透析进样毛细管电泳-研究

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1、重庆大学硕士学位论文英文摘要-1interferencewasobserved,andtheconcentrationwasdeterminedtobe0.68mmol·L.4.Byappliedthismethodintotheevaluationofthemoleculeinteraction,thebindingconstantofpromethazinehydrochloridewithBSAwasobtained,thatis4-11.47×10L·mol.Inthismethod,the

2、interfereofmacromoleculeswhichexistincommoncapillaryelectrophoresisinteractionmethodswaseliminated,sothemethodispromisingintheinteractionanalysisbetweenmacromoleculesandsmallmolecules.5.Thismethodwasalsoappliedintothedeterminationofglucoseinhumanblood.

3、Electrochemicaldetectionwithcoppermicroelectrodeasworkingelectrodewasadopted.Wholebloodwasdilutedandinjecteddirectly.Theconcentrationofblood-1-1sugarwas5.53mmol·L，andthelimitofdetectionwas0.1mmol·L.Thetechnologymaybefurtherusedtomonitortheendogenousore

4、xogenoussmallmoleculesandtheirmetabolites,whichmaycontributetostudiesinlifescienceandpharmaceutics.Furthermore,asthecapillarycouldbeinsertedintotheanimal’sveinandequilibriumdialysisinjectionwasavailable,thismethodmaybeusedforinvivoanalysis.Keywords:Cap

5、illaryElectrophoresis,Dialysis,SamplePreparation,ElectrochemicalDetection,InteractionAnalysisIV重庆大学硕士学位论文1绪论1绪论过去二十年来，毛细管电泳(CapillaryElectrophoresis,CE)技术飞速发展。不仅发展了毛细管区带电泳（CZE）、毛细管凝胶电泳（CGE）、胶束电动力色谱（MEKC）、毛细管等电聚集（CIEF）、毛细管等速电泳（CITP）、非水毛细管电泳（NACE）[1]等多种多

6、样的分离模式，其应用领域也不断扩展。然而，相对而言，毛细管电泳采样和样品预处理技术的发展却相对缓慢，多数预处理仍然烦琐费时；而且目前多数采样方法只适合于离体分析。因此，发展新的可有效滤除大分子和颗粒物干扰的、简便易行且适于活体分析的毛细管电泳方法，对进一步扩展毛细管电泳的应用有重要意义。1.1毛细管电泳样品预处理毛细管电泳在无机离子和荷电分子的分析上有巨大的优势，过去二十年人们对其进行了广泛的研究。毛细管电泳以其高效、快速，分离条件易于优化，在生命体系分析中也广为应用。然而，毛细管电泳在生物样品分析

7、中尚存在一些困难：一方面，生物样品中待测物浓度通常较低，而毛细管电泳紫外检测浓度灵敏度不高，检测困难，通常需要对样品进行预富集。另一方面，生物样品基质通常会对分析产生严重的干扰。许多生物样品中含有的高浓度的蛋白质，如血清中蛋白浓度约为75g/L，不仅会产生干扰峰，还会不可逆地吸附在石英毛细管壁上的硅羟基上，引起电泳基线波动、干扰峰增多、峰形变差、重现性降低；样品中的颗粒物[2-5]还会堵塞毛细管；样品基质中高浓度的无机盐也会引起峰形变差和柱效降低。因此，进样前对样品进行适当的净化与富集处理是非常必要

8、的。按预处理的目的不同，预处理方法可分为浓缩和净化两类；按照分离原理的不同，常见的毛细管电泳样品预处理方法可以分为基于色谱原理的预处理技术(色谱预处理)、基于电泳原理的预处理技术(电泳预处理)和基于膜技术的预处理(膜预[3]处理)三大类。1.2样品预处理与毛细管电泳耦合方式样品处理单元与毛细管电泳的联用可以按耦合程度的不同由低到高分为：离[3,6]线(off-line)耦合、at-line耦合、在线(on-line)耦合和在柱(in-line)耦合(图1.1)。离线耦