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1、版权所有·禁止翻制、电子传阅、发售中华人民共和国出入境检验检疫行业标准!"!#!"##"!""$绵羊地方性流产病微量补体结合试验操作规程$%&'&(&)&*+,(%&-(&+.)/+/0'*,12',&0'/3'*&%/04&&',(25&%',&0&*/6/3!""$-%!-!&发布!""'-"$-"%实施中华人民共和国发布国家质量监督检验检疫总局标准分享网www.bzfxw.com提供免费下载版权所有·禁止翻制、电子传阅、发售中华人民共和国出入境检验检疫行!业!标!准绵羊地方性流产病微量补体结合试验操作规程!"!#$%&&"$%%'"中国标准出版社出版北京复兴门外三里河北街(
2、)号邮政编码#(%%%*+网址,,,-./0-123-01电话#)4+$&5*)!)4+('+*4中国标准出版社秦皇岛印刷厂印刷"开本44%6($&%(!()!印张%-'+!字数(+千字$%%4年&月第一版!$%%4年&月第一次印刷印数("$%%%"书号#(++%))$$7(4+%'!定价!-""元版权所有·禁止翻制、电子传阅、发售!"!#!"##"!""$前!!言!!本标准的附录!!附录"为规范性附录"附录#!附录$为资料性附录#本标准由国家认证认可监督管理委员会提出并归口#本标准起草单位$中华人民共和国天津出入境检验检疫局#本标准主要起草人$王玉玲!侯艳梅!姜红!赵祥平!董志
3、珍!霍蕾#本标准系首次发布的出入境检验检疫行业标准#!标准分享网www.bzfxw.com提供免费下载版权所有·禁止翻制、电子传阅、发售!"!#!"##"!""$绵羊地方性流产病微量补体结合试验操作规程%!范围本标准规定了绵羊地方性流产病微量补体结合试验的操作技术要求#本标准适用于绵羊地方性流产病的血清学诊断#!!规范性引用文件下列文件中的条款通过本标准的引用而成为本标准的条款#凡是注日期的引用文件"其随后所有的修改单%不包括勘误的内容&或修订版均不适用于本标准"然而"鼓励根据本标准达成协议的各方研究是否可使用这些文件的最新版本#凡是不注日期的引用文件"其最新版本适用于本标准#%
4、$'&''()!分析实验室用水规格和试验方法%*+,-./0'1'&#!试剂和材料#2%!试剂#2%2%!试验用蒸馏水为%$'&''()中的三级水##2%2!!稀释液$生理盐水##2%2#!补体结合抗原$按说明书使用"使用前充分摇匀##2%2&!阳性对照血清$使用前用蒸馏水溶解至规定容积##2%2'!阴性对照血清$使用前用蒸馏水溶解至规定容积##2%2(!溶血素$使用前用蒸馏水溶解至规定容积##2%2$!补体$使用前用蒸馏水溶解至规定容积##2%2)!绵羊全血$选健康成年绵羊"无菌颈脉采血"32)份阿氏液加3份血"混匀"45冰箱内稳定06"76后使用##2!!材料#2!2%!玻璃
5、试管$3899:;799"圆底"洁净##2!2!!试管架##2!2#!微量移液器##2!2&!可调连续加样器##2!2'!1'孔(<)型微量板##2!2(!1'孔平底%&微量板##2!2$!水平转子离心机##2!2)!=>-.#读板仪##2#!被检血清#2#2%!采血和分离按常规方法采血和分离血清#血清应新鲜"无蛋白絮凝物"无溶血"无腐败气味##2#2!!运送和保存血清防止血清冻结"若06内不能送到实验室"需用冷藏方法运送血清#血清应放至45冰箱内保存#3版权所有·禁止翻制、电子传阅、发售!"!#!"##"!""$&!操作方法&2%!预备试验&2%2%!#$红细胞悬浮液的制备&2
6、%2%2%!绵羊全血充分混匀后"取所需量用稀释液洗三次"每次水平转子离心机)888?'9@*离心79@*"最后一次离心389@*#&2%2%2!!取出3份沉积血泥加入到)4份稀释液中"充分混匀"制成红细胞悬浮液#&2%2%2#!取出)78#>红细胞悬浮液加入到42;79>蒸馏水中"使红细胞充分破解%液体清亮&#&2%2%2&!取出388#>破解后的液体加入到平底微量板孔内"平行加(个孔#&2%2%2'!用=>-.#读板仪748*9下读!"值"算出平均!"值"代入校正红细胞浓度公式*见式%3&+$$:%#AB%!!!!!!!!!!!!!!!!%3&8&337式中$#,,,校正红细胞
7、浓度到0C所需加入的稀释液量-$,,,平均!"值-%,,,红细胞悬浮液量#&2%2%2(!取校正红细胞浓度时所需的稀释液量加入到红细胞悬浮液中即得0C红细胞悬浮液#&2%2!!溶血素效价的测定&2%2!2%!稀释溶血素取82)9>溶血素原液"加入到312(9>稀释液中"制成3D388稀释的溶血素"再按表3稀释成不同稀释滴度的溶血素#表%!溶血素的稀释稀释滴度溶血素量'9>稀释液'9>3D788%3D388溶血素&3284283D3888%3D388溶血素&)283(283D378
