磁场结合阿霉素对肿瘤细胞杀伤效应初步的研究

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1、稳恒磁场结合阿霉素对肿瘤细胞杀伤效应的初步研究郭伟摘要：目的：研究磁场结合阿霉素对贴壁生长的肿瘤细胞协同杀伤的细胞学机制，并进一步探究磁场造成细胞周期阻滞的可能原因。方法：1．采用MTr法检测磁场、阿霉素及磁场+阿霉素对贴壁生长的肿瘤细胞(SMMC．7721、HepG．2和SW480)增殖的影响。2．通过光学显微镜、原子力显微镜、单细胞凝胶电泳、流式细胞仪等手段，检测磁场结合阿霉素对肿瘤细胞的协同杀伤效应。3．采用MTI"检测、细胞同步化、免疫荧光法及检测活性氧自由基(ROS)等方法进一步研究磁场及磁场联合阿霉索杀伤肿瘤细胞的

2、机制。结果：1．(1)SMMC一7721细胞以lxl05cells／mL的细胞密度接种，曝磁6h，即可对细胞生长造成显著的抑制效应(p<0．05)；细胞以5x104cells／mL的密度接种，曝磁9h稳恒磁场对其生长有极显著的抑制作用(p

3、h和24h即对SW480细胞增殖造成明显的抑制效应(p

4、pG．2细胞以lxl05cells／mL的细胞密度接种，10ng／mLlj,l霉素单独处理细胞12hB0可引起细胞生长抑制(p<0．05)：联合磁场作用时，细胞生长抑制所需的阿霉素浓度降4t￡Nlng／mL。当细胞以5x104cells／mL的密度接种时，100ng／m邛可霉素单独处理细胞12h可对细胞生长造成明显的抑制效应p

5、p<0．05)，阿霉素联合磁场作用时的浓度可下降到22．5ng／mL(p

6、现曝磁组细胞表面较为粗糙，表面有向外的隆起，且有数量增多的凹陷存在；细胞经阿霉素处理后，表面破损并出现孔洞结构；当二者联合作用时，细胞表面出现较大较深的不规则孔洞，且孔洞周边隆起，表面破坏严重。(3)磁场、阿霉素以及磁场联合阿霉素处理肿瘤细胞后，细胞周期分布均发生改变；不同组织来源、不同分化程度的肿瘤细胞之间存在差异。SW480和SMMC一7721细胞曝磁后，G2／M期细胞比例增多；而HepG．2细胞经磁场处理后，G1期细胞比例增加。磁场结合阿霉素处理，SMMC．7721细胞G2／M期细胞比例增多，而SW480与HepG．2细

7、胞G1期细胞比例升高。(4)单细胞凝胶电泳检测显示，阿霉素处理可引起细胞DNA损伤，曝磁组细胞未检测到DNA损伤，然而当磁场联合阿霉素作用后，检测到细胞DNA发生严重损伤，与阿霉素组相比存在极显著差异(p<0．01)。4．(1)当SMMC．7721、HepG．2以及SW480三种肿瘤细胞以不同密度接种，磁场结合不同浓度阿霉素处理不同时间，ROS检测得到一致实验结果：单纯磁场、单纯阿霉素及磁场结合阿霉素作用细胞后，与对照组相比，ROS均有明显增加(_p<0．01)。(2)不同周期时相K562细胞，对磁场或／和阿霉素处理的敏感性存

8、在差异，其中对磁场的敏感性排序如下：S期>G2期、M期；对阿霉素的敏感性次序稍有变化：S期>G2期>M期。(3)不同周期时相cyclinBl在细胞中处于不同位置，G1期、s期时位于细胞质；G2期时开始由细胞质转入细胞核；G2／M、M期早期时位于细胞核。经过不同时间曝磁处理后，