epcs移植促进兔肝静脉型bcs肝静脉回流作用的实验研究

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1、徐州医学院硕士学位论文第三部分EPCs移植促进兔肝静脉型BCS肝静脉回流作用的实验研究中文摘要目的探讨EPCs移植在兔肝静脉型BCS模型中改善肝静脉回流障碍的的作用机制。方法12只肝静脉型BCS模型兔(建模成功术后4周)随机分为EPCs移植组和对照组，每组各6只。EPCs移植组用5ml注射器抽取3ml浓度为(2～3)X106／mlEPCs的细胞悬液，超声引导下经门静脉途径缓慢输入。对照组经门静脉输入等体积的生理盐水。移植术后4周，所有兔均全麻下经CDUS检查肝静脉阻塞情况及肝脏回声变化，测量肝静脉、门静脉主干内径及平均血流速度、测算门静脉每分钟血流量；插管测定门静脉主干压

2、力；处死动物，采集靶肝静脉及其引流区内的肝脏组织标本，进行HE染色、CD34免疫组化染色，光镜下观察肝组织结构变化，将实验组各观察点结果与对照组相应结果进行比较。结果1．EPCs移植术后，所有兔均未出现腹腔内出血、死亡等情况。2．CDUS示：所有兔靶肝静脉内膜增厚，管腔均狭窄，EPCs移植组和对照组无统计学差异(尸>0．05)。EPCs移植组、对照组靶肝静脉引流区肝实质分别呈均匀稍高回声、不均匀稍高回声。移植术后4周，对照组门静脉平均流速、血流量分别为(10．88±1．23)cm／s、(131．45±14．88)ml／min，EPCs移植组门静脉平均流速、血流量分别为(1

3、2．75±1．08)cm／s、(158．13±17．66)ml／min(氏0．05)；对照组门静脉压力为(13．50±1．05)cmH20，EPCs移植组为(12．17+0．75)cmH20(火0．05)。3．大体观察：对照组肝脏表面欠光滑，质地较硬，表现为暗红色；EPCs移植组肝脏表面光滑，质地较软，呈现粉红色。4．光镜下：对照组肝细胞肿胀，局灶性肝细胞萎缩、坏死，部分区域成纤维条索样改变，肝静脉壁不光整，内膜增厚；EPCs移植组肝细徐州医学院硕士学位论文胞肿胀程度较轻，门静脉分支血管增多，门脉血管沟通较明显，肝静脉壁光整；对照组肝静脉窦微血管密度计数(15．95±1．

4、43)／HP，EPCs移植组(23．94+2．00)／HP(P．

5、eToinvestigatethemethodsofisolatingandculturingendothelialprogenitorcells(EPCs)fromrabbitbonemalTowandidentifythecellsinordertoreadyforthesubsequentexperiments．MethodsAdultandhealthyrabbitswereselected．Rabbitbonemarrowmononuclearcslls(MNCs)wereisolatedbyhistopaquedensity-gradientcentrifug

6、ationandweresuspendedinendcIthelialbasalmediumsupplementedwithE国也．MVBulle妇陆tandthenthecellswereplatedonfibronectin-coatedculturedishes．Processofcellsgrowthwasobserved．EPCswereidentifiedbyDillabeledacety’latedlowdensityliprotein(DU—acLDL)andFITClabeledI难A—llectin(HTC-UEA-1)．necellsshowedre

7、dflurescencewereceilsphagocytizedacLDL，whilethosewithgreengluorescenewerecellsbindwith黝．j．ImmunoflurescencewereperformedtoanalyzetheexpressionofCD．34andCD．133withPE。CD34andFITC．CD133．Results1．Observationofeellmorphous：newisolatedMNCSwereroundandtransparent．Partsofth