不同保存方法对多浪羊精液品质与受胎效果的影响

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1、万方数据新疆农业大学硕士学位论文1．1绵羊精液保存的研究进展第1章绪论保存精液有常温、低温和冷冻三种不同的方式，以上三种方式是绵羊进行人工授精过程中非常重要的技术且不可缺少的环节之一，长时间保存的难题得以解决，从而不再受时间和空间的约束，并且能将优良公畜的利用率最大限度地提高，与此同时，更有效的促进育种以及品种的改良工作。除此之外，优良种畜可以在很短的时间内完成后裔测定，并且在降低生产成本、优良遗传特征、血统更新、保种、引种等方面，无论是某一品种或者个体在保留和恢复上都发挥其重要作用。故此，绵羊精液保存的研究具有广泛的前景和潜在的利用价值。目前广泛使用的

2、精液保存方法包括液态保存和冷冻保存两种。上述两种保存方式各有不同优点及不足，在冷冻精液上可以体现出不受区域及时间的制约，以及优良公畜的遗传资源能够得到长期保存的优点。但绵羊精液冷冻保存技术在生产实践中广泛应用及推广受到许多因素的限制，比如冷冻精液必须在设备齐全的条件下进行，操作过程复杂，技术需求高，解冻精子活率降低，而导致人工授精受胎率的下降，因此这种保存方法只限于实验室做体外受精实验。绵羊人工授精主要利用液态精液进行的，其主要目的就是延伸精子的存活时间，进而使精液的利用规模拓展及提高种公畜的利用率。此保存方法对设备要求较低，操作简便，能使精液保持较高的

3、活率。但是将精液液态保存时间相对较短，而且精子的活率随着时间的延伸而相对下降，此外受地域和时间的限制。1．1．1绵羊精液的液态保存目前精液以常温(15～25。C)保存，低温(O～5℃)保存和冷冻(．78～一196℃)保存等三种方式进行保存。常温和低温保存都在O℃以上，即液态形式进行短时间保存，称之为液态保存。超低温保存则在O℃以下，通过冻结形式进行长期保存，称之为冷冻保存。不管以何种形式保存，其主要是为了限制精子的代谢活动，并且减少能量耗损，从而精子的保存时间得以延伸并且尽量避免精子失去受精能力。目前在实践中经常使用万方数据不同保存方法弼多浪羊精液晶凑及

4、受虢效果豹影隋如下途径来有效控制精子的代谢活动：①将精液隔离空气，从而使得精子处于缺乏氧气的环境中；②为了将精子处在弱酸环境中而添加合适的物质；③通过将温度下降使精子处在低温环境中；④通过添加一定量的保护和营养物质，从而弥补精子所耗损的能量，并且使精子处于合适的成活环境【11。1．1．1．1保存温度常温保存可以防止精子发生冷应激，从而避免温度对精子的损伤，其温度范围为15～25℃。但由于保存温度比较高，精子的能量消耗及有害物质产生比较多，保存时间相对比较短，因此这种方法只适合于绵羊精液的短期保存以及人工授精。将精液通过低温保存，可以有效降低其能量消耗以及

5、有害代谢物的产生，可以延伸精子体外的存活时间。据有关研究表明，将山羊精液进行低温保存时，一般将己稀释好的精液通过海绵包裹并放在普通冰箱里保存或在90min内降到4。C等方法【21。还有相关研究表明，采出精液后3h从30"C降到5。C，保存48h活率高达O．7【31。绵羊精子容易出现冷休克，因为精子对降低温度特别敏感。随着温度的变化膜稳定性则会降低，这大概与膜脂双层的成分关联的，由于温度变化会影响到质膜的流动性，致使膜易渗透，使Ca2+更容易渗入，从而激发获能有关的Ca2+信号传送。正常的获能中所发生的情况与温度降低所引起的膜稳定性降低以及容易通透现象十分

6、相似[41。此外，随着降温，膜磷脂的横向运动受到制约，致使其由液态变成胶冻状。据相关研究得知，因为不同膜脂的相变温度不一样，所以膜脂之间相位会发生变化，从而引起膜蛋白不可逆地聚集到一起【5】。据戈新等对精液在30～5。C降温过程中的敏感温度区域测定研究表明，敏感温度区域与稀释液有密切关系，即理想的稀释液对精子起极好的保护作用，从而能减轻由于快速降温所引起的冷打击程度[6]。1．1．1．2稀释倍数精子射出之后，通过副性腺分泌的精清作用稀释，与此同时，得到运动能力。精清保存时对其进行稀释，其目的主要是为了控制代谢、减少精子运动、延伸体外获能时间、扩展精液体积

7、以及提升其利用率。较低倍数的稀释会加快精子运动，这可能是由于稀释了精清中一些控制代谢的物质。然而过度稀释则会引起精子失去运动能力、受精能力及代谢活性，也就是稀释效应[71。精液的稀释水平直接关系到冷冻效果的成功与否，因此2万方数据教疆农业大学姣±字位论文精液的稀释主要为了保护精子在降温、冷冻和解冻过程中避免受到低温损坏。据Sminov等研究表明，稀释比例由2倍提高到6倍有助于保存精液的复苏，而且稀释比例由3倍提高到5倍或从5倍提高到11倍时，产羔率却有所下降【引。也有研究表明，高倍稀释(>16倍)会使精子的钙调蛋白发生变性导致精子钙的损失，从而使得产羔率

8、下斟91。此外，精清中除了有保持精子运动和存活所需要的离子等外，还包含保持精子膜