mafbx%2fatrogin-1和murf1在大鼠肌肉游离移植模型中的表达和意义

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1、第二军医大学缩写对照博士学位论文一l一第二军医大学缩写对照博士学位论文缩写对照表(续)英文缩写英文全称中文全称MMPsMatrixMetalloProteinases金属基质蛋白酶mRNAmessengerribonucleicacidmTORthemmmaliautargetofrapamycinMuRFIMuscleRING(reallyin)finger1nAChRn-acetyk:holinereceptorODopticaldensityPA7∞ProteasomeActivator700PAGEpoly

2、acrylamidegelelec仃ophoresisPCRpolymerasechaillreactionPBSphosphatebufferedsalineP13Kphosphatidylinositol-3-kinasePKBproteinkinaseBRNARibonucleicAcidRT-PCRReal—timePCRSDSSodiumdodecylsulfateTEMEDtetramethyl-ethylenediamlneTBS蜀fjsbuffersaline。rPPIITripeptidylPep

3、tidaseIITRIStris(hydroxymethyl)aminomethaneUbUbiquitin信使核糖核酸哺乳类雷帕霉素靶蛋白肌肉环状指基因1N乙酰胆碱受体光密度蛋白酶体激活因子700聚丙烯酰胺凝胶电泳聚合酶链反应磷酸盐缓冲生理盐水磷酸肌醇3激酶蛋白激酶B核糖核酸实时定量PCR十二烷基磺酸钠四甲基乙二胺Tris缓冲生理盐水三肽基肽酶Ⅱ三羟甲基氨基甲烷泛素UPPofUPSUbiquirinProteasomePathwayorSystem泛素一蛋白酶体途径.2.独创性声明本人声明所里交的学位论文是我个人

4、在导师指导下进行的研究工作。除了文中特别加以标注和致谢的地方外,论文中不包含其他人已经发表或撰写过的研究成果。与我一同工作的同志对本研究所傲的任何贡献均已在论文中作了明确的说明并表示谢意。本人承担本声明的法律责任。⋯⋯躲印旃蝴期学位论文使用授权书声明年3-月易口Et本人完全了解第二军医大学有关保留、使用学位论文的规定,有权保留并向国家有关部门或机构送交论文的复印件和磁盘,允许论文被查阅和借阅。本人授权第二军医大学可以将学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索,可以采用影印、缩印或扫描等复制手段保存、汇编学位论

5、文。(保密的学位论文在解密后适用本授权书)学位论文作者签名:别多f导师签名:签字日期—夕年了月弓。日签字日期:≯哕/夕第二军医大学简明摘要博士学位论文论文扉页简明摘要吻合血管神经的游离肌肉移植已广泛应用重建运动功能,而术后移植肌肉的萎缩严重影响了治疗效果。肌肉萎缩主要是因为蛋白代谢失衡,即分解增强合成减弱引起的,这与肌肉内的泛素一蛋白酶体系统密切相关。而最近发现的泛素蛋白连接酶MAFbx/Atrogin.1和MuRFl又是其中的关键环节。我们建立了大鼠股薄肌原位游离移植的模型,并在术后不同时间端观测了肌肉萎缩的相关

6、指标(肌肉湿重维持率、肌纤维横截面积等)、肌肉的收缩功能以及术后不同时段肌肉内MAFbx/Atrogin-1和MuRFl的mRNA和蛋白表达水平,并探讨了其与肌肉萎缩的相关性。结果发现:(1)所构建的吻合血管神经的大鼠股薄肌游离移植动物模型符合研究需要,肌肉移植后肌湿重维持率和肌细胞横截面积先呈现典型肌萎缩后表现,后随神经的再支配,萎缩逐渐好转,但至术后30周时仍未恢复到术前对照组水平;(2)用SYBR@Green实时定量PCR法检测到的肌肉移植后MAFbx,/Atrogin-1和MuRFl基因的表达变化,与肌肉游

7、离移植后的萎缩及功能降低有密切关系;(3)MAFbx/Atrogin-1的蛋白与mRNA表达具有较好的一致性,与肌萎缩存在明显的反向关系。其在术后的持续高水平表达高,是蛋白分解增强、肌内蛋白含量减少的决定因素。(4)IGFl可能是调节移植后MAFbx/Atrogin.1和MuRFlmRNA表达变化的因素之一。总之,MAFbx/atrogin·1和MuRFl不仅可以作为骨骼肌萎缩早期的标记物,在肌肉相关疾患的诊断中起辅助作用,而且是联系肌肉萎缩与肌肉功能降低之间的桥梁和纽带,可以作为药物干预的潜在靶点。【关键词】肌肉

8、移植;肌肉萎缩;功能恢复;动物实验;肌肉湿重;肌纤维横截面积;实时定量PCR:蛋白定量第二军医大学中文摘要博士学位论文MAFb列Atrogin-1和MuRFl在吻合血管神经的大鼠游离移植股薄肌内的表达及意义博士研究生:刘安堂博士生导师:江华教授(主任医师)第二军医大学长征医院整形外科,上海200003摘要【研究背景】吻合血管神经的游离肌肉移植己广泛应用重建运

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