昆虫病原线虫steinernema+akhursti所携带共生菌的鉴定与描述

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1、周凯中山大学硕士学位论文题目：昆虫病原线虫Steinernemaakhursti所携带共生菌的鉴定与描述专业：微生物学硕士生：周凯指导老师：邱礼鸿副教授摘要致病杆菌属(Xenorhabdus)和发光杆菌属(Photorhabdus)细菌存在于昆虫病原线虫肠道内并与之互惠共生。这类细菌能产生多种有生物活性的次级代谢产物，包括杀虫毒素、抗生素、抗癌药物等，已成为一类新型的具有开发潜力和应用前景的生物资源。为此，人们越来越重视对共生菌的采集、分离以及分类鉴定工作。本研究采用16SrDNA系统分析结合形态与生理生化鉴定的方法，对本室最近定名的一个采自我国云南省的昆虫病原线虫新种S

2、teinernemaakhursti所携带的共生菌进行了分类鉴定与描述。通过反复分离纯化获得了三号&akhursti线虫所携带共生菌的初生型和次生型菌株；采用PCR扩增得到这些菌株的16SrDNA部分序列并与GenBank中登录的已定名致病杆菌属细菌的同源序列进行比对，构建系统发育树；同时以API细菌鉴定试剂条为主对这些菌株的生理生化特性进行了测试比较。16SrDNA序列分析与表型分析结果一致显示Sakhursti所携带的共生菌很可能是致病杆菌属的一个新种，与丑japonica近缘。本研究为进一步研究和开发利用昆虫病原线虫&akhursti及其所携带的共生菌打下了坚实的基

3、础。关键词：昆虫病原线虫共生细菌，16SrDNA，分类鉴定，生物资源旦塑主些查兰堡主兰垡堕塞垫竺———————一Title：IdentificationandDescriptionoftheSymbioticBacteriaofanEntomopathogenicNematodeSteinernemaakhurstiMajor：MicrobiologyName：ZhOHKaiSupervisor：OiuLinghongAssociateProfessorAbstractXeno，^口bduJandPhotorhabdusalesymbioticbacteria(SB)of

4、entomopathogenicnematodes(EN)．Thesebacteriahavebecomeimportantbioresourcesastheyproducemanybioactivesubstances，suchasinsecticidaltoxins，antibioticsandpharmaceutics．Collectionandcorrectidentificationofthesymbioticbacteriaiscriticalforallrelatedstudies．Inthepresentstudy,thesymbioticbacteria

5、ofStienernemaakhursti，anEPNspeciesrecentlydescribedbythislab，wasidentifiedanddescribedbyapolyphasicapproachinvolvedphylogeneticanalysesof16SrDNAandphenotypiccharacterization．Boththegeneticandphenotypicdataobtainedshowedcongludientlythatthesymbioticbacteriaof&akhurstiarelikelytobeanewspeci

6、esofXenorhabdusclosedtoZjaponica．ThepresentstudyunveiledthetaxonomicstatusofthesymbioticbacteriaofS．akhursti，whichsetsasolidfoundationforfurtherstudyandutilizationofthebacteriaanditshostnematodeKeywords：symbioticbacteriaofentomopathogenicnematodes，16SrDNA，identification，bioresourceII周凯中山大

7、学硕士学位论文月U吾昆虫病原线虫共生细菌是一类存在于昆虫病原线虫肠道并与之互惠共生的革兰氏阴性细菌，属于肠杆菌科(Thomas＆Poinar，1979)，兼性厌氧。目前，该共生细菌总共包括两个属，分别为致病杆菌属(XenOrhabdus)和发光杆菌属(Photorhabdus)。其中致病杆菌属与斯氏属(Steinernema)线虫共生，而发光杆菌属与异小杆属(Hetororflabditis)线虫共生(Poinar，1990)。近年来，随着对昆虫病原线虫及其共生菌研究的不断深入，共生细菌的多种生物学功能不断被发现。在自然界中，