hsa-mir-150过表达诱导弥漫大b淋巴瘤细胞系oci-ly10再分化

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1、Hsa-miR-150过表达诱导弥漫大B淋巴瘤细胞系OCI-Ly10再分化*△严金海，王志强，韩西群，陈少红，周新华，简文静，葛娟，赵彤（南方医科大学南方医院病理科,基础医学院病理学系,广东广州5105515）[摘要]目的：探究hsa-miR-150过表达对弥漫大B淋巴瘤细胞系OCI-Ly10再分化的机制。方法：运用real-timePCR检测hsa-miR-150在永生化CD19+B细胞和OCI-Ly10细胞中的表达，利用Westernblotting和免疫荧光细胞化学检测了hsa-miR-150的

2、靶基因c-myb表达；通过LipofectamineTM2000脂质体法将含有重组慢病毒质粒的病毒上清转染OCI-Ly10细胞（Ly10-control组和Ly10-miR-150组）；对新构建的细胞亚系，通过MTT法检测细胞增殖能力，流式细胞术检测细胞周期及凋亡；运用real-timePCR、免疫荧光细胞化学和Westernblotting检测Ly10-control和Ly10-miR-150的B细胞分化相关基因及c-myb的表达；利用干扰片段干扰OCI-Ly10细胞c-myb表达后，运用real-

3、timePCR和Westernblotting检测干扰效率及干扰后转录调节因子（BCL6）和浆细胞分化开关蛋白（PRDM1）的表达。结果：（1）CD19+B淋巴细胞的hsa-miR-150表达量明显高于OCI-Ly10细胞（P<0.05）；c-myb在OCI-Ly10细胞中表达较强，而在CD19+B淋巴细胞表达较弱。（2）OCI-Ly10细胞经转染hsa-miR-150后，B细胞分化相关基因的表达都明显发生了变化，B细胞特意激活蛋白（PAX5）和BCL6表达下调（P<0.05）；干扰素调节因子4（IR

4、F4）、PRDM1和人X盒结合蛋白1(XBP1)的表达上调（P<0.05）；和对照组相比，c-myb的在Ly10-miR-150细胞中表达明显下调（P<0.05）。（3）干扰OCI-Ly10细胞c-myb表达后，BCL6表达明显下调，而PRDM1表达明显上调。结论：（1）hsa-miR-150过表达对OCI-Ly10细胞抑制增殖和诱导凋亡作用非常明显。（2）过表达hsa-miR-150可诱导该瘤细胞向末端B细胞方向分化，作用机制可能与下调其靶基因c-myb的表达有关。[关键词]弥漫大B细胞淋巴瘤分化H

5、sa-miR-150C-myb[中图分类号]R329.21[文献标识码]A*[基金项目]国家自然科学基金资助项目（No.81272634）△通讯作者Tel:020-61648228；E-mail：zhaotongketizu@126.com1Over-expressionofhsa-miR-150couldinduceDiffuselargeBcelllymphomacelllineOCI-Ly10re-differentiationYANJin-hai,WANGZhi-qiang,HANXi-qun

6、,CHENShao-hong,ZHOUXin-hua,JANWen-jing,GEJuan,ZHAOTong（DepartmentofPathology,NanfangHospital,DepartmentofPathology,SchoolofBasicMedicalScience,SouthernMedicalUniversity,Guangzhou510515,China.E-mail：zhaotongketizu@126.com)[ABSTRACT]AIM:Discoveringthemech

7、anismthatover-expressionofhsa-miR-150inducesDiffuselargeBcelllymphomacelllineOCI-Ly10re-differentiation.METHODS:Expressionlevelofhsa-miR-150inCD19+BandOCI-Ly10celllinesweredetectedbyusingreal-timePCR;Expressionlevelofc-mybwasdetectedbyusingWesternblotti

8、ngandimmunofluorescencecytochemistrytechnology.LentiviralsupernatantcontainingrecombinantplasmidsweretransfectedtoOCI-Ly10celllinebyLipofectamineTM2000andnamedLy10-controlandLy10-miR-150.Biologicalfunctionofthetwocellsublineswere