木犀草素和橙皮素对人牙周膜细胞群增殖和分化能力影响的初步的研究

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1、学位论文原创性声明本人郑重声明：所呈交的学位论文，是自己在导师的指导下，独立进行试验研究取得的成果。除文中已经注明引用的内容外，本论文内不包含其他任何人或集体已经发表或撰写过的科研成果。对本文的研究作出重要贡献的个人和集体，均己在文中明确标明。本声明的法律责任由本人承担。学位论文作者：≥七乏勘同期：如修上月l。同学位论文使用授权声明本人是在导师指导下完成论文及相关作品，知识产权归属郑州大学。根据郑州大学有关保留、使用学位论文的规定，同意学校保留或向国家有关部门或机构送交论文的复印件和电子版，允许论文被查阅和借阅；本人授权郑州大学可以将本学位论文的全部

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3、在倒置显微镜下观察牙周膜细胞的生长状况；MTT法绘制细胞生长曲线；免疫组织化学法鉴定细胞来源；并对细胞进行成骨诱导及茜素红染色；采用M1vr四哗豁比色法、考马斯亮蓝染色法、ALP碱性磷酸酶检测试剂盒、Q．PCR检测成骨相关基因等方法观察不同浓度木犀草素、橙皮素对牙周膜细胞群增殖、蛋白含量及骨向分化的影响。结果1、镜下观察牙周膜细胞第3-9d从组织块中游出，细胞排列无序，大部分呈长梭形，胞体饱满，具有细而长的胞突，胞质均匀，细胞核位于细胞中央、呈圆形或卵圆形。少量细胞较小且形态不规则；细胞生长曲线测定显示第3代牙周膜细胞群(periodontallig

4、amentcellpopulation，PDLP)生长曲线呈“S”型；免疫组化结果显示：第3代PDLP波形丝蛋白强阳性表达，角蛋白染色阴性表达；PDLP成骨诱导：矿化诱导组大量矿化结节形成。2、不同木犀草素和橙皮素对PDLP增殖及蛋白含量的影响①MTT结果显示：木犀草素、橙皮素作用于PDLP24、48、72h，各浓度组(100pM、10pM、1pM、0．1pM、O．01pM)均可促进牙周膜细胞的增殖(P

5、．05)摘要2)橙皮素各实验组细胞内总蛋白含量均高于对照组(P<0．05)，0．1gM木犀草素总蛋白含量较其他实验组高(火O．05)。3、木犀草素和橙皮素对PDLP骨向分化的影响@ALP碱性磷酸酶检测试剂盒结果显示：1)木犀草素各实验组ALP活性均高于对照组(PO．05)，1001．tM浓度木犀草素对应OD值交其他各实验组低(PO．05)。②Q．PCR检测结果显示：1)木

6、犀草素作用72h，实验组ALP表达均呈上调趋势，其中llaM组上调最为显著，O．01gM组ALP表达上调无统计学差异(尸>O．05)，其余实验组ALP表达上调均有统计学差异愀O．05)。1gM和0．1gM组RUNX2表达上调，具有统计学差异(氏O．05)。2)橙皮素作用72h，实验组ALP表达均呈上调趋势，其中0．1I．tM组上调最为显著，0．011．tM组ALP表达上调无统计学差异(P>O．05)，其余实验组ALP表达上调均有统计学差异(P

7、片覆盖组织块法可成功培养出牙周膜细胞群，成功率高，来源可靠，细胞生长状态良好，且在一定条件下可以骨向分化。2、一定浓度的木犀草素可以促进牙周膜细胞群的增殖和骨向分化。3、一定浓度的橙皮素可以促进牙周膜细胞群的增殖和骨向分化。4、本实验为木犀草素和橙皮素进一步应用于牙周组织再生修复提供了一定的参考价值，但是二者的作用机制还需要进一步的实验研究。关键词：牙周膜细胞群、木犀草素、橙皮素、增殖、成骨AbstractobjectiveThisstudyaimedtoexplorethepotentialbeneficialeffectofeffectiveco

8、mponentscontainedintraditionalChinesemedicineontreatin