q67发光菌在环境测试中的应用技术的研究

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1、摘要随着科学技术的进步，工农业生产的发展，环境作为工业废物的接纳点，污染现象也越来越严重。传统的环境监测主要采用化学分析的手段，可以快速灵敏地测定出污染物的种类和浓度，但对种类繁多，数量巨大的污染物进行一一测定，需要耗费大量的时间和精力，也无法测定多种污染物共同暴露的综合效应。为弥补化学分析方法的不足，生物测试方法应运而生。其中发光菌因其独特的生理特性、与现代光电检测手段相匹配的特点，更由于其相比于其他生物的快速、经济、．节省空间且可靠等优点而备受关注。青海弧菌Q67(Vibrioqinghaiensissp．-Q67)作为一种发光菌，生长初期发光很弱甚至不发光，对数生长期发光达到高峰，稳定期

2、发光强度下降，而且对数生长期时间也很短。我们针对Q67进行了系统的研究，主要内容如下：1．为了增加发光菌的稳定性，延长发光菌的稳定时间，使其能够更好更快的应用于环境检测中，本文从发光菌的菌浓度、反应时间、释氧剂的加入以及离子强度等方面来进行研究。结果表明当测试体系为O．85％．0．9％NaN03时，发光可以延长半个小时左右，而且相对稳定。2．分别选用了6种菌种保藏方法对Q67进行保存，通过比较分析，冷冻干燥法为最佳保存方法；由于单一保护剂保护效果差，所以本研究又选用了11种保护剂分别对其进行保护，筛选其中效果相对较好的两种保护剂对其进行正交试验，确定出混合最佳的保护剂。确定的混合保护剂的最佳组

3、合是5％的海藻糖和饱和的组氨酸盐酸盐，混合比例是l：1。3．将上述方法筛选出的最佳混合保护剂应用于Q67进行冷冻干燥，将冷冻干燥完成的Q67冻干粉进行复苏，通过实验选择既快速又简便的方法对Q67冻干粉进行复苏：4．利用淡水发光菌Q67研究了15种典型取代酚类化合物的急性毒性并采用偏最小二乘回归法对毒性数据进行定量构效关系(QSAR)分析。结果表明，15种典型取代酚的EC50范围在5．76x10-6．1．27x10-3mol·L．1，QSAR模型的主成分分析表明logD(正辛醇水分配系数)对模型的贡献最大，且一logEC50与logD正相关；建立的QSAR模型有较高的稳定性，能够用于预测其它酚类

4、化合物的发光菌急性毒性测试。关键词：淡水发光菌Q67；菌种保藏；复苏；取代酚；急性毒性AbstractWiththedevelopmentofscienceandtechnology，environmentasthereceiverofindustrialandlivingwastesWassufferingfromcontaminationgreatly．ThetraditionalmethodforenvironmentalmonitorWaschemicalanalyse，bymeansofwhichthetypesandtheconcentrationofpollutantscould

5、bedetectedquicklyandsensitively．However，itwastedalotoftimeandeffortwhenwedetectedlargePollutantsonebyonebythismethod；Besides，wecouldnotgetthecomprehensiveeffectsofmanyPollutants．Inviewofthis，bioassaycomed、^，itllthetideoffashion．Especially,Luminescentbacteriumbecomespopularbecauseofitsuniquephysiolog

6、icalcharacteristics，anditssimple，quicknessandSOon．Q67(Vibrioqinghaiensissp．-Q67)isluminescentbacterium，thelightisSOweakinitsearlylife，andcomesuptoitspeakatlogarithmicphase，butdecreasesatstationaryphase；Besides，thelogarithmicphaseisveryshort．WedoascientificstudyonQ67，themaincontentasfollows：1．Toenabl

7、ethestabilityofQ67andextenditslightingtime，westudiedthedenstyofQ67，thereactiontime，theaddedofTAED，andtheionicstrengthandSOon．TheresultsshowedthatthelightingtimeCanbeextendedfor30miniutesandbecomemores