番鸭神经肽S的基因克隆及其对番鸭脾淋巴细胞增殖的影响.pdf

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1、福建农林大学学报(自然科学版)第44卷第1期JournalofFujianAgricultureandForestryUniversity(NaturalScienceEdition)2015年1月番鸭神经肽S的基因克隆及其对番鸭脾淋巴细胞增殖的影响杨桂红，黄一帆，林珊珊，祁保民，王全溪(中西兽医结合与动物保健福建省高校重点实验室／福建农林大学动物科学学院，福建福州350002)摘要：分别采用基因克隆技术、细胞分离培养技术和四甲基偶氮唑蓝(M-I．I')法首次克隆了番鸭神经肽s(NPS)的基因，并探讨NPS对番鸭脾淋巴细胞体外增殖能力的影响．基因测

2、序结果显示，所克隆的番鸭NPScDNA序列为181bp，与其他物种NP$的同源性极高，其中与鸡NPS的亲缘关系最近．MTY法研究结果显示：0．01—1000nmol·L-1NP$可促进番鸭脾淋巴细胞体外的增殖，其中以10nmd·LNPS的促进效果最优；10nmol·LNPS协同脂多糖(LPS)及1nmol·LNPS协同植物血凝素(PHA)对促进脾淋巴细胞增殖的效果最好．上述结果表明，番鸭NPS基因在进化上是高度保守的，NPS可协同LPS或PHA共同促进番鸭脾淋巴细胞的体外增殖．关键词：番鸭；神经肽S；基因克隆；脾淋巴细胞增殖中图分类号：S834文献

3、标识码：A文章编号：1671-5470(2015)01-0051-07CloningofneuropeptideSanditsefectontheproliferationofspleniclymphocytesinmuscovyduckYANGGui—hong，HUANGYi-fan，LINShan—shan，QIBao—rain，WANGQuan-xi(UniversityKeyLaboratoryforIntegratedChineseTraditionalandWesternVeterinaryMedicineandAnimalHealth

4、careinFujianProvince／CollegeofAnimalScience，FujianAgricultureandForestryUniversity，Fuzhou，Fujian350002，China)Abstract：ThisstudywasfirstlytoclonethegenesequenceofmuscovyduckneuropeptideS(NPS)，andthen，investigatetheefectofthepeptideNiX3ontheproliferationofspleenlymphocyteinmusco

5、vyduckv／trobyusinggeneclone．celisolationandculturetechniquesand3-(4，5)-dimethylthiahiazo(一z-y1)-3，5-di-phenytetrazoliumromide(Mar)methods．TheproductlengthofclonedmuscovyduckNPScDNAwas181bp，whichshowedhighhomologybetweenmuscovyduckNPSandotherknownspeciesofNPSgene．especiallywith

6、chickNPSbytheDNAstarsoftwareanalysis．TheresultofMTrshowedthat0．01—1000nmol·L一NPScouldpromotetheproliferationofspleenlymphocyteinmuscovyduckinvitro，theefectof10nmol·L。NPSaloneonthethepmllfemtionofsplecnlymphocytewashigherthanthatofallotherconcentrationsofNPSalone；theefectsof10n

7、mol·L。NPScombinedwithlipepolysaccharide(LPS)and1nmol·LNPScombinedwithphytohemagglutinin(PHA)onproliferationofspleenlymphocytewerehigherthanthatofothergroups．respectively．AlltheseresultsindicatedthatthemuscovyduckNPsgenewaslliconservedinevolution，NPScouldcooperatewithLPSorPHAto

8、promotetheproliferationofspleenlymphocytesofmils—cow／duckv／tr