mdrv及h9aiv协同感染对番鸭细胞免疫机能影响

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1、福建农林大学硕士学位论文摘要番鸭呼肠孤病毒病是1997年以来我国新出现的高发病高死亡的番鸭疫病，危害极大。为探讨番鸭呼肠孤病毒（MDRV）和H9亚型水禽流感病毒（H9AIV）单一感染和协同感染对番鸭细胞免疫功能的影响，本试验以MDRV和H9AIV为材料，人工感染8日龄健康雏番鸭，于感染后不同时间取样进行如下研究：（1）应用MTT法测定感染后1d、3d、5d、7d、10d和14d番鸭血液、胸腺和脾脏中T淋巴细胞刺激指数，分析MDRV和H9AIV感染对番鸭T淋巴细胞增殖功能的影响。结果显示8日龄番鸭人工感染后，单一感染组和共感染

2、组番鸭血液、胸腺和脾脏的T淋巴细胞刺激指数均明显低于健康对照组，其中共感染组又低于单一感染组。表明H9AIV和MDRV能抑制番鸭外周血液及免疫器官（胸腺、脾脏）中T淋巴细胞增殖功能，MDRV与H9AIV协同感染进一步加重细胞免疫抑制程度。（2）应用流式细胞仪测定感染后1d、4d、7d、11d、14d、21d和30d番鸭血液T淋巴细胞比率，分析MDRV和H9AIV感染对番鸭血液T淋巴细胞数量的影响。结果显示：单一感染组和共感染组番鸭血液T淋巴细胞比率均低于健康对照组（差异显著），PI21d时各感染组T细胞比率逐渐上升，PI30d

3、时单一感染组与对照组差异不显著，而共感染与对照组差异显著。表明MDRV与H9AIV均能导致番鸭血液中T淋巴细胞数量降低，协同感染更为明显。（3）观察试验番鸭发病死亡和免疫器官发育情况，测定感染后7d和14d试验鸭的免疫器官指数。结果显示：共感染组的发病率和死亡率均明显高于单一感染组；MDRV组和共感染组番鸭的胸腺和法氏囊萎缩，胸腺和法氏囊器官指数均降低，但脾脏肿大坏死，脾脏指数较对照组和AIV组升高。表明H9AIV感染不影响番鸭的生长发育和免疫器官指数，MDRV单一感染或与H9AIV协同感染增加番鸭发病率和死亡率，并加重病情。

4、（4）应用淋巴细胞分离液分离淋巴细胞，按常规白细胞计数法测定感染后7d和14d番鸭血液、脾脏和胸腺中淋巴单核类细胞数量，结果显示：MDRV组与共感染组番鸭血液、脾脏和胸腺中的淋巴单核类细胞数量均低于对照组和AIV组，差异极显著；而AIV组与对照组差异不显著。表明H9AIV对番鸭血液、脾1福建农林大学硕士学位论文脏和胸腺中的淋巴单核类细胞数量影响较小；MDRV能导致番鸭淋巴单核类细胞数量明显降低；两者共感染能使感染鸭淋巴单核类细胞数量进一步下降。（5）应用MTT法测定感染后1d、7d、14d、21d和28d番鸭血液中细胞毒性T细

5、胞对靶细胞（SP2/0骨髓瘤细胞）的杀伤比率，分析MDRV和H9AIV感染对番鸭CTL细胞杀伤功能的影响。结果显示：8日龄番鸭人工感染后，AIV组CTL细胞杀伤活性与对照组差异不显著，MDRV组CTL细胞杀伤活性于PI14d与对照组相比差异显著，其余差异均不显著；共感染组在PI7d~28d感染鸭血液CTL细胞杀伤活性均低于对照组，差异显著。表明H9AIV感染基本不影响番鸭血液CTL细胞的杀伤活性，MDRV感染对CTL细胞杀伤活性有一定的抑制作用，MDRV和H9AIV协同感染对CTL细胞杀伤活性有明显的抑制作用。综上所述，8日龄

6、雏番鸭感染H9AIV后其生长发育、免疫器官指数、淋巴单核类细胞数量和CTL细胞杀伤活性基本不受影响，但H9AIV感染能不同程度降低血液T细胞数量和增殖能力。MDRV感染不仅导致番鸭发病死亡，且免疫器官严重受损，番鸭血液和免疫器官中淋巴单核类细胞数量、CTL细胞杀伤活性、T细胞比率和T细胞增殖功能显著下降。MDRV和H9AIV协同感染具有不同程度的叠加效应。上述研究结果表明，番鸭呼肠孤病毒和H9流感病毒均可导致番鸭细胞免疫抑制，番鸭呼肠孤病毒对番鸭细胞免疫抑制比H9流感病毒显著，两者同时感染则进一步加重番鸭细胞免疫抑制程度。关键

7、词：番鸭呼肠孤病毒、H9AIV、协同感染、细胞免疫2福建农林大学硕士学位论文AbstractWaterfowlsaresusceptibletoMuscovyduckreovirusdiseasewhichhasbeenprevailedinsomeareasinChinasince1997,seriouslyaffectingthedevelopmentofwaterfowlindustryintheareas.Torevealtheimmuno-suppressionmechanismsofwaterfowlschalle

8、ngedbyMuscovyduckreovirus(MDRV)andavianinfluenzavirus(H9AIV)individuallyandsimultaneously,Muscovyducklingsateightdaysoldwereselectedforthi