结合珠蛋白基因多态性与中国人冠心病的关联研究

《结合珠蛋白基因多态性与中国人冠心病的关联研究》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在学术论文-天天文库。

1、浙江大学硕士学位论文结合珠蛋白基因多态性与中国人冠心病的关联研究浙江大学医学院内科学(心血管病)硕士研究生刘海波导师施育平中文摘要背景冠心病(Coronaryheartdisease，CHD)是严重危害人体健康、影响生活质量的常见病。遗传流行病学研究显示，冠心病的发病与遗传因素密切相关，且与机体内氧化应激、炎症反应增强和内环境不稳定密切相关。结合珠蛋白(Haptoglobin，Hp)又称触珠蛋白，是一种酸性糖蛋白，属急性期反应蛋白之一，研究表明Hp具有抗氧化活性，有抑制前列腺素合成、促进血管生成及调节机体免疫等功能。结合珠蛋白广

2、泛存在于人类和许多哺乳动物的血清及其他体液中，其主要功能是通过与游离血红蛋白(heamoglobinJnb)结合形成Hp2I-lb复合物，并很快被单核一巨噬细胞系统介导的清道夫受体CDl63清除掉，防止了血红蛋白对组织的氧化损伤，同时也阻止了血红蛋白从肾小球滤过，避免了游离血红蛋白对肾小管的损害。人类Hp基因位于染色体16q22．1，存在两个等位基因的多态性Hpl与Hp2，可以形成常见的三种基因型Hpl—I，Hp2一l和Hp2—2．Hp2等位基因包含一个长1．7kb的基因内重复序列而Hpl没有，Hp2等位基因看上去似乎是由两条H

3、pl—q链等位基因独特的非同源重组形成。这样可以根据Hp不同基因型的结构差异来设计相应的引物进行扩增而对特定人群Hp基因进行分型。Asleh等人通过用放射线标记的Hp与CDl63在细胞株中转染之后在巨噬浙江大学硕士学位论文细胞中表达内源性CDl63发现，CDl63清除Hpl一卜Hb的能力要显著强于Hp2-2一lib，而清除Hp2一卜llb的能力居中。此外，结合珠蛋白作为一种急性期蛋白，在参与宿主抗感染、损伤组织的修复以及内环境稳定的过程中起着重要作用，其血清含量在感染、创伤、炎症、肿瘤、心肌梗死等病理状态时显著升高。除以上的功能

4、外，Hp尚有抑制前列腺素合成、抑制细菌、促进血管生成及重要的免疫作用，Hp以上抗氧化、抗炎、对损伤组织的修复及促进血管生成等生理功能均与抑制冠心病的发生发展密切相关。由于Hp具有遗传多态现象，而且不同的基因型具有不同的结构及生理功能，近年来，研究Hp基因多态性与冠心病的发生发展已成为一个新的重要课题。有研究表明lip2—2基因型与冠心病的发生密切相关，尤其是在阻塞性睡眠呼吸暂停综合征和糖尿病患者等高危人群中，同样也研究发现Hp2—2基因型是冠心病转归与预后的不利因素。基于Hp基因可通过影响机体内氧化及炎症反应，可能参与了动脉粥样

5、硬化的进程，而且不同的种族和地域Hp基因多态性可能存在一定的差异，目前国内尚无有关Hp基因多态性与冠心病相关性研究的报道，因此对中国汉族人中该基因多态性和冠心病的相关性的探讨是可行和值得的。目的本研究通过检测浙江地区中国汉族人Hp基因多态性频率，以探讨Hp基因多态性与冠心病发生发展的关系。对象与方法一、研究对象冠心病组：冠心病患者189例，均选自2005年3月至2005年12月浙江大学医学院附属第二医院心内科病房住院病人，符合世界卫生组织(WHO)关于缺血性心脏病的命名及诊断标准，所有患者经冠状动脉造影证实。其中男性149例，女

6、性40例，平均年龄63．14±10．38岁。对照组：对照组242例，均选自同期浙江大学医学院附属第二医院心内科病房住院病人，所有入选者经冠状动脉造影检测完全正常。其中男性175例，女性67例，平均年龄61．56±10．44岁。本研究人群个体之间无血缘关系。2浙江大学硕士学位论文二、冠心病的诊断冠状动脉造影时，分别对右冠状动脉、左冠状动脉前降支、左旋支和左，主干狭窄病变程度进行评价。各主要分支存在>50％狭窄定义为有意义病变，诊断为冠心病。三、冠心病危险因子调查设计冠状动脉粥样硬化登记调查表，详细记录每一患者的临床表现，辅助检查，

7、化验检查结果，危险因素及冠心病家族史。冠心病经典危险因子按下述标准定义：1．高脂血症采用2006年血脂异常防治指南，为血清总胆固醇(TC)i>200mg／dl或／和甘油三酯(TG)≥150rag／all或／和低密度脂蛋白胆固醇(LDL-c)≥120mg／dl和／或高密度脂蛋白胆固醇(HDL-c)≤40mg／dl。2．高血压采用1999年世界卫生组织和国际高血压学会(删O／IsH)的标准定义和诊断。3．糖尿病符合1997年美国糖尿病学会(ADA)糖尿病诊断标准。4．吸烟指目前吸烟和既往吸烟已经戒烟者。四、基因组DNA抽提和Hp基因

8、多态性检测1．白细胞基因组DNA抽提：以酚／氯仿法提取外周血白细胞DNA。2．Hp基因多态性检测：参考WernerKoch的PCR实验方法，分别用引物Pl和P2扩增Hpl特异片段，引物P3和P4扩增Hp2特异片段。上游引物P1：5’书cTGTCACTGcTGcG