SNT2661-2010-进出口动物源性食品中阿维菌素残留量的检测方法酶联免疫吸附法.pdf

《SNT2661-2010-进出口动物源性食品中阿维菌素残留量的检测方法酶联免疫吸附法.pdf》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在行业资料-天天文库。

1、版权所有·禁止翻制、电子发售中华人民共和国出入境检验检疫行业标准!"!#!""#"!$#$进出口动物源性食品中阿维菌素残留量的检测方法!酶联免疫吸附法$%&%'()*+&),*,-+.%'(%/&)*'%0)12%0)*-,,10&2--0,-+*)(+3,')4)*-,')(5,'&+*1%65,'&"7*89(%3)*:%1)((2*,0,';%*&+00+9!$#$<##<$#发布!$##<$%<$#实施中华人民共和国发布国家质量监督检验检疫总局版权所有·禁止翻制、电子发售中华人民共和国出入境检验检疫行业标准进出口动物源性食品中阿维菌素残

2、留量的检测方法酶联免疫吸附法ＳＮ／Ｔ２６６１—２０１０中国标准出版社出版北京复兴门外三里河北街１６号邮政编码：１０００４５网址ｗｗｗ．ｓｐｃ．ｎｅｔ．ｃｎ电话：６８５２３９４６６８５１７５４８中国标准出版社秦皇岛印刷厂印刷开本８８０×１２３０１／１６印张１．２５字数２９千字２０１１年４月第一版２０１１年４月第一次印刷印数１—１６００书号：１５５０６６·２２１８３７定价２１．００元犛犖／犜２６６１—２０１０版权所有·禁止翻制、电子发售前言本标准按照ＧＢ／Ｔ１．１—２００９给出的规则起草。本标准由国家认证认可监督管理委员会提出并归口。本标准

3、起草单位：中华人民共和国天津出入境检验检疫局、中华人民共和国安徽出入境检验检疫局。本标准主要起草人：郑文杰、刘伟、赵卫东、贺艳、刘?、张海滨、朱梦栩、蔡国瑞、万宇平、汪善良、陈炜琳、王硕。Ⅰ犛犖／犜２６６１—２０１０版权所有·禁止翻制、电子发售进出口动物源性食品中阿维菌素残留量的检测方法酶联免疫吸附法１范围本标准规定了动物源性食品中阿维菌素药物残留量的酶联免疫吸附测定方法。本标准适用于猪肉、牛肉、鸡肉、羊肉等肉制品、鱼和虾等水产品中阿维菌素残留量的筛选检测。２方法提要高脂肪样品采用过柱法。其方法提要简述如下：用乙腈提取样品中阿维菌素，无水硫酸钠

4、去除提取液中水分，离心后取乙腈相过氧化铝柱，洗脱液氮气吹干后，复溶于复溶工作液，用间接竞争性酶联免疫法进行检测。低脂肪样品采用非过柱法，除提取液不过氧化铝柱以外，其他步骤与过柱法一致。３试剂和材料除另有要求外，所有试剂均为分析纯，水为二次蒸馏水。３．１甲醇。３．２乙腈。３．３正己烷。３．４无水硫酸钠。３．５碱性氧化铝柱ｓｅｐｐａｒｋｖａｃ１２ｃｃ（２ｇ）或相当者。３．６阿维菌素酶联免疫试剂盒（参见附录Ａ）。４仪器和设备４．１均质器。４．２离心机。４．３旋涡混匀器。４．４酶标仪。４．５氮吹仪。４．６温育培养箱。４．７单道微量加样器：５０μＬ，１

5、００μＬ，２０μＬ～２００μＬ可调，２００μＬ～１０００μＬ可调。４．８多通道微量加样器：５０μＬ～２５０μＬ可调。５样品制备与保存从全部原始样品取出有代表性样品约５００ｇ，用组织捣碎机充分捣碎均匀，均分成两份，分别装入洁净容器作为试样，密封，并标明标记。在制样的操作过程中，应防止样品污染或发生残留物含量的变化。将试样存放于－１８℃冰箱中保存。１犛犖／犜２６６１—２０１０版权所有·禁止翻制、电子发售６测定步骤６．１提取６．１．１高脂肪样品（如鳗鱼等）———过柱法用均质器均质组织样本，称取３ｇ（精确至０．１ｇ）均质后的样品，置５０ｍＬ聚苯乙烯离心

6、管中，加入９ｍＬ乙腈、３ｍＬ正己烷，涡旋混匀１０ｍｉｎ。加入３ｇ无水硫酸钠，涡旋混匀１０ｍｉｎ后，１５℃４０００ｒ／ｍｉｎ离心１０ｍｉｎ。去除上层正己烷，取下层４ｍＬ提取液备用。取碱性氧化铝ｓｅｐｐａｒｋｖａｃ１２ｃｃ（２ｇ）柱，称取３ｇ无水硫酸钠平铺在滤板上，加入１０ｍＬ乙腈洗柱。加入４ｍＬ下层提取液，开始收集滤液，待提取液流干后，再加入４ｍＬ乙腈清洗柱子，合并洗液和滤液至５０ｍＬ聚苯乙烯离心管中，于５０℃～６０℃水浴氮气流下吹干。取１ｍＬ稀释后复溶工作液（见６．２．１）溶解残渣，用旋涡混匀器涡旋混匀１ｍｉｎ，超声波溶解１０ｍｉｎ，再涡动１

7、ｍｉｎ。取出１００溶解后的样品液，加入１００稀释后复溶工作液μＬμＬ（见６．２．１），涡旋混匀３０ｓ充分混合，取２０用于测定。μＬ６．１．２低脂肪样品（如虾、肌肉等）———非过柱法用均质器均质组织样本，称取３ｇ（精确到０．１ｇ）均质物至５０ｍＬ聚苯乙烯离心管中，加入９ｍＬ乙腈、３ｍＬ正己烷，涡旋混匀１０ｍｉｎ。１５℃４０００ｒ／ｍｉｎ离心１０ｍｉｎ。直接吸取下层液１ｍＬ至１０ｍＬ干净的玻璃试管中，于５０℃～６０℃水浴氮气流下吹干。取１ｍＬ复溶工作液溶解干燥的残留物，用旋涡混合器涡旋混匀１ｍｉｎ，超声波溶解１０ｍｉｎ，再涡旋混匀１ｍｉｎ。取出１０

8、０溶解后的样品液，加入μＬ１００μＬ稀释后复溶工作液（见６．２．１），涡旋混匀３０ｓ充分混合，取２０μＬ用于测定。６．２酶联免疫法检测６．２．１试剂的