成人脂肪基质干细胞组织工程.研究

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1、Thestudyoncultivationofhumanadiposetissue-derivedstromalcellsonRotarycellculturesystemPostgraduate:ChenWeiHungDirector:Prof.:WangZhiChungMajor:PlasticSurgeryAbstractObjective:ToexplorethepossibilityofculturingAdiposetissuederivedstromalcells(ADSCs)inlargequan

2、titybymicrocarriersuspensionsystemandthemultidifferentiationabilityoftheculturedcells.Methods:AdulthumanADSCsculturedonmicrocarriersinspinnerflaskswerecomparedwiththoseofstaticallyculturedin12wellplates.FortheadherentgrowthofADSCs,Cytodex3,onekindofmicrocarri

3、es,wasUSedattheconcentrationof5g/L.Thecellswereseededinadensityof1×105/Linbothculturalsystems.Results:After9daysofcultivation,theresultsshowedthatamaximumviablecelldensity(1.5×109cells/L)wasreachedinspinnerculturedsystem,whereasthecelldensityincreasedtoamaxim

4、umof3.4×106cells/LOnthe7thdayinstaticculturesystem.Afterspinnerculturefor1days,theADSCsstillmaintainedthecharacteristicsofstemcells.CONCLUSION:MicrocarrierculturesystemisaneffectivewaytoexpandADSCSastheseedingcellsintissuesengineering.Keywords:Rotarycellcultu

5、resystemeellculturemicrocarrier2(RCCS)adiposestromalcellstissueengineering成人脂肪基赁斡细胞组缴工程研究硕士研究生:陈威宏指导老师:王志军教授专业名称:外科学前言脂肪组绒工程晕己在人们的觐念中形成监丽始稹檀探索遣一领域,厘瘤的切除、烧俦後组微缺损,及人髓老化的青春重建都迫切需要脂肪组缀工程孕的指尊柬解决遣些影罄人叛生活品耍的同题。富具有特定功能的穗子细胞(seedcell)舆可降解生物材料(biodegradablepolymer)混合韭在

6、髓外培善一段畴同或植入髓内後,随著穗子细胞的不断增殖、细胞外基夤分泌和生物材料的逐渐降解、吸收,最终形成具有正常结耩和功能的特定组缄或器官。近年来,旋耨生物反虑器系统(RCCS)已缝成羯虑用微载髓技衍造行细胞大规模掳增的一棰鞍常用细胞培蓄系统。孩系统是基於美固航空航天局耥模撮空同微重力效虑而设计的一獯生物反感器⋯。RCCS既可以用於微载髓大规模细胞培饕,又能在其内培育细胞舆支架形成的三雒空同棱合髓【21。旋转壁式生物反虑器的培善容器中充满了用作培饕基的生畏液以及细胞或组缴材料。整倜容器由鼋橇鹱勤沿水辈轴旋转。细胞

7、颗粒或细胞微戟髓梭合物在水辈轴内建立均夤的液髓悲浮孰跻。培善基以及细胞颗粒随容器在一起旋耱且不舆容器壁和他物相撞。由於在整佃的培饕系统中燕推造器、空氟升液器、氟泡或搅拌器,使破壤性虑力、减到最小【”。’脂肪组绒工程的獯子细胞:遣些细胞可以由前醴细胞诱尊而来;也可以在相似的微瑗境中生畏庭生。缝遇多年努力,最近世界上第一佃人的前脂肪细胞系已经建立起东了【41,遣是一佃徒婴兄皮下脂肪组擞的血管基底细胞(stromalvasculercell)经遇特定磊撙傺件建立起柬的,在一定的羲尊分化傺件下,此细胞系的95%的细胞都可

8、以分化成成熟的脂肪细胞。圆内擘者研究秤估不同代次人前脂肪细胞(Pra)的老化程度,稳脂肪组缴工程送挥合遗代次的棰子细胞提供部分寅翳依摅。得出结输:各代Pra细胞老化程度不同,15代以後的细胞老化明颢【51。除了用上述前脂肪细胞系造行髓外增殖分化研究以外,也可以用原代培善的脂肪同充夤斡细胞造行颓似的研究。使用原代脂肪局充夤斡细胞的馒势:第一,原代脂肪盟充贾斡细胞是二倍髋,能

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