p2csag12ipt基因导入延缓中华结缕草衰老的研究

《p2csag12ipt基因导入延缓中华结缕草衰老的研究》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在学术论文-天天文库。

1、中文摘要针对生产上中举结缕草(Zays。．fasiMcaHance)抗寒性差、叶片易早衰、绿色期短的问题，将拟南芥中衰老特异启动子如一控制下的咖t基因(‰r如￡)导入中华缩缕草，获得了抗寒性提亵、时冀衰老延缓的转蒸觳撩系。主要磷究结果如下：l建立了一套薅散的中华结缕苹褥生体系。强中华结缕苹藏熬种胚秀乡}柱俸，在改良醛培养基中添加2mg／L2，4-D或3mg／LDicamba可使愈伤遴导率分别达34．2％和40．8％。而在继代培养基中添加低浓度6一BA对日}胚性愈伤组织转变成胚性愈伤组织起重要作用，其中2mg／L2，4-D或3．0mg／LOicamba配台0。tmg／L6-B

2、A诱导出熬熬挂愈瘘组织魄铡较褰；嚣瞧愈伤组织分为瓣秘类型，I型菇生能力箍强；分化墙棼基最佳激素配比是0．2mg／LDicamba+O．1mg／L6-BA，再生率可达51．麟，其次为0．2mg／L2，4-D+O．1mg／L6一黼。再生率为38．6％。2避过基因枪介导法将危一-ipt导入中华结缕革胚性愈伤缎织，经抗性筛选、PCR扩增和Southern杂交，共获褥37拣转动￡基鑫疆撩。葜零有6令转基颡拣系衰老延缓、绿色蓑霆长，生育艏期体内细胞分裂素、可溶健缀白等含量明鼹商于野生型，掰脱落酸含量明龆下降。通过测定离体叶片培养斑程中光合速率的变化，也证实了转基因植株叶片衰老速度明姓减

3、慢。3以中华结缕萆种胚诱导出的糕性愈伤组织作为受体，以^rfPtI作抗性基因，通过农杆菌奔导浚成功笼簧嵌念蘩霾‰t—妇t等入襞缕蕈怒镶愈痿组织中，d纛含IOOmg／LG418静培姜基上经筛选、分化、壮髓后得到35株转化植株。经PCR、Southern杂交后，证明‰”～如t已成功整台剿结缕草基因缎中，但只有5个转基因株系在生育后期体内的细胞分裂素撼著提高、离体辞的雌绿素降勰延缓、桔黄期平均攘后15d、衰老受到明显抑制。4遮阴、诋瀣燕黻裁孛华结缕孳推广瘟用静煮鞭逆境医予。本文探讨了遮鞠鞠低温对转基因结缕草中尼。一ipt诱导与表达的影响，证实遮阴和IO'C低温均能激活R一一咖t的

4、表达，并在一定范围内使Bw{-ipf的表达墩上调。关健谰：孛华结缕肇髯生俸系热一一审t基西蒸黻稔舞导法农轷蓥赍寻洼囊老AbstractZoysias如icaHaneewasusedinthisstudy．thepurposeofthestudywastoshowapostponementofleafsenescenceandtoaprolonginggreenperiodofleavesbytransferringp蛳i?一iptgeneintowildZoysia．Theresultsasfollows：1．AnefficientregeneratingsystemofZ

5、oys妇wasestablished。Theinducingrateofcallireached34．2％and40．8％respectivelyinmodifiedMSculturemediumadded2mg／L2，4一Bor3mg／LDieamba，usingmatureembryoasexptant。6-BAwithlowconcentrationwasvitalfortransformationfromnon—embryogeniccallitoembryogeniccallionsubculturemedium．Theoptimumconditionforemb

6、r’yogeniccalliindueingwasobrained．ModifiedMSadded0．1mg／L6-BAand2mg／L2，4一Dor3mg／Ldicambawasbestsubculturemedium，whilemodifiedMSadded0．2mg／Ldicambaand0．1mg／L6一BAfordiffereati8tion。inwhichtheregenerationratereached51，8％．ModifiedMSwith0．2mg／L2．4岫and0．img／L6-BAcouldbeusedasdifferentiationmedium

7、，buttheregenerationratewasloweras38．黼2．mtgenecontrolledbythepromoterof尉GZ?wasintroducedintoembryogeniccatlusofZoysiabyparticlebombardment．37transformantswereobtainedaftersuccessivelyG418resistantselection，PCRanalysisandSouthernblot．Amongthoseplants，only6linesw