业：内科学硕士研究生：陈敬生导师：肖兰凤教授摘要目的:研究肺癌胸腔积液患者肿瘤浸润性淋巴细胞（TIL）中T细胞受体（TCR）Vβ亚家族的表达利用特点及经白细胞介素2（IL2）刺激后TI

4、L细胞体外活性改变，为临床过继性免疫疗法应用提供实验依据。方法:1．贴壁法分离肺癌胸腔积液患者TIL细胞及肿瘤细胞，用流式细胞仪检测TIL细胞TCRVβ亚家族的优势取用情况。2．IL2体外活化扩增TIL细胞，分别于3天、7天、14天、21天、28天、35天常规法计算增殖细胞数量，流式细胞仪检测CD4、CD8及CD56分子在TIL细胞表面表达情况，将TIL细胞与自体肿瘤细胞共培养24小时后，MTT法检测不时间段TIL细胞对肿瘤细胞的杀伤效果。结果:1．与健康人对照组外周血单个核细胞（PBMC）相比，45例肺癌合并胸腔积液患者TIL细胞均出现不同程度的TCRVβ亚家族优势取用情况，其中以TCR

5、Vβ5.2、Vβ5.3、Vβ8、Vβ9、Vβ13.1、Vβ14增高较为明显，差异有统计学意义（P＜0.05）。2．TIL细胞经IL2刺激7天后开始出现体外扩增，平均28天到达扩增高峰，最+++高扩增倍数为190±50倍。分子表型表现为CD4比例下降、CD8、CD56TIL细胞I广东药学院硕士研究生学位论文比例增高。肿瘤杀伤实验表明，经IL2活化后TIL细胞体外细胞毒性明显大于活化前，且与培养时间相关，在28天杀伤活性最强，杀伤率为70±10%，其差异有统计学意义（P＜0.05）。结论:++1．肺癌胸腔积液患者TIL细胞TCRVβ亚家族呈优势表达现象，CD4、CD8TIL细胞各自优势表达的T

6、CRVβ亚家族不尽相同。+2．肺癌胸腔积液分离TIL细胞经IL2体外刺激后增殖明显，其分子表型CD4、++CD8、CD56发生变化，对自身肿瘤细胞杀伤活性明显增加，可为临床应用过继性免疫治疗肺癌胸腔积液提供实验参考。关键词:肺癌；肿瘤浸润性淋巴细胞；T细胞受体；Vβ亚家族；白细胞介素2II广东药学院硕士研究生学位论文ThestudyoftumourinfiltratinglymphocytesonmalignantpleuraleffusionoflungcanceraboutTCRVβsubfamilyexpressionandcytotoxicityinvitroPostgraduat

7、e:ChengJingShengMajor:internalmedicineSupervisor:ProfessorXiaoLanFengAbstractObjective:TostudytheexpressioncharacteristicsofTcellreceptor(TCR)Vβsubfamilyabouttumorinfiltratinglymphocytes(TIL)onmalignantpleuralef