GBT9695.23-1990-肉与肉制品L(一)-羟脯氨酸含量测定.pdf

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1、中华人民共和国国家标准肉与肉制品羟脯氨酸含量测定本标准等效采用国际标准肉和肉制品中羟脯氨酸含量的测定主题内容与适用范围本标准规定了肉与肉制品中羟脯氨酸含量的测定方法本标准适用于肉与肉制品中羟脯氨酸含量的测定引用标准肉与肉制品取样方法原理试样在氯化亚锡的盐酸溶液中水解释放出羟脯氨酸经氯胺氧化生成含有吡咯环的氧化物用高氯酸破坏过量的氯胺羟脯氨酸氧化物与对二甲氨基苯甲醛反应生成红色化合物在波长处进行比色测定试剂所用试剂均为分析纯水为蒸馏水或同等纯度的水氯化亚锡溶液将氯化亚锡溶于水中再加入浓盐酸盐酸溶液氢氧化钠溶液缓冲液将柠檬酸氢氧化钠

2、和结晶乙酸钠溶于水稀至此溶液与水和正丙醇混合氯胺溶液将氯胺溶于水中依次加入正丙醇和缓冲溶液用时现配显色剂称取对二甲氨基苯甲醛用高氯酸溶解缓慢加入异丙醇羟脯氨酸标准溶液标准储备液称取羟脯氨酸用少量水溶解加一滴盐酸定容至容量瓶中标准工作液吸取标准储备液于容量瓶中定容国家技术监督局批准实施仪器和设备实验室常规设备绞肉机孔径不超过配有冷凝管的三角瓶恒温水浴试管加热器或水浴可控温于分光光度计试样按取样试样准备生肉与生肉制品用快刀把完整的肉切成约的小丁装入密封样品盒中或者用耐热塑料袋真空包装在以上保温以下按步骤进行熟肉制品取有代表性的试样于

3、绞肉机中绞两次使其混匀贮于容器中备用制备好的试样要尽快分析若不立即分析要密封冷藏保存防止变质和成分变化贮存的试样在启用时必须重新匀质分析步骤试样前处理称取试样精确至放入磨口三角瓶中注意不要使样品粘在壁上加几粒沸石加入氯化亚锡溶液置于水浴上加热回流趁热将水解溶液过滤于容量瓶中用热盐酸反复三次冲洗三角瓶和滤纸冷却用水定容到刻度混匀吸取水解液于烧杯中用氢氧化钠溶液调节为过滤于容量瓶中用水冲洗烧杯和滤纸上的氢氧化亚锡沉淀反复三次把洗液并入滤液中以水洗至刻度摇匀备用测定标准曲线的绘制吸取羟脯氨酸标准工作液分别置于容量瓶中定容摇匀浓度分别为

4、取不同浓度的上述溶液分别加入具塞试管中加氯胺溶液摇匀后于室温放置加入显色剂摇匀塞上塞子于试管加热器或恒温水浴中保温后取出迅速冷却在波长处测定吸光值绘制标准曲线试样测定从容量瓶中吸取已制备好的样液于具塞试管中以下按步骤进行同时作空白试验分析结果的计算计算公式式中样品中羟脯氨酸的含量从标准曲线上查得相应的羟脯氨酸量称取试样的质量从容量瓶中吸取滤液的体积当符合允许差所规定的要求时取两次测定结果的算术平均值作为结果结果精确到允许差同一分析者同时或相继进行的两次测定结果之差不得超过平均值的附加说明本标准由中华人民共和国商业部提出本标准由中

5、国肉类食品综合研究中心归口本标准由中国肉类食品综合研究中心起草本标准主要起草人张燕婉焦烨