川西獐牙菜醇提物上调hepg2细胞膜转运蛋白mrp3,核转录因子sp1及核受体cpf,pxr表达

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1、川西獐牙菜醇提物上调HepG2细胞膜转运蛋白MRP3、核转录因子SP1及核受体CPF、PXR表达全文参考文献按先后出现排序，请核对？刘畅，李绍雪，高宇，柴进，张全，陈文生（400038重庆，第三军医大学西南医院全军消化病研究所）[摘要]目的体外培养HepG2细胞观察川西獐牙菜醇提物(swertiamussitiifranch)对多药耐药相关蛋白3(multidrugresistanceprotein3,MRP3)、核转录因子SP1（specificityprotein1transcriptionfactor，SP1)及核受体孕烷X受体(pregnaneXreceptor，PXR)

2、、Cyp7a启动子结合因子(cyp7apromoterbindingfactor,CPF)表达的影响。方法用MTT比色法检测川西獐牙菜醇提物的最佳作用浓度，再分别于0、12、24、48、72h刺激HepG2细胞，抽提细胞的RNA、膜蛋白和核蛋白，采用荧光定量PCR和蛋白免疫印迹技术检测膜转运蛋白MRP3、转录因子SP1及核受体PXR、CPF在转录与蛋白水平的表达变化。每个时间点设立阴性对照DMSO组和阳性对照UDCA组。结果MTT比色法选取50mol/L作为工作浓度刺激细胞，与阴性对照组相比后发现：川西獐牙菜醇提物可显著诱导HepG2细胞膜转运蛋白MRP3的mRNA(24、48、

3、72h增高0.68、1.46、2.10倍，P<0.05)和蛋白水平(24、48、72h增高1.20、1.19、1.55倍，P<0.05)的高表达，其作用强于UDCA。川西獐牙菜也可明显上调转录因子SP1mRNA(24、48、72h增高1.31、1.32、1.13倍，P<0.05)及蛋白(24、48、72h增高0.74、0.79、1.1倍，P<0.05)的表达，UDCA组SP1表达无明显变化。核受体PXRmRNA（24、48、72h增高0.99、2.12、2.13倍，P<0.05）和蛋白水平(24、48、72h增高0.40、0.53、0.52倍，P<0.05)表达增高，作用强于UD

4、CA。CPF的mRNA（72h增高0.7倍，P<0.05）及蛋白水平(48、72h增高0.96、0.90倍，P<0.05)上调作用效果略低于UDCA组。结论川西獐牙菜醇提物可刺激HepG2细胞膜转运蛋白MRP3上调，且有可能是通过核转录因子SP1及核受体PXR、CPF上调其表达。[关键词]UDCA；川西獐牙菜醇提物；MRP3；SP1；CPF；PXR[中图法分类号][文献标志码]ASwertiamussitiiupregulatesexpressionofmembraneproteinMRP3、nucleartranscriptionfactorSP1andnuclearrecep

5、torsPXRandCPFinHepG2cellsLiuChang,LiShaoxue,GaoYu,ChaiJin,ZhangQuan,ChenWensheng(InstituteofGastroenterologyofPLA,SouthwestHospital,ThirdMilitaryMedicalUniversity,Chongqing400038,China.)[Abstract]ObjectiveToobservetheimpactofSwertiamussitiiontheexpressionofmultidrugresistanceprotein3(MRP3),sp

6、ecificityProtein1transcriptionfactor（SP1)，PregnaneXreceptor(PXR)andCyp7apromoterbindingfactor(CPF)inHepG2cellsinvitro.MethodsTheoptimalconcentrationofSwertiamussitiiusedtostimulateHepG2cellswasdeterminedbyMTTmethod.Then，TotalRNA,membraneproteinandnuclearproteinwereextractedfromHepG2Cellsat0h，

7、12h，24h，48hand72hpostco-culturedwithSwertiamussitii.TheexpressionofMRP3，SP1，PXRandCPFatmRNAandproteinlevelweredetectedusingreal-timequantitativePCRandWesternblotting，respectively.ResultsTheexpressionofMRP3wassignificantlyinducedbySwertiamussi