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1、免费标准网(www.freebz.net)标准最全面版权所有·禁止翻制、电子传阅、发售中华人民共和国出入境检验检疫行业标准犛犖/犜2177—2008危险品哺乳动物骨髓细胞染色体畸变试验方法犜犲狊狋犿犲狋犺狅犱狅犳犻狀狏犻狏狅犿犪犿犿犪犾犻犪狀犫狅狀犲犿犪狉狉狅狑犮犺狉狅犿狅狊狅犿犲犪犫犲狉狉犪狋犻狅狀犳狅狉犱犪狀犵犲狉狅狌狊犵狅狅犱狊20080904发布20090316实施中华人民共和国发布国家质量监督检验检疫总局免费标准网(www.freebz.net)无需注册即可下载免费标准网(www.freebz.net)标准最全面版权所有·禁止翻制、电子传阅、发售犛犖
2、/犜2177—2008前言本标准修改采用联合国经济合作与发展组织(OECD)化学品测试方法No.475《哺乳动物骨髓染色体畸变试验》(1997)。本标准与OECD化学品测试方法No.475相比,存在以下差异:———对OECD化学品测试方法No.475进行了编辑性修改;———增加了前言部分;———增加了定义部分;———删掉了试验报告部分。本标准由中华人民共和国国家质量监督检验检疫总局提出。本标准由国家认证认可监督管理委员会归口。本标准负责起草单位:中华人民共和国天津出入境检验检疫局。本标准参加起草单位:中化化工标准化研究所。本标准主要起草人:张园、赵好力宝、于智睿、赵琢
3、、熊中强、李学洋。本标准系首次发布的出入境检验检疫行业标准。Ⅰ免费标准网(www.freebz.net)无需注册即可下载免费标准网(www.freebz.net)标准最全面版权所有·禁止翻制、电子传阅、发售犛犖/犜2177—2008危险品哺乳动物骨髓细胞染色体畸变试验方法1范围本标准规定了体内哺乳动物骨髓染色体畸变试验的术语和定义、试剂和仪器、试验方法、试验结果及结果评价。本标准适用于检测化学品对骨髓细胞的致突变性。2规范性引用文件下列文件中的条款通过本标准的引用而成为本标准的条款。凡是注日期的引用文件,其随后所有的修改单(不包括勘误的内容)或修订版均不适用于本标准,
4、然而,鼓励根据本标准达成协议的各方研究是否可使用这些文件的最新版本。凡是不注日期的引用文件,其最新版本适用于本标准。GB14924.1实验动物配合饲料通用质量标准GB14925实验动物环境及设施卫生部《消毒技术规范》3术语和定义下列术语和定义适用于本标准。3.1染色单体型畸变犮犺狉狅犿犪狋犻犱狋狔狆犲犪犫犲狉狉犪狋犻狅狀染色体结构损伤,表现为染色单体断裂或染色单体断裂重组的损伤。3.2染色体型畸变犮犺狉狅犿狅狊狅犿犲狋狔狆犲犪犫犲狉狉犪狋犻狅狀染色体结构损伤,表现为在两个染色单体的相同位点均出现断裂或断裂重组的改变。3.3核内复制犲狀犱狅狉犲犱狌狆犾犻犮犪狋犻狅狀
5、在DNA复制的S期之后,细胞核未进行有丝分裂就开始了另一个S期的过程。其结果是染色体有4,8,16……倍的染色质。3.4裂隙犵犪狆染色体或染色单体损伤的长度小于一个染色单体的宽度,为染色单体的最小的错误排列。3.5染色体数目畸变犮犺狉狅犿狅狊狅犿犪犾狀狌犿犲狉犻犮犪犾犪犫犲狉狉犪狋犻狅狀染色体数目发生改变,不同于正常核型。3.6多倍体狆狅犾狔狆犾狅犻犱狔哺乳动物染色体数目正常是二倍体,在化学诱变剂的作用下,染色体数目成倍地增加成三倍体、四倍体等。1免费标准网(www.freebz.net)无需注册即可下载免费标准网(www.freebz.net)标准最全面版权所有·禁
6、止翻制、电子传阅、发售犛犖/犜2177—20083.7染色体结构的畸变犮犺狉狅犿狅狊狅犿犪犾狊狋狉狌犮狋狌狉犲犪犫犲狉狉犪狋犻狅狀通过显微镜可以直接观察到的发生在细胞有丝分裂中期的染色体的结构变化。如染色体中间缺失和断片,染色体互换和内交换等。3.8最高剂量犺犻犵犺犲狊狋犱狅狊犲产生毒性体征的剂量,更高剂量将引发试验动物死亡。4试剂和仪器4.1试剂———0.1%秋水仙碱;———0.9%氯化钠溶液;———0.075mol/L氯化钾溶液;———固定液:甲醇与冰乙酸以3∶1混合,临用时现配;———姬姆萨(Giemsa)染液、姬姆萨应用液,配制方法见《消毒技术规范》;———磷
7、酸盐缓冲液(pH7.4),配制方法见《消毒技术规范》。4.2仪器和器材实验室常用设备、生物显微镜、恒温水浴箱37℃±5℃、离心机、解剖剪、镊子、注射器、灌胃针头、离心管、吸管、滴管、试管架、载玻片、塑料吸瓶、干净纱布、滤纸等。5试验方法5.1试验动物成年小鼠(体重25g~30g),或大鼠(体重180g~220g)。每个剂量组每个性别动物不少于5只。试验动物饲养条件应符合GB14924.1和GB14925有关规定。5.2剂量分组应进行预试验以选择最高剂量,为避免出现假阴性结果应适当增大剂量范围。如果受试样品具有毒性,应在第一个采样时间点设三个剂量,设置
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