生物样品与中药制剂中中药活性成分联用色谱的分析

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1、硕亡学位论文摘要中医药是中华民族一个伟大的宝库。当今世界在回归自然思潮的影响下，许多国家寻找天然药物的呼声日渐高涨，而中药以其丰富的资源、独特的疗效、毒副作用少等特点，已引起世界各国的关注。尤其是近年来西方发达国家医药市场逐渐接受天然药物，这给我国的中药现代化发展提供了前所未有的机遇。中药质量控制和中药药代动力学研究是中药现代化的两个主要方面。因此采用现代科学技术阐明其有效成分和作用机理，掌握其在体内吸收、分布、代谢和排泄过程的特点，用可靠的科学数据来评价和监控中药的内在质量，保证中药用药安全和有效，改善中药科技含量过低，是当前的首

2、要任务。联用色谱技术是从联用技术入手，通过有效的利用色谱，光谱或质谱提供的联合信息，从而建立起对中药和生物体液等复杂体系快速、准确、可靠、灵敏的分析方法。因此，基于目前的色谱开发平台，我们开展了如下创新性的研究：(1)基于阳离子表面活性剂CTAB在浓度低于CMC时吸附在二氧化硅包裹的磁性纳米颗粒上形成混合胶束，我们采用了这种CTAB．Si02／Fe304混合胶束作为纳米萃取固定相萃取和富集生物样品中的化合物。以中药大黄的主要活性物质为例，用HPLC／FLD方法检测血清，尿液中的大黄酸和大黄素。考察了主要因素如表面活性剂的浓度、磁性纳

3、米颗粒的量、吸附时间及解吸附条件等对萃取效率的影响。结果显示，该方法准确度、灵敏度高，大黄酸和大黄素的检测下限低，在尿液中分别为0．2ng／mL和O．5ng／mL，血清中分别为7ng／mL和10ng／mL。也获得了较满意的回收率(92．76％一109．90％)。(2)建立了一种简单、快速、灵敏的胶束液相色谱方法(MLC)直接检测中药制剂和生物样品中的隐丹参酮(CT)和丹参酮IIA(TS)。CT和TS为中药丹参中主要活性成分，因它们具有强而广的药理作用得到大家的广泛关注。MLC以pH为5的0．15MSDS．8％正丁醇溶液作流动相，在分

4、析生物样品时不需要任何的样品前处理，相对传统的样品前处理方法如蛋白质沉淀，液液萃取等，节省了大量的人力物力。实验中蛋白质及内源性物质对实验分析无任何干扰和影响。且这种流动相相对于传统的高效液相色谱水．有机溶剂流动相更为绿色，说明MLC又是一种环境友好的分析方法。该方法获得了好的线性关系(i'2>0．998)，准确度、精确度好，回收率高(CT和TS分别处于96．97％一101．86％和97．48％一103．14％之间)。为中药丹参及制剂中活性成分的药理，药代动力学研究提供了简单可靠的检测方法。(3)基于磁性纳米粒子易于分离并且是优秀的

5、微波辐射吸收剂，我们以磁性II生物样品及中药制剂中中药活性成分的联用色谱分析纳米粒子作为固体媒介吸收微波能量，建立了新型的磁性纳米粒子．微波协助萃取的方法，用于中药中活性成分的快速有效的提取。以中药黄芩为例，比较了加入磁性纳米颗粒．微波萃取与传统的微波萃取的提取效果，结果表明，在有磁性纳米颗粒时，微波萃取不仅时间缩短(60s一40s)，并且萃取所需的有机溶剂含量少，萃取效率更高。以柚皮甙作为内标，萃取液通过HPLC—ESI／MS联用技术定性定量分析，回收率在97．6．104．1％之间，相对标准偏差小于2．5％。黄芩苷，黄芩素，汉黄芩

6、素的检测限分别为O．05，1．0和2．0ng／mL。这种方法成功的用于检测实际样品中有效成分的分析。关键词：中药；生物样品；高效液相色谱；胶束液相色谱；活性成分III硕i：学位论文AbstractTraditionalChinesemedicine(TCM)isagreattreasure．houseoftheChinesenation．Recently，undertheinfluenceofbacktonature，searchingfornaturalmedicinesiSattractingmoreandmoreattenti

7、on，whileTCMhasarousedtheconcernofallcountriesintheworldforitsrichresources，uniqueeffects，fewersideeffects．etc．Moreover，theacceptanceofnaturalmedicineinwesterndevelopedcountriesprovidesthedevelopmentofmodernizationofTCManunprecedentedopportunity．QualitycontrolofTCMandit

8、spharmacokineticsarethetwoaspectsofmodernizationofTCM．Therefore，Usingmodernscienceandtechnologytoclarifytheroleofitsa