层析技术习题da

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1、层析技术习题一、选择题1.层析图是指（C）A.某组分的流出

2、11

3、线B.某组分的层析峰C.整个层析分离过程所得的各组分流出曲线D.层析分离过程所得的单组分流出体积2.在层析技术中，分配系数是指（A）A.一种化合物在固相与流动相中的分配达到平衡时的浓度比B.二种化合物在固相与流动相屮的分配达到平衡时的浓度比C.一种化合物在固相与流动相中的分配达到平衡时的质虽比D.二种化合物在固相少流动相中的分配达到平衡吋的质量比3.卜列哪项不是层析技术中的速率理论指出的影响柱效的因素：（D）A.涡流扩散B.分子扩散C.传质阻力D.理论塔板高度4.下列哪项不是吸附层析常用的吸附剂

4、：（D）A.氧化铝B.硅胶C.活性炭D.琼脂糖5・凝胶层析分离混合物的基木原理是：（B）A.吸附力差界B.分子筛作用C.离子交换D.配体亲和差界6.关于离子交换层析的描述下列哪一项不正确：（B）A.离了交换剂通常不溶于水B.阳离子交换剂常可离解出带正电的基团C.阴离子交换剂常可离解出带正电的基团D.阳离子交换剂常可离解岀带负电的基团7.分离鉴定氨基酸的纸层析属于（D）A、亲和层析B、吸附层析C、离子交换层析D、分配层析二、是非题（对的打“V”，错的打“X”）1.色谱法就是分离有色物质的方法。（X）2.层析法的最大特点是分离效率高，但它只能分离各种性质相类似的物

5、质。（X）3.固定相是层析的一个基质。它对以是固体物质（如吸附剂，凝胶，离子交换剂等），也可以是液体物质（如固定在硅胶或纤维素上的溶液）。（V）4.分配系数是指在一•定的条件下，某种组分在固定相和流动相屮分配达到平衡时的浓度比值。（丿）5・迁移率（或比移值Rf）是指：在一定条件下，在相同的时间内某一组分在固定相移动的距离与流动相木身移动的距离Z比值。（V）6.在层析分析中，通常是根据层析峰的位置来进行定性分析，根据层析峰的而积或高度进行定量分析的。（V）7.凝胶层析只能分离分子量相差悬殊的混合物，如Hb与CuS04o（X）8.柱层析中，当柱长L一定，理论塔板数

6、n愈人，柱效愈低。（X）三、填空题1.柱层析中，当柱长L一定，理论塔板数n愈大,柱效愈高。2.柱层析法的定量依据是层析峰的峰高和峰面积。3.凝胶层析法分离血红蛋白和CuS04混合液，先流出层析柱的是—血红蛋白4.根据分离的原理不同分类，层析法主要可以分为吸附层析、分配戻析、凝胶过滤戻析、离子交换层析、亲和层析等。5.凝胶过滤层析是以具有网状结构的凝胶颗粒作为固定相，根据物质的如A尘进行分离的--种层析技术。6.离子交换层析是以离子交换剂为固定相，根据物质的帯电性质与荷电虽不同而进行分离的-•种层析技术。7.一般讲，柱层析加样量尽量少些，分离效果比较好。通常加样

7、量应少于20%的操作容量,体积应低于型的床体积，对于分析性柱层析，一般不超过床体积的丄蚩。四、名词解释1.分配系数是指溶质在相互接鮭而互不相溶的两种溶剂屮的溶解达到平衡时（1分），该溶质在两相溶剂小的浓度比（1分）。分配系数是代表物质种属的特征常数，是层析法分离纯化生物人分子的主要依据。在层析技术中，分配系数是指一种化合物在固定相与流动和中的分配达到平衡时的浓度比（2分）。K=CS/Cm=物质在固定相的浓度/物质在流动相的浓度（1分）2.Rf值层析定性实验屮，比移值（1分）Rf表示：Rf=原点至色斑中心的距离/原点至溶剂前沿的距离（3分）Rf值取决于被分离物质

8、在两相间的分配系数以及两相的体积比。由丁•两相体积比在同一实验条件下是常数，所以Rf值主要决定于分配系数。不同物质分配系数不同，Rf•值也不同。对于某种给定的化合物而言，在标准条件下Rf•是常数。（1分）3・分子筛利用具有一定孔径的高分了聚合物制成的、主耍用于分离分了量不同的混合物的实验材料和方法（3分）。如PAGE能使混合物按分子量由小到大依次分离（1分）；而凝胶层析则能使混合物按分子量由大到小先后依次分离（1分）。4.保留retentionvalue）是表示样品各组分在层析柱中停留时间的长短（保留时间）或组分流出时所需流动相体积的大小（保留体积）。5.理论

9、塔板等效高度（heighttoatheoreticalplate,HETP）,当流动相通过林的一定高度,在离开这段柱时，流动相屮某组分的平均浓度与固定相中的平均浓度可以达到分配平衡，完成这一平衡所需要的柱长称为理论塔板等效高度，简称板高，以H表示。4.分离度（resolution）——层析分离效能的总指标Rs的定义为：两相邻组份层析峰保留时间Z差少两峰基线宽度总和Z半的比值，它可在层析图中用下式计算而得：Rs=（tR2-tRi）/l/2（Wbl+Wb2）=2jtR/（Wbl+Wb2）Rs定量地描述了混合物中相邻两组份在层析柱中的分离情况。7・柱效率：混合物被分

10、离的程度（1分）及单组分被洗脱的体积（