NYT570-2002-马流产沙门氏菌病诊断技术.pdf

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1、ICS11.220B41中华人民共和国农业行业标准NY/T570一2002马流产沙门氏菌病诊断技术Diagnostictechniquesforequineabortussalmonellosis2002一08一27发布2002一12一01实施中华人民共和国农业部发布NY/T570-2002前言马流产沙门氏菌病(equineabortussalmonellosis)是由沙门氏菌或鼠伤寒沙门氏菌等引起的一种以孕马流产为主要特征的马属动物传染病，又名马副伤寒或马沙门氏菌性流产。幼驹感染后表现腹泻、关节肿大、支

2、气管炎或败血症，公马、公驴表现辜丸炎、移甲肿，在成年马中偶尔发生急性败血性胃肠炎马流产沙门氏菌病在世界动物卫生组织[WorldOrganizationforAnimalHealth(英),OfficeIn-ternationaldesEpizooties(法),OIE]编著的《哺乳动物、禽和蜜蜂A类和I3类疾病诊断试验和疫苗标准手册》中虽未单列本病，但在沙门氏菌病一章中规定了诊断试验方法。本标准与卜述手册中沙门氏菌病的主要诊断技术病原鉴定和血清学试验基本一致本标准的附录A为资料性附录。本标准由农业部畜牧兽

3、医局提出。本标准由全国动物检疫标准化技术委员会归口。本标准起草单位:中国人民解放军军需大学。本标准主要起草人:王世若、王兴龙、沈广、梁焕春、江文正。lvv/T570-2002马流产沙门氏菌病诊断技术1范围本标准规定了马流产沙门氏菌病的病原学检杳及血清学检查的技术要求。本标准适用于马属动物马流产沙门氏菌病的诊断及检疫2规范性引用文件FA文件中的条款通过本标准的引用而成为本标准的条款凡是9111期的引用文件，其随后所有的修改单(不包括勘误的内容)或修汀版均不适用于本标准然而。鼓励根据本标准达成协议的各方研究是

4、否可使用这此文件的最新版本。凡是不注日期的引用文件，其最新版本适用千木标准。GB4789.28--1994食品卫生微生物学检验染色法、培养基和试刊3细菌学检查3门器材恒温箱、高压灭菌器、显微镜、灭菌试管,5ml灭菌注射器、煮沸消毒器、外科剪、棉棒、镊、载玻片、铂金耳、酒精灯等I2培养基及试荆3.2-1四硫磺酸钠煌绿增菌液(TTB)，见GB4789.28--1994中4.14,1.153.2.2沙门志贺(SS)琼脂，见GB4789.281994中4.2203.2.3尿素琼脂，见GB4789.28一1994中

5、3.153.2.4糖发酵管，见GB4789.28一1994中3.23.2.5蛋自豚水及靛基质试剂，见GB4789.281994中3.133.2.6缓冲葡萄糖蛋白陈水、甲基红(Mlz)试剂及维培(VP)试剂，见GB4789.28--1994中3.43.2.7份糖铁琼脂(TSI).见GB4789.28--1994中4.26,4.273.2.8节兰氏染色液，见GB4789.28-1994中2.203.2.9沙门氏菌属因子血清(26种，分型用)3.2.10IL明系小鼠，清洁级，体重17g-20go13检验程序马流

6、产沙门氏菌检验流程见附录A(资料性附录)。13门病料标本采集13门.，孕马流产胎儿，用外科剪无菌打开腹腔，用注射器吸取腹水或胃内容物注入灭菌试管中;或用外科剪取肝、脾、肾、心等置培养皿中I11.2流产母马胎衣，用灭菌棉棒蘸取勃液或刮取胎衣病变组织置十试管中。I11.3公畜精液应于采精后，立即用注射器等吸取，注人试管中。I11.4幼驹关节病变局部用碘酒及酒精消毒后，以注射器吸取关15液或肿胀部渗出液，注人试管中待检3-3.2显微镜检查3.3-2.1操作方法将病料标本涂于载玻片卜。革竺氏染色，镜检。NY/T5

7、70一2002I12.2结果观察沙门氏菌为两端钝圆的中等大杆菌，有时近似球杆形，单独散在.着色良好，偶见菌体两端着色较深，革兰氏阴性I13分离培养I13门操作方法用铂余耳钓取病料标本。接种于TTB增菌液中做增菌培养，同时接种于普通琼脂、SS琼脂做分离培养，于37(恒温箱中孵育18h一24haI13-2培养特性观察见到下述培养特性时，符合沙门氏菌特性。I13.2门TT13增菌液生长良好，均匀混浊，管底有猫稠沉淀物II12.2普通琼脂正圆形、表面光滑、微隆起、闪光、半透明、边缘整齐的中等大菌落(直径2m-4m

8、m)II12.3ss琼脂i1.圆形、淡桔红色、“}之透明中等大菌落，产生硫化氢(H,S、的菌株，有时使菌落中心带黑色13.4生化特性鉴定33.4.1操作方法33.4门.1初筛培养用铂金1}选取I_述or疑菌落，先接种于一FSl培养纂的斜面1.,再穿刺接种于底层内，于37C孵育181-241做初筛培养，如果F层培养基变黄色、混浊.1「产生气体，I层斜而颜色不变仍为红色有些菌株产'I硫化城时则使培养墓呈黑色。以卜符合沙门氏菌的特征