rnai技术抗呼吸道合胞病毒的实验的研究

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1、遵义医学院硕十学何论文RNAi技术抗呼吸道合胞病毒的实验研究小鼠肺组织分布良好；分别给予0．5nM、1．OnM和2．OnMsiRNA7816治疗后，病毒空斑形成抑制率分别为55．48％、75．74％、84．96％；小鼠肺组织RSVM2基因mRNA表达下降率分别为28．98％、54．40％、76．79％；RSV抗原平均光密度分别下降了13．43％、22．37％和28．93％；小鼠肺组织病理损害得到改善；BALF中自细胞总数、淋巴细胞百分数随着siRNA7816浓度的增加而降低；BALF中细胞因子IFN-

2、丫、IL．12和IL．10水平下降，与感染对照组比较有显著差异性(P0．05)。结论：1．RSV经鼻腔感染BALB／c小鼠后，病毒在小鼠肺组织内能有效复制；2．RSV经鼻腔感染BALB／c小鼠后，可引起肺组织和支气管炎症反应，应用siRNA7816能够减轻RSV感染所致的气道炎症：3．siRNA7816能够有效的抑制肺组织RSV复制；4．siI矾A7816能特异性的抑制RSV复制

3、。关键词：呼吸道合胞病毒，小干扰RNA，抗病毒作用，气道炎症，小鼠2遵义医学院硕十学何论文RNAi技术抗呼吸道合胞病商的实验研究TheexperimentalresearchofRNAitechnologyinhibitingresDlratorysyncytmlvlrUs●·●■-，-AbstractRespiratorysyncytialvirus(RSV)isoneofthemostimportantlowerrepiratorypathogensininfantsandyoungchildre

4、n，especiallycausingpneumoniaandbronchiolitis．Itisoneofmainreasonsthatcausedtheabbytobeinhospital．ThereisnoreliablevaccineorantiviraldrugagainstRSVatpresent．RNAinterference(RNAi)istheprocssofdepletingRNAtargetsbytheUSeofshortdouble—strandedhomologousmRNA

5、，andhasbeenwidelyusedanti-tumor,anti—viraltherapy．Objeetive：1．Toexploretheinflammationandimmunestatusofrespiratorysyncytialvirus(RSV)-infectedBALB／cmice．2．TostudytheeffectofsiRNA(smallinterferenceRNA，siRNA)7816oninhibitingRSVinBALB／cmiceMethods：1．Balb／c

6、micewererandomlydividedintotwogroups(n=6)，andBALB／emicewereinfectedwithRSVviaintranasalinstillationofRSVsuspension，AirwayinflammationandimmunologywasrevealedbYPulmonaryhistopathology，thelevelsofIFN吖，IL-12andIL·10inbronchoalveolarlavagefluid(BALF)detecte

7、dbyELISAandwhitebloodcellcountsinBALFcountedbymicroscope．2．Balb／emicewererandomlydividedintosixgroups(n=6)，andtheninfectedmiceweretreatedat24hoursand48hourspostinoculationwithvariousdosespecificsiRNA7816targetingRSV—M2gene．Themousewerekilledonday3post—i

8、nfection(PID3)，andhadtheirlungtissueremovedinsupercleanbench．Thedistributionoffluorescein—labeledsiRNA7816Wasthenevaluatedinthefrozensectionofthelungtissue．PulmonaryviraltitersoftheLungtissuewereassayedbyplaqueformingexperimentan