螺旋藻的分离筛选和养殖条件的选择与与外源菌互生共培研究论文

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时间:2019-02-02

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1、螺旋藻的分离筛选和养殖条件的选择及与外源菌互生共培的研究摘要采用选择性Zarrouk无机培养基从北海螺旋藻养殖场水样中富集和稀释平板分离出9株螺旋藻,经对其生长测定,从中筛选出一株生长较快、藻体粗壮的螺旋藻藻种(暂编号SP06),通过对其形态学观察、分子生物学鉴定、培养基优化和最佳生长条件的选择试验,结果表明:该藻螺旋状,细胞为短圆柱形,藻体长50--一600gm,径宽30----70gm,螺旋数3~10;在配方为NaHC0316.8g/L,KH2P040.4g/L,NaN032.7g/L,NaCl1.0g

2、/L,FeS040.005g/L,MgS04O.1gm,K2S041.0g/L,CaCl2O.04g/L液体培养基中,起始pH8~10,光照强度4000lx,30。C/25℃昼/夜变温条件下生长良好,培养8d每升养殖水可收获湿藻48g;经对其进一步进行16SrDNA测序分析,该螺旋藻筛选株SP06与蓝藻门、颤藻目、颤藻科、螺旋藻属中的钝顶螺旋藻相似。目前普遍采用各种益生菌制成生态菌制剂,应用于工业、农业及水产养殖业等方面,为了了解外源益生菌对螺旋藻生长的影响,本研究选择实验室保存的枯草芽孢杆菌、巨大芽孢杆菌

3、、蕈状芽孢杆菌和光合细菌等4种已知益生菌与螺旋藻筛选株SP06共培养,经试验,从中选出一株对螺旋藻生长有较大促进作用的光合细菌PSB04作为培藻的外源益生菌;在所选最适合条件下接入外源菌及利用养殖液连续培藻试验,结果表明:在养殖水中接入1%外源菌PSB04菌液与螺旋藻共培养,分批补料,分批培藻,连续养殖48d,收获藻体3次,藻体收获率比对照提高32.72%。关键词:螺旋藻,分离,培养基优化,条件选择,外源菌藻共培养,连续培藻STUDIESONISOLATIONANDSELECTl0N0F‘S『P侬UUrⅣr

4、AANDSELECTl0NOFTHECU【JURECONDITIONANDTHESYMBIOTICCUIJUREⅥ厂ITHINOCULATINGMICROBESABSTRACTInthispaper,spirulinasamplesfromBeihaiwereenrichedbyusingZarroukinorganicculturemediumandninestrainswereisolatedbydilutionplates.Onestrain(numberedSP06)withrapidgrowths

5、peedwasobtainedbytestingtheirgrowthconditions.Byobservingit’Smorphology,testingthebestgrowingfactors,identificationofmolecularbiologyandoptimizatingcultures.Theresultsare:thealgaishelixical,cylindricalcell,thelengthofthealgaeis50~600gmandthediameteroftheal

6、gaeis30"--70“m.helixicalnumberis3~10.ItgrowswellinfluidculturemediumwhichingredientsareNaHC0316.8g/L,KH2P040.49/L,NaN032.79/L,NaCl1.09/L,FeS040.005g/L,MgS04O.1g/L,K25041.09/L,CaCl20.049/L;lightintensityis4000Ix;thetemperatureis30。C/25。Catdayandnight.Aftere

7、ightdays,wewillget48gramwetalgaeperliter.Its16srDNAsequenceishighlysimilarwithSpirulinapIatenses(phylum:cyanophyta;order:oscillatoriales;family:oscillatoriaceae,genus:spirulina).Atpresent,lotsofecologicalagentsmadefromprobioticshadgenerallyusedinindusUy’ag

8、ricultureandaquaculture,etc.Toinvestigatetheaffectionofforeign.IⅡ.probioticsadditioninspirulinaculture,fourkindsofwhichbelongedtoBacillussubtilis,Bacillusmegatherium,Bacillusmycoides,andPhotosyntheticBacteria

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