咳喘宁对支气管哮喘大鼠免疫调节机制的研究

《咳喘宁对支气管哮喘大鼠免疫调节机制的研究》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在学术论文-天天文库。

1、英文缩写英文缩略语英文全称EOSeosinophilIFN．Yinterferon—YIL．4interleukin一4IL一5interleukin．5NF。kBnucleartranscriptionfator-kBN0NitricOxideETlEndothelinELISAEnzymelinkedimmunosorbentassayTerminal．deoxynucleotidyltransferaseTUNELmemed—iated。ni‘c‘kend‘。la‘bellin，gRT．PCR1小Ⅲ一a0FRiNOSPAF中文全称嗜酸性粒细胞Y．干扰素白细胞介素．4白细胞

2、介素．5核转录因子kB一氧化氮内皮素．1酶联免疫吸附试验细胞凋亡原位检测ReVersetrall8。ripta8eP。lyme。aSe逆转录酶一聚合酶链反应chainreactionTumornecrosisfactoraoxygenfreeradicalinduciblenitricoxidesynthase肿瘤坏死因子a氧自由基一氧化氮合成酶Plateletactivatingfactor血小板活化因子granulocytmacrophagecolonyGM-CSFstl-mu·lat·m—gf—actor粒细胞巨噬细胞集落刺激因子ICAM．1intercellularad

3、hesionmolecule细胞间粘附分子PDGFplatelet—derivedgrowthfactorTGF一13transforminggrowthfactor13血小板衍生生长因子转化生长因子B22中文摘要咳喘宁对支气管哮喘大鼠免疫调节机制的研究摘要目的：在建立支气管哮喘大鼠模型基础上，通过动物实验，探讨咳喘宁对哮喘大鼠免疫调节的作用及其机制，为治疗支气管哮喘临床用药提供实验依据。方法第一部分：咳喘宁对支气管哮喘大鼠Thl／Th2细胞因子的调节作用及病理形态学的影响清洁级SD大鼠40只，雌雄各半，体重180．2009。动物随机分为5组，即正常组、模型组、咳喘宁高剂量组(

4、简称高剂量组)、咳喘宁低剂量组(简称低剂量组)、桂龙咳喘宁对照组(简称桂龙咳喘宁组)，每组8只。各治疗组均从第1次哮喘激发开始(造模第3周)至处死前每天灌胃给药，连续4周，剂量分别为：高剂量组279／Kg，低剂量组13．59／Kg，桂龙咳喘宁组0．41g／Kg，正常组、模型组予O．5％的羧甲基纤维素钠液灌胃，一日一次。参考文献，除正常组外，于实验第l天和第8天各组大鼠腹腔内注射10％卵蛋白、氢氧化铝混合液Iml，腰部两侧各取l点，每点皮下注射o．5ml，共计2ml，使大鼠致敏。第15天起用3％卵蛋白50ml喷雾激发大鼠哮喘发作，雾化流量为5ml／min，每次20min，隔日一次

5、，共激发4周。以大鼠出现呼吸加快、口唇发绀、腹肌痉挛、点头呼吸及站立不稳等表现为激发成功。正常对照组以生理盐水代替卵蛋白进行腹腔注射及雾化吸入。病理组织学观察：动物麻醉完全后，开胸迅速结扎右主支气管，取右肺中叶4％多聚甲醛固定，脱水、包埋、切片，苏木精。伊红HE染色，镜下观察病理学改变，采用NYDl000型计算机图象处理软件。IL一4和IFN-g水平的检测：动物麻醉完全后，开胸迅速结扎右主支气管，取右肺上叶，称重后移入玻璃匀浆管中，加入2倍肺组织重量的生理盐水，充分研碎，使组织匀浆化。制各好的匀浆，3500r／min离心10min，提取上清液分装。采用双抗体夹心ABC—ELIS

6、A法测定IL．4和IFN—Y水中文摘要平。用抗IL．4(IFN．y)单克隆抗体包被酶标板，PBS洗板4次；用I％BSA(牛血清白蛋白)加入酶标板(200ul／孔)，40C过夜；然后分别加入标本及不同浓度的标准品(100lal／孔)，室温孵育120rain，形成免疫复合物连接在板上，PBS洗板4次；加入辣根过氧化物酶标记的抗IL．4单克隆抗体(100u1／-K)，室温孵育60rain，PBS洗板4次；加显色剂OPD底物溶液，避光室温10—30rain，出现黄色；加终止液硫酸，混匀，5rain内颜色变深；用酶标仪在490nm处测吸光度OD值，绘制标本曲线，查出标本浓度。数据采用均数

7、士标准差(i士s)表示，用SPSSforWindows11．5统计软件处理，多组比较采用单因素方差分析，然后用Student-Newman．KeulsTest进行每两组间比较，显著性差异水平以0．05和0．Ol为标准。第二部分：咳喘宁对支气管哮喘大鼠炎性介质NO和ET-1的影响动物分组、模型建立、用药情况以及数据统计方法同前。病理组织学观察：动物麻醉完全后，开胸迅速结扎右主支气管，取右肺中叶4％多聚甲醛固定，脱水、包埋、切片，苏木精．伊红HE染色，镜下观察病理学改变。并参照文献测量大鼠气道壁