galectin8在哮喘大鼠气道重塑中的作用姜黄素的干预

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1、温州医学院硕士学位论文GaIectin-8在哮喘大鼠气道重塑中的作用及姜黄素的干预研究生：徐丽丹导师：罗运春教授蔡晓红教授李孟荣主任医师董琳主任医师温州医学院附属育英儿童医院呼吸内科中文摘要目的：(1)建立大鼠慢性哮喘模型，观察哮喘大鼠半乳糖凝集素-8(Galectin-8)及其mRNA、P．ERKI／2及其mRNA在气道、肺组织中的表达情况。(2)探讨Galectin．8及下游因子ERKl／2与哮喘气道炎症及气道重塑的关系。(3)研究Galectin．8抑制剂渥曼青霉素及姜黄素对哮喘大鼠气道炎

2、症、气道重塑及对肺组织中Galectin．8、ERKl／2表达的影响。(4)观察地塞米松对气道重塑和肺组织Galectin-8、ERKI／2表达的影响。方法：SPF级雄性SD大鼠59只，4—6W，100—1209，用卵清白蛋白(OVA)致敏与激发，建立大鼠哮喘气道重塑模型。实验分为正常组(N组，9只)、哮喘组(A组，10只)、地塞米松组(M组，10只)、渥曼青霉素组(W组，10只)、姜黄素组(C组，10只)及玉米油组(0组，10只)，正常组用生理盐水，模型组及各治疗组用OVA／A1(OH)3混合

3、凝胶于第1、8天腹腔注射(i．p)致敏，第15天开始激发，每周三次，每次30分钟，连续8周。C组激发前半小时，予腹腔注射姜黄素100mg／kg：W组激发前半小时予腹腔注射渥曼青霉素15ug／kg：O组激发前半小时予腹腔注射玉米油4ml／kg；M组激发前半小时予腹腔注射地塞米松0．5mg／kg，其余两组以生理盐水代替。末次激发后24小时内处死大鼠用固相夹心酶联免疫吸附试验(ELISA)方法检测血清及支气管肺泡灌洗(BALF)液中ICAM．1水平；对BALF液行细胞总数计数，BALF沉渣涂片作细胞分

4、类计数；光镜、电镜观察肺组织病理变化：图像分析技术测定肺内支气管壁厚度(Wat)及平滑肌厚度(Warn)等重塑指标；免疫组化、RT-PCR法测Galectin-8、P．ERKl／2的表达情况等。结果：1．光镜：N组支气管和血管周围未见炎性细胞浸润，支气管平滑肌未3温州医学院硕士学位论文出现增厚。A组可见支气管和血管周围炎性细胞浸润，以淋巴细胞、EOS、中性粒细胞为主，气道上皮断裂，管腔内可见粘液栓，基底膜增厚，支气管壁增厚、胶原沉积等。治疗组上述改变程度不一，均较A组减轻。2．电镜：电镜下N组显

5、示正常的肺泡隔和肺泡II型上皮细胞，细胞内板层体致密、丰富，支气管纤毛上皮排列整齐。A组肺泡隔明显增厚，肺泡II型上皮细胞肿胀，出现板层小体和线粒体空泡化，纤毛排列稀疏，基底膜增厚，胶原沉积等。治疗组上述改变程度不一，均较A组轻。3．细胞计数及分类计数：A组BALI=细胞总数[(3．65±O．37)×106／L]、嗜酸细胞百分比[(7．32±1．62)％]均显著高N组[分别为(0．79±0．30)X106／L、(2．3±0．94)％](均P

6、／L、(4．92±0．82)％]、W组[分别为(1．77±0．17)×106／L、(2．86±0．31)％]、C组[分别为(2．294-0．27)×106／L、(4．68±0．57)％]，其中细胞总数均低于A组但仍高于N组(P<0．05或P

7、Im、(13．21

8、±1．26)lIm2／Ilm]增加(均P

9、lm2／llm、(34．67±1．79)Hm2／um]均较A低(P<0．05或P

10、1±5．254)pg／m1]及BALF液ICAbi-1浓度[(49．89-+2．113)pg／m1]均高于N组[分别为(38．16±1．746)pg／ml、(28．03-+1．983)Pg／m13(均P