中科瑞泰(北京)生物科技有限公司

中科瑞泰(北京)生物科技有限公司

ID:32355600

大小:129.84 KB

页数:3页

时间:2019-02-03

中科瑞泰(北京)生物科技有限公司_第1页
中科瑞泰(北京)生物科技有限公司_第2页
中科瑞泰(北京)生物科技有限公司_第3页
资源描述:

《中科瑞泰(北京)生物科技有限公司》由会员上传分享,免费在线阅读,更多相关内容在工程资料-天天文库

1、中科瑞泰(北京)生物科技有限公司Tel:400-699-0631http://www.real-tims.com.cnE-mail:real-times@163.com碱性蛋白非变性PAGE凝胶制备及电泳试剂盒(货号:RTD6131)Ver.680564BasicProteinNativePAGEGelPreparationandElectrophoresisKit●产品组成:货号名称规格保存条件AC2913-0130%PAA(29:1)100ml4℃,避光RTD6131-024×碱性蛋白分离胶缓冲液pH4.3100ml4℃RTD6131-034×碱性蛋白浓缩胶缓冲液pH6.830

2、ml4℃AP020PAPS(干粉)0.5gRTTA0761-01TEMED0.5ml4℃,避光PL1105×甲基绿上样缓冲液1ml-20℃TG160P5×碱性蛋白电泳缓冲液(干粉)1LRT●产品简介:本公司提供的试剂盒包含碱性蛋白凝胶制备及电泳所需的全部试剂,用户只需自备制胶器具和蒸馏水。本试剂盒可用于配制碱性蛋白非变性(native)PAGE凝胶。本试剂盒可配制30-50块常规大小的非变性PAGE胶。各种蛋白质分子由于所含的碱性氨基酸和酸性氨基酸的数目不同,因而有各自的等电点。凡碱性氨基酸含量较多的蛋白质称为碱性蛋白质,等电点偏碱性,如组蛋白、精蛋白等。反之,凡酸性氨基酸含量较多

3、的蛋白质,等电点就偏酸性。分离碱性蛋白时候,要利用低pH凝胶系统,分离酸性蛋白时候,要利用高pH凝胶系统。酸性蛋白通常在非变性凝胶电泳中采用的pH是8.8的缓冲系统,蛋白会带负电荷,蛋白会相阳极移动;而碱性蛋白通常电泳是在微酸性环境下进行,蛋白带正电荷,这时候需要将阴极和阳极倒置才可以电泳。特别说明:由于本系统采用非连续凝胶系统,分离胶pH为4.3,因此要求待分离的蛋白等电点pI>7.0,这样碱性蛋白在酸性凝胶系统内带正电荷,在凝胶电泳中才能正常向阴极泳动。如果待分离的蛋白等电点pI<7.0,请选择非连续Laemmli活性凝胶系统分离(货号:RTD6130)。●使用说明:一配制分离

4、胶(各试剂使用量请参考表二)根据目的蛋白的分子量大小选择合适的凝胶浓度(表一),再按照下面的分离胶配方表(表二)配制非变性PAGE的分离胶(即下层胶)。表一不同浓度的SDS-PAGE分离胶的最佳分离范围:SDS-PAGE分离胶浓度最佳分离范围6%50-150kD8%30-90kD10%20-80kD12%12-60kD15%10-40kD注:本制品仅供科研用。请勿用于人体及动物的医疗、临床诊断或作为食品、化妆品、家庭用品的添加剂等用途。1中科瑞泰(北京)生物科技有限公司电话:400-699-0631E-mail:real-times@vip.163.comhttp://www.re

5、al-times.com.cn配制分离胶前,根据以下配方准备10%APS:10%APS配制-5ml:将0.5gAPS干粉溶于5ml灭菌水中,彻底溶解后分装,1ml/支,-20℃备存,每次取一管使用。10%APS应尽量减少室温存放时间,以防失效。10%APS在4℃有效期为一周,-20℃有效期6个月。若发现凝胶聚合时间延长,应考虑更换使用-20度保存的10%APS。制备分离胶步骤:1.参照凝胶模具说明书,装配好凝胶模具。2.根据表二,将不同体积的成分在小烧杯或试管中混合;先后加入TEMED和10%APS,轻轻搅拌使其混匀,避免产生气泡3.在凝胶模具中灌入适量分离胶溶液(对于mini-g

6、el,凝胶液加至约距前玻璃板顶端1.5cm或距梳齿约0.5cm即可),然后在分离胶溶液上轻轻覆盖一层1-5cm的水层,使凝胶表面保持平整。4.静置40-80分钟,待分离胶和水层之间出现一个清晰的界面后,说明凝胶已聚合。注:由于分离胶的pH为酸性4.3,凝胶时间较Laemmli系统(pH8.8)要长,可以37℃加速凝胶。凝胶的聚合时间与环境温度有关。夏天温度较高时,聚合较快;冬天气温低时,聚合时间会延长。可以根据环境温度的不同调节APS的加入量。配制不同体积的8%分离胶所需各组分的体积(毫升)各组份体积总体积51015203050组份灭菌水2.44.77.19.514.223.74×

7、分离胶缓冲液pH4.31.252.53.7557.512.530%PAA(29:1)1.32.745.3813.310%APS0.050.10.150.20.30.5TEMED0.0050.010.0150.020.030.05配制不同体积的10%分离胶所需各组分的体积(毫升)各组份体积总体积51015203050组份灭菌水24.16.18.112.220.34×分离胶缓冲液pH4.31.252.53.7557.512.530%PAA(29:1)1.73.356.71

当前文档最多预览五页,下载文档查看全文

此文档下载收益归作者所有

当前文档最多预览五页,下载文档查看全文
温馨提示:
1. 部分包含数学公式或PPT动画的文件,查看预览时可能会显示错乱或异常,文件下载后无此问题,请放心下载。
2. 本文档由用户上传,版权归属用户,天天文库负责整理代发布。如果您对本文档版权有争议请及时联系客服。
3. 下载前请仔细阅读文档内容,确认文档内容符合您的需求后进行下载,若出现内容与标题不符可向本站投诉处理。
4. 下载文档时可能由于网络波动等原因无法下载或下载错误,付费完成后未能成功下载的用户请联系客服处理。