雌激素在黄褐斑发病中的作用及黄褐斑的治疗的研究

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1、博士学位论文雌激素在黄褐斑发病中的作用及黄褐斑的治疗研究博士研究生：唐建兵指导教师：柳大烈教授摘要皮肤上出现色素沉着或色斑极大影响面容，且大部分属于后天性色素沉着。常见的有黄褐斑、雀斑、日晒斑、老年斑、外伤后色素沉着、手术后色素沉着等。其中黄褐斑发病率高、发病机理复杂、治疗效果不佳、复发率高，成为皮肤美容领域研究的热点和难点。引起色素沉着的原因很多，亦十分复杂。凡影响色素沉着过程中任何一个环节都可能导致色素沉着，该过程包括：①黑素细胞内黑素小体的装配与黑素合成；②黑素小体由核周向树突远端转移；⑧黑素小体传递至邻近角质形成细胞；④

2、黑素小体在角质形成细胞内再分布、降解。大致可分为遗传因素、物理性因素(如紫外线、日光曝晒等)、化学性因素(如重金属砷、铋、银、汞等物质刺激)、内分泌因素(妊娠、垂体、甲状腺、肾上腺、性腺功能紊乱等致黄体酮、雌激素水平变化)、炎症性因素和代谢性因素等几大类。雌激素是主要由卵泡和黄体产生的甾体类激素，主要作用是促进生殖系统的发育，刺激女性第二性征的出现，影响代谢机能。既往研究已表明雌激素与乳腺疾病、生殖系统疾病、心脑血管、骨关节疾病均有密切的关系。临床上我们发现，妊娠、口服避孕药、慢性疾病、化妆品都可能导致皮肤色素沉着，典型表现如黄

3、褐斑。妇女怀孕后，体内激素水平会发生变化，如血液中雌激素、孕激素或促黑色素细胞激素水平增高，可能促使黑色素细胞活性增加，黑色素增多。沉着的色素常常于妊娠早、中期间出现，并逐渐加重至足月。而且有些患者在分娩后，其黄褐斑会持续存在。长期口服避孕药的妇女，由于体内中文摘要激素水平的变化，也会和妊娠一样会诱发黄褐斑。一般症状从服药后l--一20个月开始，停药后可逐渐消退。某些慢性疾病如肝脏病、慢性酒精中毒、结核、内脏肿瘤、甲状腺疾病及一些自身免疫性疾病等，特别是女性生殖器官疾病和月经不调、痛经、子宫附件炎、不孕症等患者面部也常常出现黄褐

4、斑。这可能与卵巢、脑垂体、甲状腺等内分泌失调、激素水平紊乱有关。以上几种发病诱因中都可能有雌激素的作用，但雌激素与色素沉着疾病之间的关系研究甚少。研究目的：1、研究黄褐斑皮肤的组织学改变及角蛋白10(CKl0)的表达情况。研究黄褐斑的色素分布特点及其与正常皮肤的差异。2、研究女性黄褐斑患者病损部位的色素特点和血清雌激素水平的变化。探讨黄褐斑患者病损部位和正常皮肤雌激素受体p(ERp)的分布情况，了解雌激素p在黄褐斑发病中的作用。进行人色素斑皮肤的黑色素细胞体外培养，观察培养的黑色素细胞的形态与生长特性。观察不同浓度外源性雌激素(

5、己烯雌酚)对体外培养面部皮肤黑色素细胞的增殖的影响。观察雌激素对培养的面部黑色素细胞的酪氨酸酶活性及色素合成的影响。3、研究应用计算机色素分析软件评估面部色素性疾病及其治疗效果。探讨黄褐斑的综合治疗方法，提高黄褐斑的治疗效果。研究黄褐斑患者病损部位激光治疗前后色素分布特点，了解激光治疗后黄褐斑色素的代谢变化。研究方法：l、取黄褐斑患者眼袋术后外眦多余皮肤，行石蜡切片的HE染色、Fontana-Masson染色和CKIO的免疫组化染色，观察此处皮肤的病理学改变和CKl0的分布情况。应用黄褐斑患者行外切口眼袋整形手术切取的外眦部色斑

6、皮肤和周围正常皮肤分别行HE和Fontana-Masson染色，观察黄褐斑病损部和周围非病损皮肤的色素分布情况。2、采用安琪儿软件对25例黄褐斑患者的病损部位色素水平进行分析，并利用放免法测定血清雌二醇等性激素水平。应用免疫组化法观察黄褐斑患者色博士学位论文素病损部和正常皮肤的雌激素受体B的表达分布情况，并分析其表达强度与色素的严重程度的相关性。获取黄褐斑患者眼袋术后皮肤标本，0．25％中性蛋白酶消化获取表皮，0．25％胰酶+o．02％EDTA消化获取细胞悬液，加入M254／HMGS条件培养基，进行黑色索细胞纯化培养，应用倒置显

7、微镜观察细胞形态，采用多巴染色和S．100蛋白免疫组化染色进行鉴定。进行面部皮肤黑色素细胞的原代及传代培养，将第3代黑色素细胞接种于96孑L板，每孔5x103个细胞，24h后换液，加入含lxlO‘4"---1xlO{M不同浓度己烯雌酚的培养基，孵育72h后MTT法测定黑素细胞增殖情况。获取眼袋术后皮肤标本，进行黑色素细胞纯化培养并鉴定。将第二代细胞传代接种，24小时后换液，加入含雌激素的黑色素细胞培养基，48小时后分别进行酪氨酸酶活性和色素合成的检测，72小时后消化收集细胞通过透射电镜检测超微结构的变化。3、治疗前及复诊时采集患

8、者色素性疾病区域的数码照片，输入计算机，应用色素分析软件系统测量患者皮肤色素性疾病的皮损面积、红、绿、蓝色的灰度值、平均灰度值、最大及最小灰度；对600例黄褐斑患者采用外用药物治疗、输液治疗、口服药物治疗及激光、光子等综合措施治疗。采用色素分析软件对治疗效果进行