呼吸道感染治疗患者与健康者咽部菌群分布差异

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1、呼吸道感染治疗患者与健康者咽部菌群分布差异海晓欧陈冬梅徐静崔艳丽（沈阳医学院病原牛物学教研室辽宁沈阳110000）【摘要】目的比较5天广谱抗牛素治疗后的上呼吸道感染患者和健康人群的咽部菌群分布情况方法沈阳医学院附属奉天医院呼吸科门诊及住院患者60例为治疗组，沈阳医学院在校师牛60例为对照组，采集咽试标木进行需氧菌和厌氧菌的分离、培养及鉴定。结果上呼吸道感染治疗后患者的咽部需氧菌密度（p<0.05）与厌氧菌密度（p<0.001）明显高于对照组，有显著性差异；同时致病菌和条件致病菌的检出率明显增高，并出现高耐药菌株。结论广谱抗牛素的治疗导致呼吸道菌群种类和数量的变化，并忖选择击高耐药性细菌。提

2、醒临床严格掌握抗菌药物的应用指征，避免经验用药。【关键词】呼吸道感染咽部菌群抗牛素【中图分类号1R446.5【文献标识码］A【文章编号12095-1752（2012）16-0060-02上呼吸道是开放性的通道，一般寄居着一定数量和一定种类的微牛物，它们在宿主和外环境的影响下保持着微牛态的平衡。这种平衡是保护机体抵抗致病菌的重要因素⑴。感染和抗生素的应用是微牛态平衡与微牛态失调相互转化的重要内容，尤其是在应用抗感染的药物过程中，由于体内对药物敏感的细菌被杀死，而一些对抗感染药物具有耐药性的细菌趁机大量繁殖，引起严重的感染⑵。木文通过对比研究上呼吸道感染经过抗牛素治疗后患者与健康者咽部菌群种类

3、和数量分布的差异，以此探求符合自然规律的保护呼吸道微牛态平衡的治疗方法。1对象和方法1.1对象2011年12月〜2012年5月，采集沈阳医学院师牛60例作为对照组，沈阳医学院附属奉天医院呼吸科门诊及住院的上呼吸道感染患者60例作为治疗组。年龄在18〜50岁，男女各半。1.2入选标准1.2.1对照组近2周内无发热，咽痛，咳嗽等上呼吸道感染症状并口未用过抗生素,无吸烟史。1.2.2治疗组经确诊为上呼吸道感染并应用5d广谱抗生素，且无其他并发症，无吸烟史。1.3试剂和质控菌株所用的干粉培养基及添加剂和药敏纸片购自OXOID公司；质控菌株人肠杆菌(EscherichiacoliATCC8739)铜

4、绿假单抱菌(PseudomonasaeruginosaATCC9027)金黄色葡萄球菌(StaphylococcusaureusATCC6538)为本实验保存。1.4方法1.4.1标本采集与培养清洁口腔后用无菌棉拭子在咽后壁旋转2周，即刻放入装有2mL无菌PBS缓冲液及玻璃珠的小安培瓶中，用力摇晃。取菌悬液进行10倍系列稀释，选择稀释度10-4(菌落数在100〜300个)的混匀液体100&nw儿接种到哥伦比亚血平板、巧克力平板、厌氧血平板、麦康凯平板、沙保弱平板、TPY平板、MRS平板。其中血平板、沙保弱平板、麦康凯平板置于37°C需氧培养18〜24h;巧克力平板置于35〜37°C5%C0

5、2培养箱培养18〜24h;厌氧血平板、TPY平板、MRS平板37°C厌氧箱培养48〜72h[3]。1.4.2菌落计数及菌株纯化以菌落的颜色、大小、凹凸、溶血、边缘整齐及湿润等形态特征进行菌落分类和计数。分别挑取上述各平板上的每种菌落进行革兰染色，记录镜下染色性、排列及结构特征。将每种单个菌落分段划线转种于各自相应的培养基上，培养条件同上，直到得到纯菌株。厌氧菌株同吋进行需氧条件下的培养对照，以区分专性厌氧菌及兼性厌氧菌。1.4.3生化鉴定以法国生物■梅里埃全自动鉴定仪ATBNEW及相对应的法国生物梅里埃生化鉴定试剂条鉴定出菌种名称。1.4.4药敏实验应用纸片扩散法测定药敏实验，双纸片协同法

6、检测超广谱β-内酰胺酶(ESBLS),头孑包西丁三维试验检测AmpC酶。1.5统计学处理检测数据应用统计学软件SPSS13.0进行统计学分析,数值以均数±标准差(IglOnX±SD)表示,计量资料采用t检验,计数资料采用X2检验，以P<0.05为差异有统计学意义。2结果2.1咽部菌群密度的比较为了研究上呼吸道感染治疗后咽部菌群数量的变化，我们选择上呼吸道感染经5天广谱抗生素治疗的患者和健康人进行咽部菌群定量分析比较，统计方法采用t检验。结果见表1表1治疗组与对照组菌群密Jt(lg10nX±SD)比较注：与健康组比较a：P<0.

7、05；b：P<0.0012.2咽部菌群检出率的比较健康人群的咽部通常保持着微生态的平衡，菌群的种类和数量比较恒定。为了研究抗生素的应用对菌群分布的影响，我们对主要菌群的检出率进行了比较分析，统计方法采用X2检验。结果见表2表2治疗组与对照组咽部主要菌群的检出率(％)2.3条件致病菌耐药性的比较从表2可以看出，治疗后条件致病菌的检出率明显增高。为了了解抗生素应用对细菌耐药性的影响，我们对检出的肺炎克雷伯菌亚种、人肠埃