7种鳞翅目昆虫细胞系染色体分析

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1、文章编号：100121498（2008）042）4932）77种鳞翅目昆虫细胞系染色体分析张欣，冯颖3,丁伟峰，马涛，马艳（中国林业科学研究院资源昆虫研究所.国家林业局资源昆虫培育与利用重点实验室云南昆明650224）摘要:采用直接法制备传代细胞染色体标本、常规GSsa染色、显微镜下计数中期分裂相染色体数目的方法对7种鳞翅目昆虫细胞系进行了染色体分析，得出了各种细胞系染色体分析所需要的秋水仙素浓度与处理时间以及低渗浓度和处理时间的范围；7种鳞翅目细胞系染色体均表现岀典型的鳞翅目昆虫传代细胞的核型特征:染色体数目众多，异倍化严重•多为弥散型的

2、着丝粒的短杆状、颗粒状、点状或圆球状。矢键词:鳞翅目；细胞系:染色体:核型:异倍化中图分类号：Q996文献标识码:ATheChromosomeAnalysisof7hsectCellLhesfromLepidopteraZHANGXin,FENGYing,DINGWeijen^,MATao,MAYun(ResearchInstituteofResourceInsects,CAF;TheKeyLabomr>tyofCultivatingandUtilizationofResourceInsects.ShiteForest^Adininistn

3、itbn,Kunming650224,Yumuin,China)Abstract:ThechiomosDmesof7insectcelllinesfromLepidopterawereanalysedTheresultsshowedthatthefavorabletreatedconcentrationandtineofcolchicineselutionandhypoIonicKC1solutbnforeachcellline,andthechlomosomesofthe7Lepidopterncellsdisplayedthetypic

4、a1kaiy)typechanicteristicsofLepidopterace11lines:thesecc11shadagreatvariationinchmmosomcnunber,andhaddeeplyhetciopbid,chribosumcswithdifiiisccenleiomeresweresliortpole21ike,pellet21ikeand

5、金项目：国家林业局"948"项目编号：2002方2）和林业公益性行业科研专项（编号：4羽）作者简介：张欣（1981-）女云南彝良人硕士.3通讯作者.近年来•昆虫细胞培养技术作为现代实验生物学的重要手段之一•被广泛地应用于医学、农业及牛物学的各个方面“宀。特别是自Snith等⑶创建了昆虫杆状病毒表达系统以来，昆虫杆状病毒作为一种安全、高效的表达载体被广泛应用，从而使昆虫组胞培养倍受青睐。由于昆虫细胞大规模培养、昆虫杆状病毒表达系统、生物杀虫剂、抗菌肽等的研究和发展，昆虫细胞作为昆虫生理生化研究、生物反应蛊以及表达基因产物等的重要研究工具，更是

6、受到也来越广泛及深入的研究和利用，4,o然而，对昆虫纽胞染色体及细胞的有丝分裂等生物学的研究却并不多见，这些研究的滞后阻碍了对昆虫细胞的进一步研究和应用l5Io细胞系的生物学特性很大程度依赖于其遗传稳定性⑻;体内细胞的遗传学性状是稳定的，而在离钵培养过程中却很容易发生改变，而作为转基因载钵或表达载体必须对其染色体和DNA的特性有比较清楚的了解。目前，对鳞翅目（Lepidoptera）昆虫组胞系染色体的研究只处于在成系时硏究其是否异任化或多倍化的阶段，并没有对其染色体的制片方泡和染色体数目进行详细的研究及介绍l7-9,o由于右细胞系染色体分析

7、中，秋水仙素及低渗溶液对细胞是否体现分裂相的影响较大dH，所以在本研究中设计不同的秋水仙素和低渗溶液处理时间及浓度对7种鳞翅目昆虫细胞系进行了染色体分析，其中包括目前被广泛应用的工程细胞系S®及S伦1,以拆得各株细胞染色体分析的具体条件，从而总结出一套可行的鳞翅目昆虫细胞系染色体分析方法；并再望得至啲分析结果能为这7种细胞系的进一步研穷和应用提供遗传学及细胞生物学方面的背景资料及数据参考。1材料与方法固定15min,150g下离心5min,弃上清。1.24重复固定加入7mL固定液，混匀屋温下固定15min,150g下离心5min,弃上清。

8、1.25制片用少量的固定液（01〜a3mL,应依照细胞的多少来加）混匀细胞,从高处滴细胞悬液至干净的载玻片上，室温下自然干燥。1.26染色吉姆萨染液染10~15min.流水冲洗，