不同来源灵芝子实体特性以与不同灵芝菌种的生长特征差异的分析

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1、THESlSoFMASITER’SDEGREEPekingUniOnMedicalCollege&Academy0fMedicinalScienc嚣1．2灵芝多糖的结构分析灵芝多糖的药理活性的研究，离不开对其结构的分析研究，主要集中在多糖分子量和多糖的组成及单糖的连接方式上。研究方法主要有化学方法、物理方法和生物学方法三种n羽。如利用最常用的化学方法高碘酸氧化法、Smith讲解法以及甲基化法等，可以测定多糖结构中单糖的连接方式，同时还可以利用物理方法如红外吸收光谱法(P)、气相色谱法(GC)、高效液相色谱法(PHLC)等进行确定。由于物理方法中仪器操作简便，在研究中用的较

2、多。生物学方法主要是以酶解为主。随着对多糖结构研究的深入，发现灵芝多糖的结构因其灵芝种类不同而各有差异。灵芝多糖的种类因其存在的部位不同而不同，有子实体多糖、孢子粉多糖、发酵的菌丝体内多糖(胞内多糖)、发酵液中存在于细胞外的多糖(胞外多糖)。虽然灵芝多糖的存在部位不同，但多糖在某些化学结构方面是相似的，差异主要体现在组成种类和比例不同。Qian等n羽用高效液相分析出灵芝多糖由5种单糖和二糖组成，包括木糖、果糖、葡萄糖、蔗糖和麦芽糖，其分子含量比分别是为O．4％：14．4％：12．8％：O．7％：50．9％。Ye等u41用三氟乙酸水解灵芝子实体中的水溶性多糖，由高效液相色谱

3、法测出分子量为12000Da。利用阴离子交换层析确定其单糖成分比例为：葡萄糖：岩藻糖：半乳糖的摩尔比为1．oo：1．09：4．09，同时还含有少量甘露糖。有研究发现，灵芝菌丝体多糖和子实体多糖具有相似的组成、一级结构和相对分子质量，总结灵芝多糖组成成分有葡萄糖、甘露糖、岩藻糖、阿拉伯糖、鼠李糖、半乳糖等，大部分多糖以B一(1—3)糖苷键构成主链，以B一(1—6)及(1—4)糖苷键构成侧链n5】。1．3灵芝多糖的药效作用分析随着对灵芝研究的深入，灵芝的临床应用也越来越多。灵芝多糖作为灵芝的主要活性物质之一，在灵芝的药效作用中发挥着主要作用。大量研究表明，灵芝多糖在免疫调节、

4、抗肿瘤、降血糖、清除自由基和抗衰老等方面有显著作用。1．3．1免疫调节作用灵芝多糖是一种生物免疫调节剂，能增强机体的细胞免疫与体液免疫。其主要通过对淋巴细胞、巨噬细胞、网状内皮系统等免疫细胞的作用来调节机体的免疫功能。作为生物反应调节剂，不仅能够激活T、B淋巴细胞、巨噬细胞等免疫细胞，还能活化补体，促进细胞因子的生成，全面发挥对机体的调节作用n阳。周桂琴等n71的研究结果表明灵芝多糖可以抑制肿瘤生长，其作用机理可能是通过刺激淋巴细胞，影响了TNF—Q、L一2、L—10等因子的分泌，从而增强细胞及体液8THESlSoFMASTER’SDEGREEPekingUnionMed

5、jcalCollege&AcademyofMedicinalSciences免疫。李文娟n81研究灵芝多糖对调节小鼠免疫功能时发现，灵芝多糖可通过增加小鼠的脾脏、胸腺指数，促进T、B细胞增殖，提高血清中IL一2和TNF—Q含量，提高小鼠机体免疫力。程俊文n们研究灵芝多糖提取物对小鼠免疫功能的影响时发现，灵芝多糖增加ConA诱导的小鼠脾淋巴细胞的增殖能力和小鼠左后足跖部厚度差24h测量值，提高小鼠血清溶血素抗体积数和溶血空斑数，表明灵芝多糖提取物胶囊具有较强的免疫调节作用。任玮等咖3的研究也显示，灵芝多糖可提高小鼠的免疫功能，增强NK细胞数量的作用，通过对L一2、L一4和I

6、FN—Y的影响，调节免疫应答。1．3．2抗肿瘤作用大量研究显示，灵芝多糖在肿瘤的预防和治疗中有显著疗效。Chen等瞳¨通过研究灵芝多糖对卵巢癌大鼠模型的血清抗氧化酶活性的影响。发现灵芝多糖能显著减少丙二醛(MDA)的产生和增加血清抗氧化酶的活性，这表明灵芝多糖的抗氧化活性可用于卵巢癌等癌症的治疗。另外，从灵芝孢子中提取出的名为GSG的灵芝多糖是一种溶于水，且为一种有不同连接的分支葡聚糖。它是鼠类的腹膜巨噬细胞中MAPKs(促分裂原活化蛋白激酶)和TNF(肿瘤坏死因子)以及IL(白细胞介素)的一种有效诱导物。并且诱发小鼠体内的GSG可使脾细胞中刀豆球蛋白a诱导发生增殖反一应

7、，还表现出对抗刘易斯肺癌的活性。因此GSG是一种有效的免疫调节剂，很有可能成为癌症的辅助治疗手段位胡。Yue等∞1在比较不同部位灵芝所含多糖活性时，对比了灵芝子实体不同结构中的多糖以及灵芝孢子在患有S一180肉瘤的小鼠体内抗肿瘤和免疫活性。实验结果表明灵芝子实体或菌柄提取物和破壁灵芝孢子比灵芝菌盖提取物对肉瘤的生长有更高的抑制作用。Ma等乜钔通过研究证实了灵芝孢子的多糖提取物能刺激脾单核细胞的增殖和细胞因子的分泌，从而体现其免疫调节活性。崔侨梵乜朝研究灵芝硒多糖的生理活性时发现，SeGLP对小鼠Hca—f肝腹水癌细胞和S180