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1、濒危鱼类稀有白甲鱼染色体核型分析摘要以稀有白甲鱼头肾组织为材料，采用腹腔注射植物血细胞凝集素（PHA）、秋水仙素和空气干燥法制备染色体标本，进行染色体核型分析。结果表明：稀有白甲鱼染色体为50条，核型公式为2n=50,12m+16sm+10st+12t,NF二78。未发现异型染色体、随体染色体和次缢痕；其核型符合典型的低位类群鱼类核型特征。关键词稀有白甲鱼；染色体；核型中图分类号S917.4文献标识码A文章编号1007-5739(2014)08-0242-02ChromosomeKaryotypeAnalysisinEndangeredSpecies
2、OnychostomararaRANGuang-xin1DAIYing-gui2LUOHao-xiang1(1SouthwestGuizhouVocational&TechnicalCollegeForNationalities,XingyiGuizhou562400；2CollegeOfAnimalSciences,GuizhouUniversity)AbstractKaryotypeofOnychostomararawasstudiedwithchromosomesamplespreparedfromheadkidneybyPHA,colchic
3、ineinjectionandair-driedmethod.Theresultsshowedthattherewere50chromosomesin0.raraanditskaryotypeformulawas2n=50,12m+16sm+10st+121，NF=78.Therewasnoevidenceofheterotypicalchromosome,satellitesorsecondaryconstrietion.Thekaryotypeof0.rarawasinaccordancewiththelowergroupoffishevolut
4、ionarytaxonomy.KeywordsOnychostomarara；chromosome；karyotype稀有白甲鱼(Onychostomarara)隶属于鲤形目鲤科❷亚科的白甲鱼属，其仅分布于我国长江中游沅江水系和西江水系。该鱼类属中大型淡水食用经济鱼类，常栖息于河流中下层，以锐利的下颌角质缘刮食砾石表面的藻类为食，其肉味鲜美，营养价值较高。稀有白甲鱼作为一种野生淡水经济鱼类，其具有较高的食用经济价值和营养价值以及较大的驯养开发潜力［1］。迄今，有关鱼类染色体核型的研究，已有较多的报道［2-7］。鱼类核型的研究，旨在了解鱼类遗传学特征、
5、鱼类的分类地位及其演化历程，而目前对稀有白甲鱼核型的研究尚未见报道。该文开展稀有白甲鱼的核型研究，确定其染色体数目及其核型模式，拟为研究稀有白甲鱼的进化地位、遗传育种和种群关系以及对其保护和利用提供理论依据。1材料与方法1.1试验材料试验所用材料于2010年10-12月采自沅江水系贵州境内清水江，为性腺发育成熟的野生稀有白甲鱼9尾，体长为(225.6±12.8)mm,体重(410・8±36・2)g,均为雄性。1.2试验方法1.2.1预处理。按6ug/g•体重，向试验鱼腹腔注射PHA,注射后在室内暂养20h,最后按2.5〜3.5ug/g•体重向鱼体腹腔
6、注射秋水仙素，再培养6h。1.2.2细胞收集。将试验鱼进行尾部放血致死，然后打开腹腔，取其头肾于装有0.75%鱼用生理盐水的培养皿中。用镀子将肾组织反复清洗至生理盐水无血色，再取出置于10niL离心管，用镶子反复撕夹，使其中的游离细胞全部释放出来以制成细胞悬液，用尼龙纱绢过滤，再用吸管吸取细胞悬液于另一离心管中。1.2.3低渗。将收集于离心管的细胞悬液离心（离心速度1000r/min）30min,离心后弃去上清液，加入0.075mol/LKC1低渗液用吸管吹打均匀,然后低渗60mirio低渗结束直接离心（离心速度1000r/min）20min。1.2
7、.4固定。弃去上清液，然后顺管壁加入新配制的固定液，用吸管吹打均匀，置于室温条件下固定45min,离心（离心速度1000r/min）20min,弃去上清液，然后再固定，离心。1.2.5滴片。离心后，吸去上清液，加入5mL固定液,用吸管吹打均匀后，吸取滴片。1.2.6染色。用pH值二7.2的磷酸盐缓冲液按10%的浓度配工作染液。将干燥过的滴片置于染色缸染色，时间60mino1.2.7镜检拍照分析。将染色后的玻片镜检并拍照；按Levan等［8］的染色体分类标准作核型图分析。2结果与分析1.1稀有白甲鱼染色体数目选取清晰的染色体中期分裂相(图1)计数确定染
8、色体众数。在显微镜下对215个中期分裂相进行计数、统计。结果表明，82.79%的中期分裂相染色体数目为50(
