壳聚糖-明胶-透明质酸薄膜的制备及其性能的研究

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1、壳聚糖-明胶■透明质酸薄膜的制备及其性能的研究24卷3期2005年6月中国生物医学工程学报V01.24No.32005ChineseJournalofBiomedicalEngineerinJune壳聚糖.明胶.透明质酸薄膜的制备及其性能的研究刘海峰1尹玉姬1毛津淑1姚康德1杨光辉2右o石石z曹谊林21(天津大学材料科学与工程学院,天津300072)2(上海组织工程研究与开发中心,上海200235)摘耍:本实验采用表面修饰法和共混法两种不同的方法将透明质酸引入壳聚糖一明胶体系,制备了壳聚糖一明胶.透明质酸复合薄膜,考察了薄膜的表面形貌、亲

2、水性和力学性能等理化性能以及生物相容性。实验结果表明,壳聚糖一明胶.透明质酸薄膜具有良好的亲水性,而共混法和表面修饰法制备的薄膜在力学性能上各有所长。体外细胞培养结果表明,成纤维细胞在共混法制备的薄膜上的黏附和牛长情况要明显好于表面修饰法制备的薄膜。关键词:壳聚糖一明胶体系;透明质酸;表面修饰;共混;成纤维细胞-HypertLIUHYA0Kang——De1YANGGuang.Hui1(Research2(ShanghaiInstitutecMaterials,TianfinUnnjin300072)nghai200235)EngngRes

3、earchandDeve1ok'ract:Theosan?—ge1atinhya1uronicparblendmethodthroughCOcrossy1一(3,3—dimethylbodiiminde(Eroxysucce(NHS)in2—mornoethanesulfonicacid(MES)buffer.111eresultsdemonstratedopewerecompamembranevestudyrthetheratthanthatationmembrsan——ge1twok;hya1uronition;po1yb1end;屮

4、图分类号文献标识码文章编号0258—8021(2005)03—0271.06引言透明质酸(HA)是细胞外基质(ECMs)中的糖胺聚糖(GAGs)的组成物。透明质酸在皮肤组织屮的保水作用是其最重耍的生理功能之一,透明质酸与其他硫酸化粘多糖和胶原蛋白、弹性蛋白等纤维状蛋白质共同组成含大量水分的ECMs,为细胞提供信息。皮肤中的ECMs使皮肤柔韧且富有弹性。HA与硫酸软骨素、硫酸皮肤素等基质成分及其所包含的大量水分,共同形成细胞外空间,有利于营养物质的供应和代谢物的排放,表皮细胞的迁移,免疫细胞(郎格罕斯细胞和淋巴细胞)在表皮中的出入…o—。透

5、明质酸分子链上每一个二糖单元带有一个荷负电的竣基(一c00-),它具有类似离子交换剂的作用,能调节细胞周围阳离子的流动和浓度。透明质酸还可以调控细胞生长因子和细胞因子的分泌,抑制蛋白酶的分解,影响细胞的黏附、生长、迁移、增殖和分化'3。-o透明质酸可由天然资源提取或由微生物发酵制备,其瓮基可以酯化,且与蛋白质在交联剂的作用下生成网络凝胶,如意大利Fidia先进聚合物公司收稿日期:2002・10.28,修回日期:2004—07.21O基金项目:国家自然科学基金资助项目(59883002,50203007);国家973资助项目(G199954

6、305)万方数据屮国生物医学工程学报14卷采用透明质酸酯制备角质形成细胞转载体系含有30mMEDC、8mMNHS和50mMMES的溶液中,Laserskin,为欧洲共同体批准的第一个组织工程装置,目前已商品化。透明质酸为非抗原性,不会引发反应2h,室温干燥成膜。使用前先用紫外线消毒30min,再用70%的乙醇溶液浸泡1h灭菌,用无菌的PBS溶液洗涤3次,最后用培养液浸泡30min,反复进行两次。炎症和异体排斥反应,其生物降解产物为二糖,对人体无毒副作用No-,其缺点是力学性能有限。另一方面,売聚糖一明胶体系良好的生物相容性己经被证实”J,

7、从而可作为组织工程材料使用。8o,而将透明质1.2.2壳聚糖.明胶(CS.Gel)薄膜制备取2%壳聚糖溶液与4%的明胶溶液以体积比为1:4混合,37°C快速搅拌混合12h,离心脱除气泡,取培养细菌用培养皿(FALCO),将8m1混合溶液加入培养皿中,置于超净工作台,室温流延成膜。采用EDC对膜材进行化学交联。向装有材料的培养皿中加入20fn1含有EDC、8mM酸引入到壳聚糖.明胶体系可缩短细胞在壳聚糖.明胶材料表面的适应时间,使细胞尽快进入止常的细胞周期,同吋可以有效地抑制材料触发的细胞凋亡阳]。因此,将透明质酸引入到壳聚糖.明胶体系可更

8、好地模拟细胞外基质的组成,提高仿生程度;同时透明质酸与壳聚糖基材料交联后,可改善复合材料的力学性能。本实验的研究内容就是采用不同的方法将透明质酸引入到壳聚糖.明胶体系,考察不同的制备方法对薄膜

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