GBT27641-2011马螨病诊断技术.pdf

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1、ICS”．220B41雷园中华人民共$-n国国家标准GB／T27641—20112011-12-30发布马螨病诊断技术Diagnostictechniquesforhorsemange2012-04—01实施宰瞀髁紫瓣訾麟瞥星发布中国国家标准化管理委员会仅19标准分享网www.bzfxw.com免费下载刖昌GB／T27641—2011本标准按照GB／T1．1—2009的规则起草。本标准由中华人民共和国农业部提出。本标准由全国动物防疫标准化技术委员会(SAC／TC181)归口。本标准起草单位：中华人民共和国山东出入境检验检疫局、中国动物卫生与流行病学中心。本标准主要起草人：梁成珠、朱来华

2、、郑小龙、肖西志、邓明俊、岳志芹、毕道荣、梁君妮、徐彪。标准分享网www.bzfxw.com免费下载1范围马螨病诊断技术本标准规定了马螨病临床检查、病原样品采集与鉴定等诊断技术要求。本标准适用于马螨病的检疫和诊断。2临床检查GB／T27641--20112．1临床特征马患本病时，先由头、颈、体侧开始，随后蔓延至肩、背、全身，足螨则主要寄生于四肢的下半部。主要表现为皮肤发痒，骚动不安，舔、咬、踢瘙痒部，常倚物摩擦；被毛凌乱，拨开患部被毛，患部皮肤出现结节、水泡，破溃后形成痂皮，被毛脱落，皮肤肥厚，皱褶，病马日渐消瘦。在诊断中，可观察动物是否有用嘴轻咬或摩擦患处皮肤的表现。在拥挤的围栏中强

3、迫动物运动，使机体发热，促进皮肤吸收螨虫的抗原或刺激物(分泌物)，激发临床症状。2．2初步判定2．2．1根据临床症状如剧痒、皮肤增厚、有痂皮、脱毛和消瘦等特征可做出初步判定。2．2．2当发现可疑马匹时，需继续观察或采取病料送实验室进一步病原学检查。3病原样品采集与鉴定3．1设备、器械与试剂3．1．1设备、器械显微镜(100×)、恒温箱(4℃～60℃)、离心机(离心速度3000r／rain)、酒精灯、凸刃小刀、棉拭子、骨科刮勺、自封袋、平皿、试管、载玻片等。3．1．2试剂甘油或液体石蜡、10％氢氧化钾(钠)溶液、60％硫代硫酸钠溶液等。3．2显微镜检查3．2．1病料的采集3．2．1．1保

4、定马匹，将患部与健康部交界处被毛剪掉，用通过火焰灭菌的凸刃小刀倾斜45。刮取裸露部皮屑直到皮肤微出血为止。收集刮下的病料进行实验室检查。3．2．1．2用适当大小的棉拭子插入外耳道直到遇到阻力，然后轻轻地旋转并退出。插入外耳道要轻柔细心，注意马匹的反应。或用骨科刮勺刮取马耳内廓耳垢。3．2．1．3将皮屑和耳垢迅速转移到自封袋或平皿内密封后送往实验室待检。3．2．1．4采集病料前，滴一滴甘油或液体石蜡在皮肤或器具上有助于螨虫的收集。】标准分享网www.bzfxw.com免费下载GB／T27641—20113．2．2检查方法3．2．2．1直接检查法取适量病料，37℃恒温箱中作用15min～3

5、0rain，直接放在平皿上进行镜检。3．2．2．2温水检查法将病料浸入40℃～45℃的水中，置恒温箱内，在温热水的作用下，螨虫由皮屑或耳垢内爬出，集成团而沉入水底，1h～2h后，将浸过病料的液体倒出，将沉渣倾人平皿中镜检。3．2．2．3沉淀法将采集的病料置于试管中，加入10％氢氧化钾(钠)溶液，在酒精灯上煮数分钟(或浸泡2h)，然后2000r／min离心沉淀5min，弃上清液，吸取沉淀物，放在载玻片上，进行镜检。3．2．2．4漂浮法将采集的病料置于试管中，加入10％氢氧化钾(钠)溶液，煮沸数分钟(或浸泡2h)，然后2000r／rain离心沉淀5rain，弃上清液，取沉淀物，用蒸馏水将其

6、中的氢氧化钾(钠)浸洗干净，在沉淀物中加入60％硫代硫酸钠溶液使液体满于管口，但不溢出。静置5min～10rain，螨即浮集于液面，可用载玻片直接蘸取镜检。3．3结果判定在显微镜下检查，发现有螨虫体(卵)为阳性结果，未发现螨虫体(卵)为阴性结果(参考附录A和附录B)。四种检查方法只要一种方法鉴定为阳性，则判定为阳性结果。标准分享网www.bzfxw.com免费下载附录A(资料性附录)螨虫的形态示意圄圄A1Sareoptlcm衄耻mite疥蜻图A2Femaleseabi始mitewithegg雌性疥螨和虫卵标准分享网www.bzfxw.com免费下载maleCourtesyofDrDie

7、trichBarth，Merial雄性疥螨圈A4Sarcoptesscablei，female．CourtesyofDrDietrichBarth，Merial雌性疥螨图A5P$oroptes，male．CourtesyofDr．DietrichBarth，Merial雄性痒螨蒸麓图A678Chorioples，femaleCourtlyofDr．DietrichBarth．Merial雌性足螨或皮螨GB／T27641—20116未发育)图A．