SNT2131.2-2010-进出口贝类腹泻性贝类毒素检测方法第2部分小鼠生物法.pdf

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1、中华人民共和国出入境检验检疫行业标准犛犖/犜2131.2—2010代替SN0294—1993进出口贝类腹泻性贝类毒素检验方法第2部分:小鼠生物法犇犲狋犲狉犿犻狀犪狋犻狅狀狅犳犱犻犪狉狉犺犲狋犻犮狊犺犲犾犾犳犻狊犺狆狅犻狊狅狀狊犻狀狊犺犲犾犾犳犻狊犺犳狅狉犻犿狆狅狉狋犪狀犱犲狓狆狅狉狋—犘犪狉狋2:犕狅狌狊犲犫犻狅犾狅犵狔犿犲狋犺狅犱20100110发布20100716实施中华人民共和国发布国家质量监督检验检疫总局犛犖/犜2131.2—2010前言SN/T2131《进出口贝类食品中腹泻性贝类毒素检验方法》共分为两部分:———第1部分

2、:荧光磷酸酶抑制法;———第2部分:小鼠生物法。本部分为SN/T2131的第2部分。本部分代替SN0294—1993《出口贝类腹泻性贝类毒素检验方法》。本部分与SN0294—1993相比,主要变化如下:———将原标准名称修订为《贝类中腹泻性贝类毒素检验方法第2部分:小鼠生物法》;———将范围进行了简化和修改;———增加了术语和定义;———试剂和材料中增加了1%吐温60生理盐水的具体配制方法;———在结果计算和表述中,增加了报告表述方式;———增加了健康和安全的提示条款。本部分由国家认证认可监督管理委员会提出并归口。本部分起草单位:中华人

3、民共和国辽宁出入境检验检疫局、中华人民共和国云南出入境检验检疫局、中华人民共和国山东出入境检验检疫局。本部分主要起草人:曹际娟、王秋艳、郑秋月、徐杨、王刚、于兵、郑惠芳、赵昕、吴振兴。本部分所代替标准历次版本发布情况为:———SN0294—1993。Ⅰ标准分享网www.bzfxw.com免费下载犛犖/犜2131.2—2010进出口贝类腹泻性贝类毒素检验方法第2部分:小鼠生物法1范围SN/T2131的本部分规定了贝类及其制品中腹泻性贝类毒素的小鼠生物测定方法。本部分适用于贝类及其制品中腹泻性贝类毒素的检验。2规范性引用文件下列文件中的条款通

4、过SN/T2131本部分的引用而成为本部分的条款。凡是注日期的引用文件,其随后所有的修改单(不包括勘误的内容)或修订版均不适用于本部分,然而,鼓励根据本部分达成协议的各方研究是否可使用这些文件的最新版本。凡是不注日期的引用文件,其最新版本适用于本部分。GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法GB14925实验动物环境及设施3术语和定义下列术语和定义适用于SN/T2131的本部分。3.1腹泻性贝类毒素犱犻犪狉狉犺犲狋犻犮狊犺犲犾犾犳犻狊犺狆狅犻狊狅狀狊,犇犛犘化学结构以大田软海绵酸(okadaicacid,简称OA)及其衍生物为代表的,

5、摄食后可产生以腹泻为主要特征的存在于贝类体内的海洋生物毒性物质的总称。3.2鼠单位犿狅狌狊犲狌狀犻狋,犕犝对体重为16g~20g的3只ICR雄性小白鼠腹腔各注射1mL贝类提取液后,使2只或3只小鼠在24h死亡的毒力为1个鼠单位。4试样保存和制备4.1试样保存4.1.1样品要有充分的代表性并尽可能没有个体差异。同时,还要有充分的个数。去壳贝肉、带壳的或罐装的等,均应采取足够的个数并使贝肉达400g以上。4.1.2远离实验室不能及时送检的样品,除了在常温下品质不会发生变化的,应将样品置于合成树脂袋内冷冻送检。如为带壳样品,应按4.2的方法开壳

6、,去除水分后冷冻送检。4.2样品的制备4.2.1生鲜带壳样品的前处理用清水彻底洗净贝类外壳,切断闭壳肌,开壳,用清水淋洗内部去除泥沙及其他外来物,取出贝肉。不应以加热或加药物的方法开壳。注意不要破坏闭壳肌以外的组织,尤其是中肠腺(又称消化盲囊,组织呈暗绿色或褐绿色)。将去壳贝肉放在孔径约2mm的金属筛网上,沥水5min,按4.2.3制备检样。4.2.2冷冻样品的前处理在室温下,使冷冻样品呈半冷冻状态。带壳冷冻样品,按4.2.1方法清洗、开壳、淋洗取肉,此时的1犛犖/犜2131.2—2010贝肉仍呈冷冻状态,除去贝肉外部附着的冰片,轻轻抹去

7、水分后,按4.2.3制备检样;事先已去除水分的冷冻去壳样品,室温缓化后,按4.2.3制备检样。4.2.3制备检样对于可以切取中肠腺的贝类(如:扇贝、贻贝及牡蛎等),称量200g贝肉后,仔细切取全部中肠腺,将中肠腺称量后作为检样备用,注意不要使中肠腺内容物污染制样工具;不便切取中肠腺的贝类样品,称量200g贝肉后,可将全部贝肉细切、混合,作为检样。5测定方法5.1方法提要用丙酮提取贝类中DSP毒素,再转移至乙醚中,经减压蒸干后,再以1%吐温60生理盐水为分散介质,制备DSP1%吐温60生理盐水混悬液,将该混悬液注射入小鼠腹腔,观察小鼠

8、存活情况,计算其毒力。5.2仪器和设备5.2.1旋转蒸发器。5.2.2圆底烧瓶:500mL、250mL、100mL、50mL。5.2.3均质器:转速1000r/min以上。5.2.4布氏漏斗。

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