不同来源甘草质量特征及评价的研究

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时间:2019-01-30

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1、独创性声明本人声明所呈交的论文是我个人在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果。尽我所知,除了文中特别加以标注和致谢的地方外,论文中不包含其他人已经发表或撰写过的研究成果,也不包含为获得北京中医药大学或其他教育机构的学位或证书而使用过的材料。与我一同工作的同志对本研究所做的任何贡献均已在论文中作了明确的说明并表示了谢意。签名:e过墼墨=日期:≥卯‘.‘.fL关于论文使用授权的说明本人完全了解北京中医药大学有关保留、使用学位论文的规定,即:学校有权保留送交论文的复印件,允许论文被查阅和借阅;学校可以公布论文的

2、全部或部分内容,也可以采用影印、缩印或其他复制手段保存论文。(保密的论文在解密后应遵守此规定)懿酗塾垒聊魏丛兰日期:鲨!.生I2,±兰塑翌——一——————————————————————————三中文摘要甘草为常用的大宗药材,随着时代的发展及对其研究的不断深入,甘草的应用领域在不断地扩大,导致甘草的需求量不断地增加,并远远超过其生产量。目前在野生甘草的自然分布区都开展了人工栽培甘草的生产。所以当今药材市场上同时存在着栽培与野生甘草,但二者的质量究竟有无差异,是否具有相同的疗效,不同种源、不同产地、不同生长年

3、限的栽培甘草是否具有相同的疗效,这些都是栽培甘草应用于I临床必须解决的问题。本研究采用对甘草中多类有效成分含量测定,同时进行HPLC指纹图谱特征分析研究,结合部分药效学试验结果,对当今栽培技术下内蒙古杭锦旗、赤峰及吉林白城生产的不同人工栽培甘草及杭锦旗道地野生甘草的质量特征进行了分析研究及评价,取得了如下结果:1.对栽培、野生甘草样品的HPLC指纹图谱中的主要指纹峰进行了归属解析:利用高效液相一质谱联用方法,共确定12个化含物:发现保留时间在22rain以前主要为二氢黄酮苷、查尔酮苷和黄酮督类;25—35ra

4、in之间主要为三萜皂苷类成分,35rain后主要为香豆素类等成分。2.产地对人工栽培甘草药材质量的影响研究发现:(1)对药材中四种有效成分含量都有影响,统计结果显示产地对甘草酸、多糖有极显著影响;对总黄酮、甘草苷影响不显著。所测四种成分都以内蒙古杭锦旗的含量最高,内蒙古赤峰与吉林自城差异不大。(2)产地影响匹种有效成分含量钓相对比例。(3)还发现各种黄酮苷、香豆素类化合物含量的相对比值也因产地而显示不同的规律。吉林白城的样品中香豆素等化台物相对含量较高;赤峰样品中香豆素等成分的比例很低。(4)明确了三个不同产

5、地栽培甘草的质量特征。3.生长年限对人工栽培甘草质量的影响研究发现:(1)生长年限对药材中总黄酮及多糖的含量有显著的影响。药材中甘草酸、甘草苷、总黄酮的含量在2~4年内基本是随着生长年限的延长:不断增加或基本不变,与年限基本是正相关;但多糖含量与生长年限为负相关,随着生长年限的延长而降低。内蒙古杭锦旗5年生样品中,发现各种成分的含量都有所降低。(2)生长年限对甘草中甘草酸、甘草苷、总黄酮、多糖含量的相对比例影响不明显,但对总黄酮中黄酮瞽类含量的影响较大,它们含量的相对比值随生长年限延长而增加,即在总成分中所占

6、比例扩大;香豆素类成分在总成分中所占比例变化不明显:异甘草苷(Isoliquiritin)随着生长时间延长丽逐渐下降。4.种源对人工栽培甘草质量的影响研究发现:种源对样品中三种(类)有效成分含量的影响不大,主要影响黄酮类成分。5-对杭锦旗不同野生甘草研究发现:(1)地上茎为红色与绿色的野生甘草中四种有效成分的含量及相互之间的比例接近,差异不明显。HPLC指纹图谱相似性也很高:(2)甘草根中甘草酸、甘草苷的含量都明显高于根茎,总黄酮与多糖的差异不显著;(3)不同等级药材中四种有效成分含量与等级的高低,不同来源甘

7、草的质量特征及评价研究无关:(4)普通与特殊结构(只有主根的样品)甘草相比,甘草酸含量有显著差异,普通甘草中甘草酸的含量要高于特殊结构的甘草。但甘草苷、总黄酮、多糖没有明显的差异。6.比较人工栽培与野生甘草质量发现:(1)多数人工栽培甘草中甘草苷、总黄酮、多糖与野生甘草含量相差不大,甘草酸的含量有明显的差别;(2)内蒙古杭锦旗3~5年生人工栽培甘草中各成分的含量都与野生甘草相近,但甘草苷的相对含量高;(3)野生甘草中四种有效成分比例相对稳定。但栽培甘草中四种成分比例与产地有关。从野生与栽培甘草HPLC指纹图谱

8、发现,二者图谱中多数指纹峰的峰形、保留时间基本一致,所含的化学成分基本一样;人工栽培与野生甘草保留时间在35rain后的4个峰有较明显差尉,即野生品的一个峰在栽培品图谱中不明显,而栽培品的三个色谱峰(包括甘草香豆素、甘草醇、异甘草醇)在野生品中不明显。因此可以利用这两组峰来初步辨别野生和栽培品。7.不同质量特征的野生与两种栽培甘草保肝降酶药效学研究发现:(1)对由四氯化碳引起急性肝脏损伤,虽然三个供

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