丹参注射液诱导大鼠骨髓间充质干细胞分化为神经元样细胞的实验研究

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1、维普资讯http://www.cqvip.com·210·中国中西医结合急救杂志2006年7月第13卷第4期ChinJTCMwMCritCale，July2006，Vol!．·论著·丹参注射液诱导大鼠骨髓间充质干细胞分化为神经元样细胞的实验研究余勤，连俊兰。，郭莹(1．浙江中医药大学生物工程学系，浙江杭州310053；2．杭州市红十字会医院儿科，浙江杭州310003)【摘要】目的：探讨丹参注射液在体外诱导大鼠骨髓间充质干细胞(rMSCs)向神经元样细胞分化的作用。方法：采用贴壁筛选法分离rMSCs，并通过不断

2、传代进行纯化和扩增培养。采用含丹参注射液的无血清Dulbecco改良Eagle培养基(DMEM)／F一12培养液诱导rMSCs分化为神经元样细胞，观察不同浓度丹参注射液对rMSCs诱导分化为神经元样细胞的影响。通过观察rMSCs经诱导后细胞的形态变化和采用免疫组化方法检测神经元特异性核蛋白(NeuN)、神经丝蛋白(NF—M)、胶质纤维酸性蛋白(GFAP)的表达来鉴定神经元样细胞。结果：经丹参注射液诱导后，rMSCs胞体收缩，突起伸出，形似神经元；免疫组化显示诱导出的神经元样细胞NeuN、NF—M表达阳性，GF

3、AP阴性。丹参注射液在浓度为10ml／L时的诱导作用最为显著。结论：丹参注射液可以在体外诱导rMSCs分化为神经元样细胞，其诱导分化率与丹参注射液的浓度有关。【关键词】骨髓间充质干细胞；神经元{丹参注射液；诱导分化{大鼠中图分类号：R285．5；Q254文献标识码：A文章编号：1008—9691(2006)04—0210—05Experimentalstudyondifferentiationofbonemesenchymalstemcellsintoneuron,·likecellswithsalviami

4、ltiorrMzainjectionYUQinl。LlAN3un．-lan2，GUoYirg1．1．Departmento＆o—enginee“ng，ZhefiangUniversityofT'racHtionalChineseMedicine，Hangzhou310053，Zhejiang，China{2DepartmentofPediatrics，HangzhouRed-crossHospital，Hangzhou310003，Zhefiang，China[Abstract]0bjecfiveToinve

5、stigatetheeffectsofdiferentiationofratbonemesenchymalstemcells(rMSCs)intoneuron—likecellswithsalviamiltiorrhizainjectioninvitro．MethodsrMSCswereseparatedfromratbonemarrowwithwallstickingmethodandexpanding，andculturedinvitro．rMSCswereinducedtodifferentiatein

6、toneuron—likecellswithsalviamiltiorrhizainjection．Theeftte：ctsofdifferentdosagesofsalviamiltiorrhizaondifferentiationofrMS；Csintoneuron．dikecellsweleobserved．Neuron．-likecellswere】identifiedwithneuron—specificenolase(NeuN)，neurofilament(NF—M)，glialfibrillar

7、yacidicprotein(GFAP)byimmunohistochemistry．ResultsTherMSCswereinducedbysalviamiltiorrhizainjectiontoexpressneuronaJlphenotypesimilartothecellappearanceofneuronswithNeuNandNF—Mpositiveat3hours，butglialastrocytemarkerGFAPnegative．Thedifferentiationwssthemosts

8、ignificantwhentheinducingconcentrationofsalviamiltiorrhizainjectionwasat10ml／L．ConclusionrMS；Cscanbeinducedtodifife~rentiateintoneuron—likecellswithsalviamiltiorrhizainjection．Theefficacyofdifferentiat