cik杀伤胃癌的mhc限制性与非mhc限制性作用分析

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1、CIK杀伤胃癌的MHC限制性与非MHC限制性作用分析摘要目的：研究MHC限制性与非MHC限制性杀伤在细胞因子诱导的杀伤细胞(CIK)体外杀伤胃癌(SGC．7901)细胞中所起的作用。方法：从正常人外周血单个核细胞诱导树突状细胞(DC)、CIK细胞，用人胃癌细胞SGC一7901提取肿瘤抗原致敏DC，DC诱导CIK生成DC诱导CIK细胞(DC．CⅨ)和经胃癌抗原致敏的DC诱导CIK细胞(抗原．DC．CIK)。培养的第14天，用流式细胞仪检测CIK、DC．CIK、抗原．DC．CIK细胞表型CD3、CD3／CD8和CD3／CD56。以CIK、DC—CIK和抗原．DC-CIK

2、为效应细胞，以未经MHC分子阻断的SGC．7901细胞和经MHC分子阻断的SGC．7901细胞为靶细胞，用M丌法检测杀伤效应。结果：①培养的第14天，抗原致敏的DC诱导CIK中CD3+CD56+和CD3+CD8+双阳性细胞的比例较DC．CIK和单独培养CIK明显增高(P均％(P均

3、．5)％、(50．4±1．1)％。抗原．IX3．CIK中MHC限制性杀伤占总杀伤效力的比例明显高于DC-CIK和CIK。结论：CIK杀伤胃癌细胞以非特异性杀伤为主，MHC限制性杀伤仅占总杀伤效力的4．9％：未致敏的DC诱导CIK后，总杀伤效力增强，以非特异性杀伤为主，MHC限制性杀伤效力增加不明显，占总杀伤效力的5．1％：抗原致敏的DC诱导CIK后，杀伤仍以非特异性杀伤为主，特异性杀伤效力大幅度增加，占总杀伤效力的30．5％。硕士研究生李辉(外科学)指导教师毛伟征教授关键词：胃肿瘤；细胞因子诱导的杀伤细胞；树突状细胞；IIHC限制性；抗原AnalysetheMHCr

4、estrictedandnon-MHCrestrictedkillingactivityintheeffectofcytokine—inducedkillercellsagainstgastriccancerAbstractObjective：ToinvestigateMHCrestrictedandnon·MHCrestrictedkillingactivityintheroleofcytokineinducedkillercells(CIK)againstgastriccancer(SGC-7901)invitro．Methods：Peripheralblood

5、mononuclearcells(PBMC)fromhealthydonorswereinducedtobecomedendriccells(DC)andCIK,USetumorantigenextractedfromgastriccancerSGC-7901cellstosensitizeDC，I)CinducesciktobecomeCIKinducedbyDC(DC—CIK)andCIKinducedbygastriccancerantigen-pulsedDC(antigen-DC-CⅨ)．Onthe14thdayofculture，CIK，I)C-CIKa

6、ndantigen-DC—CIKcellphenotypesCD3，CD3／CD8andCD3／CD56wareanalyzedbyflowcytometry．TakeCIK，DC-CIKandantigen-DC—CIKastheeffectorcells，taketheSGC·7901cellswhichhaveornothavetheMHCmoleculeblockedasthetargetcells．ThecytotoxicactivityWasdetectedbyMTT．Results：Onthe14thdayofculture,theproportion

7、ofCD3+CD8+andCD3+CD56+doublepositivecellsinantigen·DC·CIKwaresignificantlyhigherthanthatinDC-CIKandpureCIK(P<0．01)．At20：1effector-targetratioinvitro，thecytotoxicabilityofCIKgroup，DC—CIKgroupandantigen-DC-CIKgroupagainstSGC-7901Was(46．64-1．3)％，(52．6i0．9)％and(72．5士1．2)％(P