桑椹红色素的提取纯化与性质.研究

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1、学位论文版权使用授权书本学位论文作者完全了解学校有关保留、使用学位论文的规定,同意学校保留并向国家有关部门或机构送交论文的复印件和电子版,允许论文被查阅和借阅。本人授权江苏大学可以将本学位论文的全部内容或部分内容编入有关数据库进行检索,可以采用影印、缩印或扫描等复制手段保存和汇编本学位论文。保密口本学位论文属于,在年我解密后适用本授权书。不保密醇学位论文作者签名:垫主、.乱指导教师签名:2008年‘月/汨2008年;月/力铉孚日独自J性申明本人郑重声明:所呈交的学位论文,是本人在导师的指导下,独立进行研究工作所取得的成果。除

2、文中已经注明引用的内容以外,本论文不包含任何其他个人或集体已经发表或撰写过的作品成果。对本文的研究做出重要贡献的个人和集体,均已在文中以明确方式标明。本人完全意识到本声明的法律结果由本人承担。学位论文作者签名:蕴友组日期:2008年乡月江苏大学硕士学位论文素为pH、温度和氧浓度,一些次要因素通常为存在的降解酶、抗坏血酸、二氧化硫、金属离子、糖及亲核试剂。此外,共色素(如单宁、咖啡酸等被证实是有效的共色素)形成作用也可能会影响花色苷的降解速度【3】。1.3花色苷类物质的分离鉴定方法1.3.1花色苷类物质的提取1.3.1.1传统

3、溶剂提取花色苷是水溶性色素,其基本骨架通常被一个或多个极性侧链如糖基酰化;另外,取决于pH,杂环上的氧原子可能带正电。所以,传统方法采用溶剂萃取来提取花色苷。常见的提取溶剂可分为以下三类【4。5】:(1)水:水是一种强的极性溶剂。植物中亲水性的成分,如无机盐、糖类、分子不太大的多糖类、氨基酸、蛋白质、有机酸盐、生物碱盐等都能被水溶出。为了增加某些成分的溶解度,也常采用酸水及碱水作为提取溶剂。酸水提取,可使生物碱与酸生成盐类而溶出,碱水提取可使有机酸、黄酮、葸醌、内酯、香豆素及酚类成分溶出。在花色苷类色素的提取中,水提法提取率

4、往往较低而极少采用。(2)亲水性的有机溶剂:一般是说与水能混溶的有机溶剂,如乙醇、甲醇、丙酮等,以乙醇最常用。乙醇的溶解性能比较好,对植物细胞的穿透能力较强。亲水性的成分除蛋白质、果胶、淀粉和部分多糖等外,大多数能在乙醇中溶解。还可以根据被提取物质的性质,来采用不同浓度的乙醇进行提取。(3)亲脂性的有机溶剂:一般是说与水不能混溶的有机溶剂,如石油醚、苯、氯仿、乙醚、乙酸乙酯等。这些溶剂的选择性强,不能或不容易提出亲水性杂质。因此,大量提取植物原料中的花色苷时,直接应用这类溶剂有一定的局限性。在上述溶剂中,由于乙醇无毒、经济,

5、提取效果也好,故一般多采用乙醇作为提取花色苷的溶剂。添加少量的盐酸或甲酸可以阻止非酰化物质的降解。工业生产中一般采用含O.1%盐酸的乙醇溶液提取花色苷。1.3.1.2超声波辅助提取超声波是频率高于20l(Hz的机械波,它在媒质中传播时可产生空化现象。超声波的空化作用是:在超声波声场中,振动负压区由于周围的液体来不及补充,形成无数的微小真空泡,而当正压来到时,微小气泡在压力下突然闭合,液体间猛烈产生极大的冲三I江苏大学硕士学位论文解等处理,使花色苷中的糖苷配基、糖和有机酸游离出来,再通过标准的糖苷配基、糖和有机酸作对照或参考文

6、献数据,进行色谱分析。应用于花色苷结构鉴定的传统色谱方法是纸色谱、薄层色谱法、GC、HPLC、RP.HPLC。表征花色苷结构的纸色谱分析方法,在鉴定时,即使没有标准品,通过同一样品在不同展开剂中的Rf值,对照标准的Rf值,也可粗略估计出样品所含花色苷的种类。此外,也可采用薄层层析法进行鉴定【141。叶兴乾等‘151采用纸层析法推测荸荠种杨梅中所含主要花色苷的苷原分别为矢车菊素、天竺葵色素、飞燕草素、芍药素。(2)光谱分析法光谱分析法包括紫外.可见光谱法Ⅳ炸娜印Pc护“圳和红外吸收光谱法。其中花色苷及其糖苷配基在紫外.可见区域

7、的吸收光谱对它们的结构表征很有用,这种方法主要包括以下几个要点【16邯】:可见光区的最大吸收波长(k觚.Ⅵ。);添加ALCl3对可见光区的最大吸收波长的影响;添加甲醇钠对可见光区的最大吸收波长(k缸.Ⅵn)的影响;花色苷在4401lIIl下的吸光度值与k默.Vin下吸光度值之比(~40mn几‰缸.Vin),该花色苷在300nm~33011111间有无吸收峰;该花色苷在紫外光下是否有荧光;通入二氧化硫后是否褪色等。花色苷的红外光谱主要有苯环、含氧杂环、糖和羟基甲氧基四部分。将样品作出红外光谱与标准图及数据对照,来了解花色苷的结

8、构。红外吸收光谱法:花色苷的红外光谱主要有苯环、含氧杂环、糖和羟基或甲氧基四部分。(3)其他方法目前,随着分析技术的进步,越来越多的方法应用于花色苷结构鉴定。如GC.MS分析花色苷与氯代三甲基硅烷反应后的产物,快速原子轰击质谱(FAB.MS)可以精确测定花色苷的分子量【18】,H.NMR和

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