rem期睡眠剥夺和药物干预对大鼠认知行为及海马突触可塑性影响

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1、SDRSREMNREMBDNFPKACaMKMMPMWBⅡICEMTCCTCEN唧CMCⅢ心DABGAPDHBDNF0DPBSL1甲PPMFCFPSD英文缩略词sleepdepfivationrevivalsleeprapideyemovementnonrapideyemovementbrainderivedneuroproteinkina∞ACa2+／calmodulin．dependentproteinldnasemodifiedmultipleplatformmethodwesternblotimmunohistochemistryelectronmicrosco

2、petechniquescagecontroltankcontrolerrornumbertotalreactiontimesodiumcarboxymethylccllulosehorseradishperoxidasep-dimethylaminoazobenzeneglyceraldehydephosphatedehydrogenasebrainderivedneurotrophicfactoropticaldensityphosphatebufferedsolutionlong-termpotentionpefforantpathwaymossyfibercom

3、missuralfiberpostsynapticdensity睡眠剥夺恢复睡眠快速眼动非快速眼动脑源性生长因子蛋白激酶A钙依赖性蛋白激酶改良多平台水环境法蛋白质免疫印记免疫组织化学电子显微镜技术空白对照环境对照错误反应次数总反应时间羧甲基纤维素钠辣根过氧化物酶对二甲胺基偶氮苯磷酸甘油醛脱氢酶脑源性神经营养因子光密度磷酸盐缓冲液长时程增强穿通纤维通路苔状纤维联络纤维突触后致密物质独创性声明本人声明所呈交的学位论文是我个人在导师指导下进行的研究工作。除了文中特别加以标注和致谢的地方外，论文中不包含其他人已经发表或撰写过的研究成果。与我一同工作的同志对本研究所做的任何贡献均

4、已在论文中作了明确的说明并表示谢意．本人承担本声明的法律责任．学位论文作者签名：多饫玩扣卜签字日期：2Ⅳ7年／月≯日学位论文使用授权书声明本人完全了解第i军医大学有关保留、使用学位论文的规定，有■权保留并向国家有关部门或机构送交论文的复印件和磁盘，允许论文被查阅和借阅．本人授权第二军医大学可以将学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索，可以采用影印、缩印或扫描等复制手段保存，汇编学位论文。(保密的学位论文在解密后适用本授权书)学位论文作者签名：张林签字日期：矽7年f月a日I，目幻◆¨苁¨勘歹中文摘要目的通过观察不同程度快速眼动(REM)期睡眠剥夺和恢复及中枢性兴奋

5、药莫达非尼(modafinil)=P预后大鼠大鼠认知功能和海马突触可塑性变化，探讨REM期睡眠剥夺引起认知功能下降的机制及改善方法。方法成年雄性SD大鼠随机分为REId期睡眠剥夺组、空白对照组(Cc)和环境对照组(Tc)，REM睡眠剥夺组又分非药物空白对照组(controlGroup，CG)，助溶剂CMC组(CMC)，modafinil干预组(modafinil)，每组分为剥夺I天(SDld)、SD3d、SD5d、恢复睡眠6h(RS6h)和RSl2h，共5个时间点；采用改良多平台水环境REM期睡眠剥夺法(MMPM)进行REM期睡眠剥夺，利用Y迷宫测定大鼠空问学习记忆能力

6、，运用蛋白质免疫印记(WesternBlot)技术对大鼠海马synapsinI蛋白作选择性半定量分析，运用免疫组织化学(IHC)的方法分析大鼠海马CA3区突触素SynapsinI的表达，同时应用电镜技术观察海马CA3区辐射层突触的形态结构变化，观察突触可塑性。结果cC组与Tc组的EN及TRT均无明显差别(p>0．05)，与CC比较cG组大鼠EN在SD3d、SD5d时明显增加(p<0．05)，TRT无变化(p>o．05)，在SDld、SD3d、SD5d时modafinil组与CG组比较EN减少(p<0．05)，1rI玎无差别。免疫组化结果显示与cc组比较各睡眠剥夺时间点海

7、马CA3区synapsinI表达均减少(p<0．05)，在SDld、SD3d和RS6h、RSl2h各时间点，modafmil组synapsinI表达比cG组增加(p<0．05)，WesternBlot结果与之一致。电镜下观察SDld时，未用药大鼠突触前膜囊泡数量减少，活性区长度减小，突触后致密物变薄，modafinil干预后突触前膜囊泡数量增加，活性区增长，突触后致密物增厚。结论不同程度的REM期睡眠剥夺均会对认知功能下降，引起大鼠海马CA3区synapsinI表达变化，而莫达非尼可以使睡眠剥夺后synapsinI的表达减少，诱导大鼠海马