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时间:2019-02-04
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1、常见溶液的配置方法一、液相所需溶液1、PH5.85醋酸铵缓冲液(液相仪用)2、PH7.50醋酸铵缓冲液(溶解7ACA用)3、10%乙腈溶液(1)称取1.54g醋酸铵,加水至1000ml,溶解后用冰醋酸调PH至5.85.(2)称取1.54g醋酸铵,加水至1000ml,溶解后用氨水调PH至7.50.(3)量取乙腈50ml,加入超纯水450ml,即500ml10%乙腈溶液。二、指示剂的配置(1)甲基红指示剂(1.0%)取甲基红0.1g,加0.05mol/LNaOH溶液7.4ml使溶解,再加水稀释至200ml即可。(2)酚酞指
2、示剂(1.0%)取酚酞1g,加乙醇100ml使溶解,既得,变色范围PH8.3-10.0(无色-红色)(3)淀粉指示剂(1.0%)取可溶性淀粉0.5g,加水5ml搅匀后,缓缓加入100ml沸水中,边加边搅拌,继续煮沸2min,冷却,倾取上清液既得。(新用新配)(4)甲基红-溴甲酚绿混合指示剂取0.1%甲基红的乙醇溶液20ml,加0.2%溴甲酚绿的乙醇溶液30ml,摇匀既得。(5)甲基橙指示剂取甲基橙0.1g,加水100ml使溶解,既得。变色范围:PH3.2-4.4(红-黄)三、溶液类(1)0.25mol/LH2SO4溶液
3、取浓硫酸15ml,缓缓注入适量水中,冷却至室温加水稀释至1000ml,摇匀。(2)0.1mol/LNaOH溶液取澄清的饱和NaOH溶液5.6ml,加新沸放冷的水使成1000ml,摇匀既得。(注:饱和NaOH:120g+100ml水)(3)6mol/LHCl取HCl540ml,加水使成1000ml,摇匀(4)饱和KCl取44.73g,加水使成200ml。(5)18%甲醛溶液取46.75ml37%-40%甲醛溶液,加水使成100ml注:中性18%甲醛溶液:在已配好的18%甲醛溶液中滴2-3滴酚酞指示剂用0.1mol/LNa
4、OH调至显微红色即可。(6)6mol/LNaOH溶液取澄清饱和NaOH溶液336ml,加新沸放冷的水使成1000ml,摇匀。(7)2mol/LH2SO4取浓硫酸12ml,缓缓注入足量的水中,冷却至室温加水稀释至1000ml,摇匀。(8)4mol/LHCL取浓盐酸333ml,加水稀释至1000ml,摇匀。(9)菲林试剂称取50g酒石酸钾钠,54g氢氧化钠和4g亚铁氰化拿,定容至1000ml蒸馏水中(10)0.1%标准葡萄糖溶液把无水葡萄糖在105℃烘干10min,恒重。冷却后用电子天枰精确称取1.000g于1000ml容
5、量瓶内,用适量蒸馏水溶解后,加入8ml浓盐酸,用蒸馏水定容至刻度。1、CPC发酵液氨基氮测定方法:1.取适量发酵液用棉花或滤纸过滤,准确吸取2ml滤液于50ml三角瓶中,加蒸馏水10ml,1.0%甲基红2-3滴,以0.25mol/L硫酸溶液调节至红色,再以0.1mol/LNaOH溶液调节至橙红色,加入18%甲醛溶液10ml,放置10min。2.10min后,加入1.0%酚酞指示剂3-6滴,用0.1mol/LNaOH溶液滴定至溶液显微红色即可。3.按计算公式计算结果。氨基氮(mg/100ml)=M*V*1000*100*
6、0.014/2V:滴定所消耗NaOH溶液的体积(ml)M:NaOH摩尔体积(mol/L)0.014:与1.0NaOH溶液(MNaOH=0.1mol/L)相当的可表示的氮的质量。2:样品的取样量(ml)。2、C发酵液总糖的测定方法:1、空白测定:准确吸取菲林甲、乙液、蒸馏水各5ml,放入250ml三角瓶中,再用滴定管加入一定量得标准葡萄糖液(C),混匀后,放在石棉网上加热,应使瓶内溶液在2min内达到沸腾,以每滴4-5s的速度由滴定管滴入标准葡萄糖溶液直到蓝色消失为止。沸腾前加入的标准葡萄糖量与沸腾后滴定时所用的葡萄糖液
7、量得总和就是滴定空白时耗用的标准葡萄糖液毫升数(V0)2、样品测定:样品稀释:吸取样品滤液2ml至100ml容量瓶中,加4M盐酸沸水浴10min,冷却后定容。准确吸取样品稀释液5ml于250ml三角瓶中,加入菲林甲、乙、蒸馏水各5ml,根据配比及发酵代谢规律估计待测样糖值,用滴定管预加0.1%标准葡萄糖液(其量为V空白--计值),在电炉上加热至沸腾,然后按空白测定时滴定的速度滴入标准葡萄糖液至蓝色消失,记下滴定消耗的标准葡萄糖的毫升数(V)。3、计算结果还原糖(%)=(V0—V)*C*100/(5*2)*100%式中:
8、V0-空白测定时消耗标准糖的总体积。V-样品测定时消耗标准糖的总体积。C-0.1%标准糖的实际浓度。
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